Um ensaio de código de barras para caracterização fenotípica e funcional de células imunes
Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 5:42 min. • July 8th, 2025
Comece com amostras de teste contendo células imunes estimuladas e fixas.
A estimulação induz a expressão de marcadores específicos nas células, enquanto a fixação preserva marcadores fenotípicos, incluindo antígenos de superfície celular, e marcadores de estado funcional, incluindo citocinas.
Adicione uma combinação única de anticorpos conjugados com isótopos de metais pesados a cada amostra.
Essa técnica codifica várias amostras de forma exclusiva, distinguindo cada amostra por sua combinação de isótopos de metais pesados.
Os anticorpos se ligam a um epítopo comum, codificando todas as células das amostras.
Combine todas as amostras com código de barras em um único tubo, para processamento a jusante.
Adicione um coquetel de anticorpos conjugados com metal para corar os antígenos da superfície.
Adicione tampão de permeabilização para aumentar a permeabilidade da membrana celular para coloração intracelular.
Adicione outro conjunto de anticorpos conjugados com metal para corar citocinas intracelulares.
O código de barras permite a coloração e aquisição simultâneas das amostras agrupadas por citometria de massa. Essa técnica maximiza a eficiência do ensaio, melhorando a avaliação do
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