Preparação de Amostras para Análise Mass Citometria

O objetivo geral deste processo de preparação de amostras é produzir uma coloração de anticorpos robusta e consistente de diversas amostras para permitir a interrogação de populações de células heterogêneas. Este método pode ajudar a responder a perguntas sobre identidade celular, sinalização celular e resposta celular em uma população celular heterogênea complexa. A principal vantagem desta técnica é que ela permite a medição de níveis de proteína de alto parâmetro no nível de célula única.

Demonstrando este procedimento estará Aundrietta Duncan, uma estudante de pós-graduação do nosso laboratório. Para cada amostra de suspensão de célula única, ressuspenda-a em quatro vezes 10 elevado a sexto por mililitro em meio livre de soro, adicione 500 microlitros de cisplatina 50 micromolar recém-preparada por 2/10 nas seis células e incube as amostras em um agitador orbital com mistura constante à temperatura ambiente. Após um minuto, tempere a cisplatina com um volume igual de tampão de lavagem e centrifugue as células.