Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 5:06 min. • July 8th, 2025
Pegue um ovo de galinha fertilizado contendo um embrião em estágio inicial.
Esterilize a casca e abra-a com cuidado.
Remova o embrião. Dissecar e transferir a cabeça para uma placa de cultura contendo um tampão. Remova o globo ocular.
Faça uma incisão e remova as camadas da pele, expondo o prosencéfalo e o mesencéfalo.
Remova a camada membranosa interna e os vasos sanguíneos. Disseque e transfira o prosencéfalo para uma placa de cultura com um tampão.
Corte o tecido em fragmentos menores e transfira-os para um tubo cônico. Depois que os fragmentos se acomodarem, remova o buffer.
Adicione uma solução enzimática proteolítica. Incubar para digerir a matriz extracelular do tecido e soltar os neurônios.
Remova os meios ricos em enzimas, lave com meios neurobasais, removendo quaisquer enzimas restantes.
Adicione meios neurobasais. Dissocie mecanicamente o tecido para obter uma suspensão neuronal.
Semeie esses neurônios em um sistema de matriz de vários eletrodos revestido com uma matriz extracelular. Adicione meios neurobasais e incube.
Os neurônios se ligam e estendem as projeções, formando uma rede neuronal.
No dia do revestimento dos neurônios, remova um frasco de matriz extracelular
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