Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 4:14 min. • May 29th, 2025
Pegue uma câmara de imagem contendo tecido do plexo mioentérico do cólon de camundongo imobilizado, que abriga plexos ganglionares compostos por redes de neurônios entéricos e células gliais.
Essas células são marcadas com um indicador de cálcio que fluoresce após a ligação do cálcio.
Em seguida, coloque a câmara em um microscópio de fluorescência platina. Perfunda a câmara com um tampão pré-aquecido contendo inibidores para suprimir as contrações musculares durante a imagem.
Usando um microscópio, identifique regiões ganglionares saudáveis que exibem fluorescência uniforme.
Adquira imagens fluorescentes para medir a atividade basal, fornecendo uma referência para os níveis de cálcio intracelular.
Perfundir o tecido com um agonista do receptor para ativar os receptores neuronais, o que desencadeia o influxo intracelular de cálcio e um aumento na intensidade da fluorescência.
A ativação neuronal estimula indiretamente as células gliais circundantes, levando ao influxo de cálcio e a um subsequente aumento da fluorescência.
Capture imagens fluorescentes de lapso de tempo para medir mudanças na intensidade da fluorescência, que indicam a dinâmica do cálcio e a atividade de sinalização nos neu
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