Visualização de padrões de projeção axonal de neurônios motores embrionários em Drosophila

Comece com um tubo contendo embriões de Drosophila em estágio avançado 16 em um meio de montagem.

Os neurônios motores da Drosophila são imunomarcados.

Transfira um embrião para uma lâmina de vidro e remova-o do meio de montagem.

Em seguida, coloque o lado ventral do embrião para cima e disseque-o.

Oriente a seção anterior que contém os neurônios motores com o lado dorsal para cima.

Usando uma agulha de tungstênio, corte ao longo da linha média dorsal e espalhe a parede do corpo. Mova o embrião para o meio de montagem. Em seguida, remova os órgãos internos para expor os

neurônios marcados.

Transfira o embrião para uma nova lâmina, monte-o e sele-o.

Observe sob um microscópio de contraste de interferência diferencial à medida que a luz passa pelo embrião, gerando uma imagem de alta resolução.

Os neurônios marcados com padrões de projeção axonal aparecem marrom escuro em um fundo claro.

Os neurônios motores se ramificam em dois nervos principais: os nervos intersegmentar e segmentar, e um ramo menor, o nervo transverso, que inerva os músculos.

Para filetar os embriões, coloque-os em uma lâmina de vidro

Primeiro, mova-os para uma gota de glicerol com o lado ventral para cima. Em seguida, sob um