Desenvolvendo uma rede neural de engenharia de microtecidos usando uma microcoluna baseada em hidrogel

Comece com um prato contendo uma micro-coluna. A micro-coluna tem um invólucro externo de hidrogel e uma matriz extracelular, ou núcleo ECM.

Adicione gotas de meio de cultura ao mesmo prato.

Transfira os agregados de células neuronais para o prato e coloque-os em uma das gotículas médias.

Observar ao microscópio estereoscópico e inserir agregados celulares em ambas as extremidades da microcoluna.

Em seguida, transfira a micro-coluna semeada para o meio para viabilidade celular.

Incubar para permitir a ligação da célula ao ECM.

Usando o estereomicroscópio, confirme a fixação da célula. Em seguida, adicione meio de cultura para cobrir o prato e incube.

Os neurônios ligados começam a estender seus axônios através da MEC.

Substitua regularmente o meio médio por um meio fresco para manter os níveis de nutrientes.

Com o tempo, os axônios crescem e abrangem todo o comprimento da microcoluna, formando redes neurais.

A rede neural desenvolvida com engenharia de microtecidos está pronta para reconstruir os circuitos neurais danificados.

Prossiga para a semeadura de células imediatamente após a incubação. Transfira aproximadamente 10 a 20 microlitros de meio de cultura para duas áreas livres nas placas