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DOI: 10.3791/3379-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Adulto-nascido neurônios expressando ChR2 pode ser manipulado em preparações fatia eletrofisiológicos, a fim de examinar sua contribuição para a função olfativa de circuitos neurais.
O objetivo deste procedimento é preparar e operar remotamente matrizes de LED para controlar a atividade neural em fatias de cérebro. Isso é feito usando fatias in vitro de animais com neurônios que expressam o canal REDSIN dois e usando uma matriz de LED em conjunto com um microscópio para ativar esses neurônios. Este vídeo aborda como calibrar um LED e um microscópio para fornecer intensidades conhecidas de luz à câmara de corte.
Com essa configuração, os limiares de ativação dos neurônios que expressam o canal dois podem ser medidos com precisão em resposta à estimulação da luz por meio da estimulação de campo amplo dos neurônios que expressam opsina dois do canal. Esta técnica permite o controle óptico temporariamente preciso de uma grande população neuronal. A principal vantagem dessa técnica sobre os métodos optogenéticos existentes, incluindo aqueles que usam lasers ou métodos baseados em obturador, é que ela é muito barata e pode ser facilmente instalada em um escopo de patch clamp existente.
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