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DOI: 10.3791/50786-v
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Biomarcadores de medição em amostras biológicas complexas é cada vez mais guiando tomada de decisão clínica. Nós descrevemos um método altamente sensível para medir simultaneamente miosina cardíaca binding protein-C, MB da creatina quinase e troponina I em amostras de soro de pacientes com infarto do miocárdio e controle de indivíduos saudáveis.
O objetivo geral deste procedimento é quantificar simultaneamente a proteína C de ligação à miosina cardíaca e a troponina I cardíaca em amostras de soro. Isso é feito primeiro revestindo uma placa de 96 poços com anticorpo da proteína C de ligação à miosina cardíaca para um ensaio plex ou usando um ensaio threeplex pré-codificado. Na segunda etapa, as placas revestidas são incubadas com calibradores e amostras de soro.
Em seguida, os anticorpos de detecção marcados são adicionados na etapa final, um sinal de quimioluminescência é produzido e detectado pelo leitor de placas. Em última análise, os níveis das proteínas cardíacas de interesse presentes nas amostras de soro podem ser determinados por imunoensaios únicos ou múltiplos. No dia anterior ao experimento, pipete 30 microlitros de anticorpo anti-proteína de ligação à miosina cardíaca monoclonal de camundongo sem gelatina no canto inferior de cada poço de uma placa padrão nua de descoberta de escala de missô de 96 poços.
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