Human células estaminais pluripotentes Baseado Developmental Toxicity Ensaios para Química Triagem e Safety Systems Biology Data Generation

O objetivo geral deste procedimento é descrever dois sistemas de teste de toxicidade no desenvolvimento in vitro baseados em células-tronco embrionárias humanas e estudos de transcriptoma. Isso é feito primeiro cultivando células-tronco embrionárias humanas em fibroblastos embrionários de camundongos. O segundo passo é permitir que as células-tronco embrionárias humanas formem corpos Embry nos quais possam gerar células de todas as três camadas germinativas ou diferenciá-las em progenitores neuroectodérmicos.

Em seguida, os corpos embrionários ou progenitores neuroectodérmicos são tratados com compostos de interesse em diferentes concentrações durante a diferenciação. As etapas finais são avaliar a viabilidade das células e isolar o RNA. Em última análise, a análise de microarray de transcriptoma é usada para mostrar as mudanças na expressão de RNA de células tratadas com um composto de interesse em comparação com células de controle não tratadas Com base em células-tronco neônicas humanas e macroáreas de DNA, estabelecemos uma metodologia in vitro que permite o monitoramento dos efeitos de toxicidade no desenvolvimento humano relevantes.