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DOI: 10.3791/54296-v
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Este estudo compara dois métodos diferentes de isolamento de monócitos humanos para obtenção de células dendríticas (DCs) in vitro. Os monócitos são selecionados por aderência ou enriquecidos negativamente por separação magnética. O rendimento e a viabilidade de monócitos, juntamente com a viabilidade, proliferação e expressão de marcadores de superfície CD11c/CD14 do MDDC, serão comparados entre os dois métodos.
O objetivo geral deste estudo é comparar dois métodos diferentes de isolamento de monócitos humanos para geração de células dendríticas in vitro e caracterizar a expressão da superfície celular CT11c, CT14 das populações derivadas de monócitos resultantes por citometria de fluxo por imagem. Esses protocolos de isolamento de monócitos podem contribuir para o desenvolvimento de métodos confiáveis para a purificação de células dendríticas humanas para pesquisa e aplicações clínicas. A principal vantagem desses protocolos é que eles facilitam o isolamento de monócitos humanos e sua diferenciação em células derivadas de monócitos viáveis e funcionais.
Além disso, este é o primeiro estudo a caracterizar a população específica de células dendríticas derivadas de monócitos por citometria de fluxo de imagem de célula única. Este método também pode ser aplicado como uma alternativa para o isolamento de outras células raras com um rendimento adequado para aplicações de pesquisa a jusante. A demonstração visual desses métodos é fundamental, pois pode ser um desafio manusear as amostras de sangue com segurança sem as instruções e experiência adequadas.
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