Estudo simultâneo do recrutamento de monócitos subpopulações sob fluxo In Vitro

Pois este método pode ajudar a responder a perguntas-chave no campo da inflamação e imunologia. Por exemplo, quais são os mecanismos moleculares de adesão leucócito e migração trans-endotelial. A principal vantagem dessa técnica é que ela permite a discriminação de uso ilimitado entre transmigração e forte adição de monócitos à monocamadas endotelial.

Embora este método forneça informações sobre o recrutamento de monócitos no fluxo, ele também pode ser adaptado a outras células dos sistemas hematopoiéticos, como células T, células B ou derivados da subpopulação. Após a lavagem, rotule as células endoteliais da veia umbilical humana ou HUVEC com 30 microliters de 37 graus Celsius M199 médio suplementado com um CMFDA micromolar por 10 minutos a 37 graus Celsius e 5% dióxido de carbono. Ao final da incubação, lave as células com 150 microliters de meio M199 completo e incuba a cultura em 150 microliters de meio M199 completo fresco por mais 30 minutos.