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Um método não-invasivo e tecnicamente não-intensivo para indução e fenotipagem of Experimental pn...
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Immunology and Infection
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JoVE Journal Immunology and Infection
A Non-invasive and Technically Non-intensive Method for Induction and Phenotyping of Experimental Bacterial Pneumonia in Mice

Um método não-invasivo e tecnicamente não-intensivo para indução e fenotipagem of Experimental pneumonia bacteriana em ratos

Full Text
9,656 Views
07:43 min
September 28, 2016

DOI: 10.3791/54508-v

Jennifer H. Madenspacher1, Michael B. Fessler1

1Immunity, Inflammation and Disease Laboratory, National Institute of Environmental Health Sciences (NIEHS),National Institutes of Health

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article presents a non-invasive and rapid method for inducing bacterial pneumonia in mice through aspiration of a bacterial inoculum. It details downstream methods for assessing the pulmonary innate immune response, making it accessible for laboratories with limited expertise.

Key Study Components

Area of Science

  • Infectious Disease
  • Immunology
  • Pulmonary Research

Background

  • Bacterial pneumonia is a significant health concern.
  • Existing methods for modeling pneumonia can be complex and invasive.
  • A simpler method can facilitate research in host defense mechanisms.
  • This study aims to improve accessibility for various research laboratories.

Purpose of Study

  • To provide a straightforward method for inducing pneumonia in mice.
  • To quantify the in vivo host defense response in the lungs.
  • To enhance understanding of the immune response to bacterial infections.

Methods Used

  • Thawing a glycerol stock of K. pneumoniae.
  • Transferring bacteria into Tryptic Soy Broth for culture.
  • Incubating the culture overnight at 37 degrees Celsius.
  • Inducing pneumonia via aspiration into the oropharynx.

Main Results

  • The method is non-invasive and technically simple.
  • Allows for effective study of the pulmonary innate immune response.
  • Facilitates research in laboratories with limited pulmonary expertise.
  • Provides a foundation for further studies on host-pathogen interactions.

Conclusions

  • This method represents a significant advancement in pneumonia modeling.
  • It opens new avenues for research in infectious disease and immunology.
  • Future studies can build upon this approach to explore immune responses.

Frequently Asked Questions

What is the main advantage of this pneumonia model?
The main advantage is its technical simplicity, making it accessible for various laboratories.
How is the bacterial inoculum prepared?
A glycerol stock of K. pneumoniae is thawed and cultured in Tryptic Soy Broth.
What temperature is used for incubating the bacterial culture?
The culture is incubated overnight at 37 degrees Celsius.
Can this method be used in any laboratory setting?
It is recommended to be conducted in a biosafety level two facility.
What type of immune response can be assessed using this method?
The pulmonary innate immune response can be quantified.
Is this method suitable for researchers with limited experience?
Yes, it is designed to be non-invasive and technically non-intensive.

Vários métodos foram descritos na literatura para a modelagem de pneumonia bacteriana em murganhos. Aqui, nós descrevemos um método de baixo custo, rápida não-invasiva para induzir pneumonia por aspiração (isto é, por inalação) de um inoculo bacteriano pipetados para a orofaringe. métodos a jusante para avaliação da resposta imune inata pulmonar também são detalhados.

O objetivo geral deste protocolo experimental é fornecer um procedimento não invasivo e tecnicamente não intensivo para induzir pneumonia bacteriana em camundongos e a subsequente quantificação da resposta de defesa do hospedeiro in vivo nos pulmões. Este método pode ajudar a responder a questões-chave nos campos de doenças infecciosas e imunologia, sobre os genes e vias moleculares que controlam a resposta do hospedeiro à infecção. A principal vantagem desse método de infecção pulmonar é sua simplicidade técnica.

O que permite que mesmo laboratórios com pouca experiência em procedimentos pulmonares estudem a resposta imune inata pulmonar. Em uma instalação de nível dois de biossegurança, descongele um estoque de glicerol de K. pneumoniae e transfira um mililitro da bactéria para um frasco de cultura de 500 mililitros contendo 50 mililitros de caldo de soja tríptico. Incubar a cultura de suspensão durante a noite a 37 graus Celsius e 200 a 225 RPM.

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