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DOI: 10.3791/54508-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article presents a non-invasive and rapid method for inducing bacterial pneumonia in mice through aspiration of a bacterial inoculum. It details downstream methods for assessing the pulmonary innate immune response, making it accessible for laboratories with limited expertise.
Vários métodos foram descritos na literatura para a modelagem de pneumonia bacteriana em murganhos. Aqui, nós descrevemos um método de baixo custo, rápida não-invasiva para induzir pneumonia por aspiração (isto é, por inalação) de um inoculo bacteriano pipetados para a orofaringe. métodos a jusante para avaliação da resposta imune inata pulmonar também são detalhados.
O objetivo geral deste protocolo experimental é fornecer um procedimento não invasivo e tecnicamente não intensivo para induzir pneumonia bacteriana em camundongos e a subsequente quantificação da resposta de defesa do hospedeiro in vivo nos pulmões. Este método pode ajudar a responder a questões-chave nos campos de doenças infecciosas e imunologia, sobre os genes e vias moleculares que controlam a resposta do hospedeiro à infecção. A principal vantagem desse método de infecção pulmonar é sua simplicidade técnica.
O que permite que mesmo laboratórios com pouca experiência em procedimentos pulmonares estudem a resposta imune inata pulmonar. Em uma instalação de nível dois de biossegurança, descongele um estoque de glicerol de K. pneumoniae e transfira um mililitro da bactéria para um frasco de cultura de 500 mililitros contendo 50 mililitros de caldo de soja tríptico. Incubar a cultura de suspensão durante a noite a 37 graus Celsius e 200 a 225 RPM.
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