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Diferenciação de células estaminais embrionárias de rato em Cortical interneurônio precursores
Diferenciação de células estaminais embrionárias de rato em Cortical interneurônio precursores
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JoVE Journal Neuroscience
Differentiation of Mouse Embryonic Stem Cells into Cortical Interneuron Precursors

Diferenciação de células estaminais embrionárias de rato em Cortical interneurônio precursores

Full Text
10,979 Views
10:24 min
December 3, 2017

DOI: 10.3791/56358-v

David J. Tischfield1,2, Stewart A. Anderson1

1Neuroscience Graduate Group, Perelman School of Medicine,University of Pennsylvania, 2Department of Psychiatry, Children's Hospital of Philadelphia,University of Pennsylvania School of Medicine

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Este protocolo descreve um método para gerar progenitores interneurônio cortical e pós mitóticas interneurônio precursores de células-tronco embrionárias rato usando um método modificado de corpo-a-monocamada do embryoid. Estes precursores/progenitores pode ser usado em vitro fluorescente classificada e transplantado para o neocórtex neonatal para estudar a determinação do destino ou usado em aplicações terapêuticas.

O objetivo geral deste procedimento é gerar progenitores de interneurônios corticais em precursores de interneurônios pós-mitóticos para células-tronco embrionárias de camundongos usando um corpo embrióide modificado para o método de monocamada. Esse método pode ajudar a responder a questões-chave no campo da neurociência, como como os subtipos de interneurônios corticais alcançam seus destinos individuais durante o desenvolvimento. A principal vantagem dessa técnica é que ela permite a geração eficiente de progenitores interneurônios que expressam Nkx2.1, bem como métodos para enriquecer os subgrupos de interneurônios de parvalbumina ou somatostatina.

Para iniciar este procedimento, coloque células alimentadoras de MEF mitoticamente inativas em meio MEF em placas tratadas com cultura de tecidos. Aguarde pelo menos 12 horas para que eles se acomodem em uma incubadora de cultura de células a 37 graus Celsius antes de plaquear os mESCs. Se não for usado imediatamente, substitua a mídia MEF a cada três dias.

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