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DOI: 10.3791/58118-v
Raquel Toribio-Fernandez1, Virginia Zorita1, Beatriz Herrero-Fernandez2, Jose M. Gonzalez-Granado1,2,3
1LamImSys Lab,Centro Nacional de Investigaciones Cardiovasculares Carlos III (CNIC), 2LamImSys Lab,Instituto de Investigación Sanitaria Hospital 12 de Octubre (imas12), 3CIBER de Enfermedades Cardiovasculares
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article presents a protocol for in vivo determination of na茂ve CD4 T cell activation, proliferation, and Th1 differentiation induced by GM-CSF bone marrow-derived dendritic cells. The protocol includes steps for bone marrow and T-cell isolation, dendritic cell generation, and adoptive transfer of both dendritic and T-cells.
Aqui, apresentamos um protocolo para a determinação na vivo da ativação de células (células T) de T CD4 naïve, proliferação e diferenciação de células Th1 induzida pela medula óssea de GM-CSF (BM)-derivado de células dendríticas (DCs). Além disso, este protocolo descreve isolamento BM e células T, geração de DC e DC e células T transferência adotiva.
Este método pode ajudar a responder a questões-chave no campo da imunologia sobre ativação de células T, proliferação e diferenciação Th1, bem como estimulação celular de antígeno apresentando imunidade adaptativa. A principal vantagem desta técnica é que ela permite o estudo de um ambiente in vivo e, ao mesmo tempo, permite a manipulação celular in vitro. A demonstração visual desse método é crítica, pois as etapas de isolamento de órgãos e ossos e transferência adotiva são difíceis de dominar apenas por meio de instruções de texto.
Para isolamento de células da medula óssea, desinfete os membros posteriores de um camundongo adulto com etanol a 70% e use uma tesoura para fazer uma incisão lateral na pele nos membros posteriores. Insira a tesoura na face medial das pernas e corte a pele com a tesoura até o início dos membros posteriores. Em seguida, use uma pinça para separar a pele das pernas.
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