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DOI: 10.3791/64493-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article presents an optimized protocol for isolating hepatocytes in mice following partial hepatectomy. The method effectively retains lipid-laden hepatocytes, which are typically lost during density-gradient centrifugation, allowing for the study of regenerating hepatocyte populations.
Hepatócitos carregados de lipídios são inerentes à regeneração hepática, mas geralmente são perdidos após a centrifugação do gradiente de densidade. Aqui, apresentamos um protocolo de isolamento celular otimizado que retém hepatócitos esteatóticos, produzindo populações representativas de hepatócitos regeneradores após hepatectomia parcial em camundongos.
O objetivo geral deste protocolo é apresentar um método otimizado para o isolamento de hepatócitos em camundongos após hepatectomia parcial sem a necessidade de centrifugação por gradiente de densidade. Geralmente vemos uma grande porcentagem de hepatócitos carregados de lipídios durante a regeneração precoce. Os hepatócitos esteatóticos geralmente perdidos após a centrifugação do gradiente de densidade devido à baixa densidade são mantidos com este protocolo.
Para preparar o equipamento de perfusão, conecte uma cânula IUI de calibre 26 à extremidade de saída da tubulação usando um conector de bloqueio Luer. Em seguida, lave a tubulação e insira a extremidade de entrada do tubo no tubo tampão de perfusão pré-aquecido no banho de água. Prime-o com tampão de perfusão quente a uma velocidade de bomba de três mililitros por minuto.
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