Name: Um método QuEChERS-HPLC modificado para detecção de hidrocarbonetos aromáticos policíclicos em embriões de peixe-zebra expostos a partículas finas (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-13T12:40:00.000+00:00
Duration: 4 min 39 s
Description: Aprenda um método QuEChERS-HPLC modificado para quantificar hidrocarbonetos aromáticos policíclicos em embriões de Danio rerio expostos a partículas finas. Esta técnica melhora a sensibilidade e reduz o tempo de processamento.

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<ol><li>Wang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+of+maternal+exposure+to+ambient+particulate+pollution+with+incident+spontaneous+pregnancy+loss%5BTitle%5D)+AND+%22Ecotoxicol+Environ+Saf%22%5BJournal%5D)">Association of maternal exposure to ambient particulate pollution with incident spontaneous pregnancy loss.</a> Ecotoxicol Environ Saf. 224, 112653(2021).</li>
<li>Grippo, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Air+pollution+exposure+during+pregnancy+and+spontaneous+abortion+and+stillbirth%5BTitle%5D)+AND+%22Rev+Environ+Health%22%5BJournal%5D)">Air pollution exposure during pregnancy and spontaneous abortion and stillbirth.</a> Rev Environ Health. 33 (3), 247-264 (2018).</li>
<li>Tanner, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Associations+between+exposure+to+ambient+benzene+and+pm2.+5+during+pregnancy+and+the+risk+of+selected+birth+defects+in+offspring%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Res%22%5BJournal%5D)">Associations between exposure to ambient benzene and pm2. 5 during pregnancy and the risk of selected birth defects in offspring.</a> Environ Res. 142, 345-353 (2015).</li>
<li>Feng, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+air+pollution+exposure+and+congenital+anomalies%3A+An+updated+systematic+review+and+meta-analysis+of+epidemiological+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Environ+Health+Res%22%5BJournal%5D)">Global air pollution exposure and congenital anomalies: An updated systematic review and meta-analysis of epidemiological studies.</a> Int J Environ Health Res. 34 (5), 2333-2352 (2024).</li>
<li>Lin, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sources%2C+transformation%2C+and+health+implications+of+pahs+and+their+nitrated%2C+hydroxylated%2C+and+oxygenated+derivatives+in+PM2.5+in+Beijing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Geophys+Res-Atmos%22%5BJournal%5D)">Sources, transformation, and health implications of pahs and their nitrated, hydroxylated, and oxygenated derivatives in PM2.5 in Beijing.</a> J Geophys Res-Atmos. 120 (14), 7219-7228 (2015).</li>
<li>Chen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determining+priority+sources+of+PM2.5-bound+polycyclic+aromatic+hydrocarbons+by+their+contribution+to+disability+adjusted+life+years%5BTitle%5D)+AND+%22Atmos+Environ%22%5BJournal%5D)">Determining priority sources of PM2.5-bound polycyclic aromatic hydrocarbons by their contribution to disability adjusted life years.</a> Atmos Environ. 248, 118202(2021).</li>
<li>Carls, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fish+embryos+are+damaged+by+dissolved+pahs%2C+not+oil+particles%5BTitle%5D)+AND+%22Aquat+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Fish embryos are damaged by dissolved pahs, not oil particles.</a> Aquat Toxicol. 88 (2), 121-127 (2008).</li>
<li>He, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+toxicity+of+the+organic+fraction+from+hydraulic+fracturing+flowback+and+produced+waters+to+early+life+stages+of+zebrafish+%28Danio+rerio%29%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">Developmental toxicity of the organic fraction from hydraulic fracturing flowback and produced waters to early life stages of zebrafish (Danio rerio).</a> Environ Sci Technol. 52 (6), 3820-3830 (2018).</li>
<li>Ren, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AHR-mediated+ROS+production+contributes+to+the+cardiac+developmental+toxicity+of+PM2.5+in+zebrafish+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Total+Environ%22%5BJournal%5D)">AHR-mediated ROS production contributes to the cardiac developmental toxicity of PM2.5 in zebrafish embryos.</a> Sci Total Environ. 719, 135097(2020).</li>
<li>Manjunatha, B., Deekshitha, B., Seo, E., Kim, J., Lee, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+toxicity+induced+by+particulate+matter+%28PM2.5%29+in+zebrafish+%28Danio+rerio%29+model%5BTitle%5D)+AND+%22Aquat+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Developmental toxicity induced by particulate matter (PM2.5) in zebrafish (Danio rerio) model.</a> Aquat Toxicol. 238, 105928(2021).</li>
<li>Chen, J., Zhang, M., Aniagu, S., Jiang, Y., Chen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PM2.5+induces+cardiac+defects+via+AHR-SIRT1-PGC-1%CE%B1+mediated+mitochondrial+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Toxicol+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">PM2.5 induces cardiac defects via AHR-SIRT1-PGC-1α mediated mitochondrial damage.</a> Environ Toxicol Pharmacol. 106, 104393(2024).</li>
<li>Zhang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Crosstalk+between+AHR+and+Wnt%2F%CE%B2-catenin+signal+pathways+in+the+cardiac+developmental+toxicity+of+PM2.5+in+zebrafish+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicology%22%5BJournal%5D)">Crosstalk between AHR and Wnt/β-catenin signal pathways in the cardiac developmental toxicity of PM2.5 in zebrafish embryos.</a> Toxicology. 355, 31-38 (2016).</li>
<li>González-Curbelo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+and+applications+of+the+QuECHERS+method%5BTitle%5D)+AND+%22TrAC+Trends+Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Evolution and applications of the QuECHERS method.</a> TrAC Trends Anal Chem. 71, 169-185 (2015).</li>
<li>Wilkowska, A., Biziuk, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+pesticide+residues+in+food+matrices+using+the+qQuECHERS+methodology%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Chem%22%5BJournal%5D)">Determination of pesticide residues in food matrices using the qQuECHERS methodology.</a> Food Chem. 125 (3), 803-812 (2011).</li>
<li>Zhao, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+toxicity+and+bioconcentration+of+pyrimorph+in+zebrafish%2C+Brachydanio+rerio%5BTitle%5D)+AND+%22Pest+Manag+Sci%22%5BJournal%5D)">Acute toxicity and bioconcentration of pyrimorph in zebrafish, Brachydanio rerio.</a> Pest Manag Sci. 67 (9), 1178-1183 (2011).</li>
<li>Aleström, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish%3A+Housing+and+husbandry+recommendations%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">Zebrafish: Housing and husbandry recommendations.</a> Lab Anim. 54 (3), 213-224 (2019).</li>
<li>Matthews, M., Varga, Z. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anesthesia+and+euthanasia+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+J%22%5BJournal%5D)">Anesthesia and euthanasia in zebrafish.</a> ILAR J. 53 (2), 192-204 (2012).</li>
<li>Ji, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AHR-mediated+m6A+RNA+methylation+contributes+to+PM2.5-induced+cardiac+malformations+in+zebrafish+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hazard+Mater%22%5BJournal%5D)">AHR-mediated m6A RNA methylation contributes to PM2.5-induced cardiac malformations in zebrafish larvae.</a> J Hazard Mater. 457, 131749(2023).</li>
<li>Alegbeleye, O. O., Opeolu, B. O., Jackson, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polycyclic+aromatic+hydrocarbons%3A+A+critical+review+of+environmental+occurrence+and+bioremediation%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Manage%22%5BJournal%5D)">Polycyclic aromatic hydrocarbons: A critical review of environmental occurrence and bioremediation.</a> Environ Manage. 60 (4), 758-783 (2017).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>16 soluções padrão mistas de PAHs&nbsp;</td><td>o2si Smart Solutions (Carolina do Sul, EUA)</td><td>110124-06</td><td>16 PAHs soluções padrão mistas&nbsp; inclui naftaleno (Nap), acenaftileno (Acy), ace-nafteno (Ace), flúor (Flo), fenantreno (Phe), antraceno (Ant), fluoranteno (Flu), pireno (Pyr), benzo [a] antraceno (BaA), criseno (Chr), benzo [b] fluoranteno (BbF), benzo [k] fluoranteno (BkF),benzo [a] pireno (BaP), indeno [1,2,3-cd] pireno (IcdP), dibenz [a, h]antraceno (DahA), benzo [g,h,i] perileno (BghiP).</td></tr><tr><td>1260 Infinity II LC System</td><td>Agilent Technologies (Santa Clara, EUA)</td><td></td><td>FLD(G1321A); DAD SL (G1315C)</td></tr><tr><td>Acetonitrila</td><td>Scharlab (Barcelona,Espanha)</td><td>AC03661000</td><td>solvente</td></tr><tr><td>CNWBOND HC-C18 SPE&nbsp;</td><td>ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc. (Xangai, CHINA)</td> <td>SBEQ-CA0801</td><td>A embalagem C18 é uma embalagem de fase reversa com um bom equilíbrio entre hidrofílico e hidrofóbico, que pode adsorver e separar bem os compostos orgânicos polares e não polares.</td></tr><tr><td>Terra de diatomáceas</td><td>Agilent Technologies, Inc (Santa Clara, EUA)</td><td>12214013</td><td>Para separação, purificação e remoção de impurezas orgânicas&zwnj;</td></tr><tr><td>SPE Dispersivo 15 mL, EN</td><td>Agilent Technologies, Inc (Santa Clara, EUA)</td><td>5982-5056</td><td>Filtro de purificação de amostras</td></tr><tr><td></td><td>ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc.(Shanghai, CHINA)</td><td>SCAA-104</td><td>Filtro de agulha de fase orgânica (nylon),0.22&micro; m</td></tr><tr><td>Hexano</td><td>Scharlab (Barcelona, Espanha</td><td>)HE02481000</td><td></td></tr><tr><td>solvente Millipore</td><td>Merck (New Jersey, EUA)</td><td></td><td>Preparar água ultrapura</td></tr><tr><td>Organomation - N-EVAP Nitrogen Evaporators</td><td>Organomation (Massachusetts,EUA)</td><td></td><td>Evaporar solventes</td></tr><tr><td>Sorvall ST4 Plus</td><td>Thermo Fisher Scientific (Waltham, EUA)</td><td></td><td>centrifugação</td></tr><tr><td>&nbsp; Vortex- Genie 2 (G560E)</td><td>Scientific Industries (Nova York, EUA)</td><td></td><td>Vortex</td></tr><tr><td>ZORBAX Eclipse PAH</td><td>Agilent Technologies, Inc (Santa Clara, EUA)</td><td>959990-918</td><td>Esta coluna é comumente usada em sistemas HPLC para obter análises precisas e confiáveis de PAHs.</td></tr></tbody></table>

um método quechers-hplc modificado para detecção de hidrocarbonetos aromáticos policíclicos em embriões de peixe-zebra expostos a partículas finas

A Modified QuEChERS-HPLC Method for Detection of Polycyclic Aromatic Hydrocarbons in Zebrafish Embryos Exposed to Fine Particulate Matter

Todo o procedimento para exposição EOM, preparação de amostras e detecção de PAH é ilustrado na Figura 1. Para HPLC-FLU/DAD, uma relação sinal-ruído de 3:1, com faixa de detecção de 0,3 a 5,0 ng/mL, foi considerada aceitável. Os limites de detecção do método variaram de 3,0 × 10-4 a 5,0 × 10-3 ng/organismo. Todas as curvas de calibração exibiram alta linearidade (r2 &gt; 0,999). Os valores de precisão determinados usando extratos obtidos de amostras de matriz...

Um método QuEChERS-HPLC modificado para detecção de hidrocarbonetos aromáticos policíclicos em embriões de peixe-zebra expostos a partículas finas

Maternal exposure to fine particulate matter (PM2.5), with an aerodynamic diameter of 2.5 &#181;m or less, has been linked to spontaneous abortion and ...

a-modified-quechers-hplc-method-for-detection-polycyclic-aromatic

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Biologia do Desenvolvimento

Este vídeo demonstra o uso da cromatografia gasosa headspace para determinar as concentrações de etanol em embriões de peixe-zebra. Este método fornece uma ferramenta útil para análise qualitativa e quantitativa de compostos orgânicos voláteis.

Cromatografia gasosa Headspace: uma técnica para avaliar a concentração de etanol em embriões de peixe-zebra

Este vídeo demonstra um ensaio baseado em imunofluorescência altamente sensível para detectar danos oxidativos induzidos por PM2.5 no coração de embriões de peixe-zebra, medindo os níveis de 8-OHdG e γH2AX, que indicam danos ao DNA e quebras de DNA de fita dupla, respectivamente.

Ensaio de imunofluorescência para detectar danos ao DNA mediados por PM2.5 em embriões de peixes

Descrito aqui é um protocolo para a imagem semi-automatizada de fluorescência de tecido específico em embriões de peixe-zebra.

Imagem semi-automatizada de Fluorescência de tecidos específicos em embriões Zebrafish

A exposição a teratógenos podem causar defeitos de nascimento. Os peixes-zebra são úteis para a determinação do potencial teratogénico de produtos químicos. Nós demonstrar a utilidade de peixe-zebra, expondo embriões para vários teores de nitritos e também em diferentes tempos de exposição. Mostramos que os nitritos podem ser tóxicos e causar graves defeitos do desenvolvimento.

Peixe-zebra como um modelo para avaliar o potencial teratogênico de nitrito

Embriões de zebrafish são utilizados para avaliar a toxicidade de compostos químicos. Desenvolvem-se externamente e são sensíveis aos produtos químicos, permitindo a deteção de mudanças fenotípicas sutis. O experimento requer apenas uma pequena quantidade de composto, que é diretamente adicionado à placa contendo embriões, tornando o sistema de teste eficiente e rentável.

Avaliação rápida da toxicidade de compostos químicos usando embriões de zebrafish

Um protocolo experimental detalhado é apresentado neste artigo para avaliação da toxicidade neurocomportamental de poluentes ambientais utilizando um modelo de larvas de zebrafish, incluindo o processo de exposição e testes para indicadores neurocomportamentais.

Estudando efeitos neurocomportamentais de poluentes ambientais em larvas de zebrafish

Este protocolo usa um ensaio de imunofluorescência para detectar danos de DNA induzidos por PM2.5nos corações dissecados de embriões de zebrafish.

Usando imunofluorescência para detectar danos de DNA induzidos por PM2.5em corações embrionários de zebrafish

Os embriões/larvas de zebrafish desenvolvem-se externamente e são opticamente transparentes. A bioacúscula de microplásticos em peixes em estágios iniciais da vida é prontamente avaliada com microesferas fluorescentes rotuladas.

Acumulação e Distribuição de Microplásticos Fluorescentes nos Estágios Iniciais da Vida dos Zebrafish

O aumento da taxa de análises farmaco-e toxicoléticas de metais e compostos à base de metal em zebrafish pode ser vantajoso para estudos de tradução ambiental e clínica. A limitação da absorção de exposição transmitida pela água desconhecida foi superada pela realização de análises metálicas de traços no tecido de zebrafish digerido usando espectrometria de massa plasmática indutivamente acoplada.

Absorção de dose de exposição composta à base de platina e rutênio em zebrafish por espectrometria de massa de plasma indutivamente acoplado com aplicações mais amplas

Este trabalho descreve um protocolo para o monitoramento espaço-temporal rápido e eficiente da metilação normal e aberrante da citosina em embriões intactos de peixe-zebra.

Monitoramento espaço-temporal rápido e eficiente da metilação normal e aberrante da citosina em embriões intactos de peixe-zebra

Este protocolo descreve um procedimento de triagem de drogas em larvas de peixe-zebra 3-7 dias após a fertilização, seguido de avaliação morfológica.

Triagem de pequenas moléculas e testes de toxicidade em larvas de peixe-zebra em estágio inicial

Aprenda um método QuEChERS-HPLC modificado para quantificar hidrocarbonetos aromáticos policíclicos em embriões de Danio rerio expostos a partículas finas. Esta técnica melhora a sensibilidade e reduz o tempo de processamento.

Um método QuEChERS-HPLC modificado para detecção de hidrocarbonetos aromáticos policíclicos em embriões de peixe-zebra expostos a partículas finas (Vídeo) | JoVE Journal

Um método QuEChERS-HPLC modificado para detecção de hidrocarbonetos aromáticos policíclicos em embriões de peixe-zebra expostos a partículas finas

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