Name: Um Protocolo de Microscopia de Localização de Molécula Única Multirótulo para Investigação da Cromatina em Ambiente Nuclear Denso (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-05T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 49 s
Description: Aprenda microscopia de localização de molécula única multirótulo para investigar a organização da cromatina em ambientes nucleares densos usando células BJ, HeLa e MCF 10A. Este método integra análise computacional para quantificar distâncias inter-alvo e co-afinidade espacial.

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<ol><li>Bond, C., Hugelier, S., Xing, J., Sorokina, E. M., Lakadamyali, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiplexed+DNA-PAINT+imaging+of+the+heterogeneity+of+late+endosome%2Flysosome+protein+composition%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%3A+The+Preprint+Server+for+Biology%22%5BJournal%5D)">Multiplexed DNA-PAINT imaging of the heterogeneity of late endosome/lysosome protein composition.</a> bioRxiv: The Preprint Server for Biology. , (2024).</li>
<li>Hugelier, S., Colosi, P. L., Lakadamyali, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+single-molecule+localization+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Annu.+Rev.+Biophys%22%5BJournal%5D)">Quantitative single-molecule localization microscopy.</a> Annu. Rev. Biophys. 52 (1), 139-160 (2023).</li>
<li>Lelek, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-molecule+localization+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Methods+Primers%22%5BJournal%5D)">Single-molecule localization microscopy.</a> Nat. Rev. Methods Primers. 1, 39(2021).</li>
<li>Oddone, A., Vilanova, I. V., Tam, J., Lakadamyali, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Super-resolution+imaging+with+stochastic+single-molecule+localization%3A+concepts%2C+technical+developments%2C+and+biological+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Microsc+Res+Tech%22%5BJournal%5D)">Super-resolution imaging with stochastic single-molecule localization: concepts, technical developments, and biological applications.</a> Microsc Res Tech. 77 (7), 502-509 (2014).</li>
<li>Bates, M., Huang, B., Dempsey, G. T., Zhuang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multicolor+super-resolution+imaging+with+photo-switchable+fluorescent+probes%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Multicolor super-resolution imaging with photo-switchable fluorescent probes.</a> Science. 317 (5845), 1749-1753 (2007).</li>
<li>Ricci, M. A., Cosma, M. P., Lakadamyali, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Super+resolution+imaging+of+chromatin+in+pluripotency%2C+differentiation%2C+and+reprogramming%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Genet+Dev%22%5BJournal%5D)">Super resolution imaging of chromatin in pluripotency, differentiation, and reprogramming.</a> Curr Opin Genet Dev. 46, 186-193 (2017).</li>
<li>Heo, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aberrant+chromatin+reorganization+in+cells+from+diseased+fibrous+connective+tissue+in+response+to+altered+chemomechanical+cues%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">Aberrant chromatin reorganization in cells from diseased fibrous connective tissue in response to altered chemomechanical cues.</a> Nat Biomed Eng. 7 (2), 177-191 (2023).</li>
<li>Wang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comprehensive+molecular+characterization+of+the+hippo+signaling+pathway+in+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Comprehensive molecular characterization of the hippo signaling pathway in cancer.</a> Cell Rep. 25 (5), 1304-1317.e5 (2018).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multicolor+super-resolution+imaging+using+spectroscopic+single-molecule+localization+microscopy+with+optimal+spectral+dispersion%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Opt%22%5BJournal%5D)">Multicolor super-resolution imaging using spectroscopic single-molecule localization microscopy with optimal spectral dispersion.</a> Appl Opt. 58 (9), 2248-2255 (2019).</li>
<li>Daugird, T. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Correlative+single+molecule+lattice+light+sheet+imaging+reveals+the+dynamic+relationship+between+nucleosomes+and+the+local+chromatin+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Comm%22%5BJournal%5D)">Correlative single molecule lattice light sheet imaging reveals the dynamic relationship between nucleosomes and the local chromatin environment.</a> Nat Comm. 15 (1), 4178(2024).</li>
<li>Kant, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Active+transcription+and+epigenetic+reactions+synergistically+regulate+meso-scale+genomic+organization%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Comm%22%5BJournal%5D)">Active transcription and epigenetic reactions synergistically regulate meso-scale genomic organization.</a> Nat Comm. 15 (1), 4338(2024).</li>
<li>Esa, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+spectral+precision+distance+microscopy+of+chromatin+nanostructures+after+triple-colour+DNA+labelling%3A+a+study+of+the+BCR+region+on+chromosome+22+and+the+Philadelphia+chromosome%5BTitle%5D)+AND+%22J+Microsc%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional spectral precision distance microscopy of chromatin nanostructures after triple-colour DNA labelling: a study of the BCR region on chromosome 22 and the Philadelphia chromosome.</a> J Microsc. 199 (2), 96-105 (2000).</li>
<li>Lelek, M., Di Nunzio, F., Henriques, R., Charneau, P., Arhel, N., Zimmer, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Superresolution+imaging+of+HIV+in+infected+cells+with+FlAsH-PALM%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci%22%5BJournal%5D)">Superresolution imaging of HIV in infected cells with FlAsH-PALM.</a> Proc Natl Acad Sci. 109 (22), 8564-8569 (2012).</li>
<li>Yushchenko, D. A., Bruchez, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tailoring+fluorescent+labels+for+far-field+nanoscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Far-Field+Optical+Nanoscopy%22%5BJournal%5D)">Tailoring fluorescent labels for far-field nanoscopy.</a> Far-Field Optical Nanoscopy. , 159-188 (2015).</li>
<li>Min, W., Freudiger, C. W., Lu, S., Xie, X. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coherent+nonlinear+optical+imaging%3A+beyond+fluorescence+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+rev+phys+chem%22%5BJournal%5D)">Coherent nonlinear optical imaging: beyond fluorescence microscopy.</a> Annu rev phys chem. 62, 507-530 (2011).</li>
<li>Walker, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+immunohistochemistry--issues+concerning+methods%2C+utility+and+semiquantitative+assessment+I%5BTitle%5D)+AND+%22Histopath%22%5BJournal%5D)">Quantification of immunohistochemistry--issues concerning methods, utility and semiquantitative assessment I.</a> Histopath. 49 (4), 406-410 (2006).</li>
<li>Dunn, K. W., Kamocka, M. M., McDonald, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+practical+guide+to+evaluating+colocalization+in+biological+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Cell+Physiol%22%5BJournal%5D)">A practical guide to evaluating colocalization in biological microscopy.</a> Am J Physiol Cell Physiol. 300 (4), C723-C742 (2011).</li>
<li>Castells-Garcia, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Super+resolution+microscopy+reveals+how+elongating+RNA+polymerase+II+and+nascent+RNA+interact+with+nucleosome+clutches%5BTitle%5D)+AND+%22Nucl+Acids+Res%22%5BJournal%5D)">Super resolution microscopy reveals how elongating RNA polymerase II and nascent RNA interact with nucleosome clutches.</a> Nucl Acids Res. 50 (1), 175-190 (2022).</li>
<li>Finn, E. H., Misteli, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+high-throughput+DNA+FISH+protocol+to+visualize+genome+regions+in+human+cells%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+protocols%22%5BJournal%5D)">A high-throughput DNA FISH protocol to visualize genome regions in human cells.</a> STAR protocols. 2 (3), 100741(2021).</li>
<li>Nuebler, J., Fudenberg, G., Imakaev, M., Abdennur, N., Mirny, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chromatin+organization+by+an+interplay+of+loop+extrusion+and+compartmental+segregation%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci%22%5BJournal%5D)">Chromatin organization by an interplay of loop extrusion and compartmental segregation.</a> Proc Natl Acad Sci. 115 (29), E6697-E6706 (2018).</li>
<li>Davidson, I. F., Peters, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome+folding+through+loop+extrusion+by+SMC+complexes%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Mol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Genome folding through loop extrusion by SMC complexes.</a> Nat Rev Mol Cell Biol. 22 (7), 445-464 (2021).</li>
<li>Schueder, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unraveling+cellular+complexity+with+transient+adapters+in+highly+multiplexed+super-resolution+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Unraveling cellular complexity with transient adapters in highly multiplexed super-resolution imaging.</a> Cell. 187 (7), 1769-1784.e18 (2024).</li>
<li>Miron, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chromatin+arranges+in+chains+of+mesoscale+domains+with+nanoscale+functional+topography+independent+of+cohesin%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Adv%22%5BJournal%5D)">Chromatin arranges in chains of mesoscale domains with nanoscale functional topography independent of cohesin.</a> Sci Adv. 6 (39), eaba8811(2020).</li>
<li>Ou, H. D., Phan, S., Deerinck, T. J., Thor, A., Ellisman, M. H., O'Shea, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ChromEMT%3A+Visualizing+3D+chromatin+structure+and+compaction+n+interphase+and+mitotic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">ChromEMT: Visualizing 3D chromatin structure and compaction n interphase and mitotic cells.</a> Science. 357 (6349), eaag0025(2017).</li>
<li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+three-dimensional+chromatin+packing+domains+by+chromatin+scanning+transmission+electron+microscopy+%28ChromSTEM%29%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Analysis of three-dimensional chromatin packing domains by chromatin scanning transmission electron microscopy (ChromSTEM).</a> Sci Rep. 12 (1), 12198(2022).</li>
<li>Penagos-Puig, A., Furlan-Magaril, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterochromatin+as+an+important+driver+of+genome+organization%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Heterochromatin as an important driver of genome organization.</a> Front Cell Dev Biol. 8, (2020).</li>
<li>Millán-Zambrano, G., Burton, A., Bannister, A. J., Schneider, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histone+post-translational+modifications+-+cause+and+consequence+of+genome+function%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Genet%22%5BJournal%5D)">Histone post-translational modifications - cause and consequence of genome function.</a> Nat Rev Genet. 23 (9), 563-580 (2022).</li>
<li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanoscale+chromatin+imaging+and+analysis+platform+bridges+4D+chromatin+organization+with+molecular+function%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Adv%22%5BJournal%5D)">Nanoscale chromatin imaging and analysis platform bridges 4D chromatin organization with molecular function.</a> Sci Adv. 7 (1), eabe4310(2021).</li>
<li>Li, W. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mature+chromatin+packing+domains+persist+after+RAD21+depletion+in+3D%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Adv%22%5BJournal%5D)">Mature chromatin packing domains persist after RAD21 depletion in 3D.</a> Sci Adv. 11 (4), eadp0855(2025).</li>
<li>Mansisidor, A. R., Risca, V. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chromatin+accessibility%3A+methods%2C+mechanisms%2C+and+biological+insights%5BTitle%5D)+AND+%22Nucleus%22%5BJournal%5D)">Chromatin accessibility: methods, mechanisms, and biological insights.</a> Nucleus. 13 (1), 236-276 (2022).</li>
<li>Li, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decoding+topologically+associating+domains+with+ultra-low+resolution+Hi-C+data+by+graph+structural+entropy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Comm%22%5BJournal%5D)">Decoding topologically associating domains with ultra-low resolution Hi-C data by graph structural entropy.</a> Nat Comm. 9 (1), 3265(2018).</li>
<li>Szabo, Q., Bantignies, F., Cavalli, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Principles+of+genome+folding+into+topologically+associating+domains%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Adv%22%5BJournal%5D)">Principles of genome folding into topologically associating domains.</a> Sci Adv. 5 (4), eaaw1668(2019).</li>
<li>Satam, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Next-generation+sequencing+technology%3A+current+trends+and+advancements%5BTitle%5D)+AND+%22Biology%22%5BJournal%5D)">Next-generation sequencing technology: current trends and advancements.</a> Biology. 12 (7), 997(2023).</li>
<li>Acosta, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-color+single-molecule+localization+microscopy+in+chromatin%5BTitle%5D)+AND+%22Light%3A+Sci+Appl%22%5BJournal%5D)">Three-color single-molecule localization microscopy in chromatin.</a> Light: Sci Appl. 14 (1), 123(2025).</li>
<li>Almassalha, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chromatin+conformation%2C+gene+transcription%2C+and+nucleosome+remodeling+as+an+emergent+system%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Adv%22%5BJournal%5D)">Chromatin conformation, gene transcription, and nucleosome remodeling as an emergent system.</a> Sci Adv. 11 (2), eadq6652(2025).</li>
<li>Yin, Y., Lee, W. T. C., Rothenberg, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrafast+data+mining+of+molecular+assemblies+in+multiplexed+high-density+super-resolution+images%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Comm%22%5BJournal%5D)">Ultrafast data mining of molecular assemblies in multiplexed high-density super-resolution images.</a> Nat Comm. 10 (1), 119(2019).</li>
<li>Xu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Super-resolution+imaging+of+higher-order+chromatin+structures+at+different+epigenomic+states+in+single+mammalian+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Super-resolution imaging of higher-order chromatin structures at different epigenomic states in single mammalian cells.</a> Cell Rep. 24 (4), 873-882 (2018).</li>
<li>Xu, J., Liu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+higher-order+chromatin+structures+in+single+cells+using+stochastic+optical+reconstruction+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Bio-Protocol%22%5BJournal%5D)">Imaging higher-order chromatin structures in single cells using stochastic optical reconstruction microscopy.</a> Bio-Protocol. 9 (3), e3160(2019).</li>
<li>Otterstrom, J., Castells-Garcia, A., Vicario, C., Gomez-Garcia, P. A., Cosma, M. P., Lakadamyali, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Super-resolution+microscopy+reveals+how+histone+tail+acetylation+affects+DNA+compaction+within+nucleosomes+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Nucleic+Acids+Res%22%5BJournal%5D)">Super-resolution microscopy reveals how histone tail acetylation affects DNA compaction within nucleosomes in vivo.</a> Nucleic Acids Res. 47 (16), (2019).</li>
<li>Abdelsayed, V., Boukhatem, H., Olivier, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+optimized+buffer+for+repeatable+multicolor+STORM%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Photonics%22%5BJournal%5D)">An optimized buffer for repeatable multicolor STORM.</a> ACS Photonics. 9 (12), 3926-3934 (2022).</li>
<li>Weidner, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advanced+image-free+analysis+of+the+nano-organization+of+chromatin+and+other+biomolecules+by+single+molecule+localization+microscopy+%28SMLM%29%5BTitle%5D)+AND+%22Comput+Struct+Biotechnol+J%22%5BJournal%5D)">Advanced image-free analysis of the nano-organization of chromatin and other biomolecules by single molecule localization microscopy (SMLM).</a> Comput Struct Biotechnol J. 21, 2018-2034 (2023).</li>
<li>Nieves, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+framework+for+evaluating+the+performance+of+SMLM+cluster+analysis+algorithms%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">A framework for evaluating the performance of SMLM cluster analysis algorithms.</a> Nat Methods. 20 (2), 259-267 (2023).</li>
<li>Hyun, Y., Kim, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+development+of+computational+cluster+analysis+methods+for+single-molecule+localization+microscopy+images%5BTitle%5D)+AND+%22Comput+Struct+Biotechnol+J%22%5BJournal%5D)">Recent development of computational cluster analysis methods for single-molecule localization microscopy images.</a> Comput Struct Biotechnol J. 21, 879-888 (2023).</li>
<li>Markaki, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+nuclear+organization+of+transcription+and+DNA+replication%3A+a+topographical+marriage+between+chromatin+domains+and+the+interchromatin+compartment%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harb+Symp+Quant+Biol%22%5BJournal%5D)">Functional nuclear organization of transcription and DNA replication: a topographical marriage between chromatin domains and the interchromatin compartment.</a> Cold Spring Harb Symp Quant Biol. 75 (0), 475-492 (2010).</li>
<li>Gelléri, M., Sterr, M., Strickfaden, H., Cremer, C., Cremer, T., Cremer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Space-time+dynamics+of+genome+replication+studied+with+super-resolved+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Postepy+biochem%22%5BJournal%5D)">Space-time dynamics of genome replication studied with super-resolved microscopy.</a> Postepy biochem. 70 (1), 8-21 (2024).</li>
<li>Cremer, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+4D+nucleome%3A+Evidence+for+a+dynamic+nuclear+landscape+based+on+co-aligned+active+and+inactive+nuclear+compartments%5BTitle%5D)+AND+%22FEBS+Letters%22%5BJournal%5D)">The 4D nucleome: Evidence for a dynamic nuclear landscape based on co-aligned active and inactive nuclear compartments.</a> FEBS Letters. 589 (20), 2931-2943 (2015).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Andor iXon Ultra 888 CCD&nbsp de multiplicação de elétrons;</td><td>Andor</td><td>DU-888U3-CSO-#BV&nbsp;</td><td>NA</td></tr><tr><td>Albumina sérica bovina</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A7030</td><td>Usado para bloquear e lavar amortecedores. Não armazene buffer de bloqueio baseado em BSA por mais de 1 mês em 4&deg; C</td></tr><tr><td>Changchun New Industries Optoelectronics Tech. Co., Ltd., Modelo MGL-FN-532 (532 nm) e nbsp;</td><td>PSU-H-LED&nbsp;</td><td>https://www.cnilaser.com/MGL-FN-532.htm</td><td>NA</td></tr><tr><td>Caixa de Laser Coerente OBIS (405 nm, 488 nm, 532 nm, 552 nm, 637 nm) & nbsp;</td><td>Coerente</td><td>1228877&nbsp;</td><td>Lasers colimatos com 3&ntraço; 10 kW/cm&sup3; Potência média na amostra, mínimo de 10.000 quadros coletados por canal de comprimento de onda com&NBSP; 10&ndash; 30&nbsp; ms&nbsp; tempo de aquisição.&nbsp;</td></tr><tr><td>DABCO (1,4-Diazabiciclo-(2.2.2)-octanagem)</td><td>Sigma</td><td>D27802</td><td>NA</td></tr><tr><td>DBPS (1X)</td><td>Thermo Fisher</td><td>14190-136</td><td>NA</td></tr><tr><td>Água destilada</td><td>NA</td><td>NA</td><td>Qualquer água destilada está ok...</td></tr><tr><td>DTT (Dithiothreitol), 1M</td><td>Sigma</td><td>43816</td><td>NA</td></tr><tr><td>Vidro de cobertura com oito bem câmaras</td><td>Cellvis</td><td>C8-1.5H-N</td><td>Pode ser qualquer placa inferior de vidro, mas os volumes precisam ser ajustados dependendo do recipiente.</td></tr><tr><td>Goat anti Mouse AF568</td><td>Thermo Fisher</td><td>A11004</td><td>Concentração de estoque: 2 mg/mL Estabilidade Pós-Marcagem: 2&ndash; 3 dias</td></tr><tr><td>Goat anti Rabbit AF647</td><td>Thermo Fisher</td><td>A21245</td><td>Concentração de estoque: 2 mg/mL Estabilidade Pós-Marcagem: 4&ndash; 5 dias</td></tr><tr><td>A488 anti-rato de cabra</td><td>Thermo Fisher</td><td>A11006</td><td>Concentração de estoque: 2 mg/mL Estabilidade Pós-Marcagem: 2&ndash; 3 dias</td></tr><tr><td>Anticorpo primário H3K27ac</td><td>Thermo Fisher</td><td>MA5-23516</td><td>Concentração de estoque: 1,0 mg/mL&nbsp;</td></tr><tr><td>Anticorpo Primário H3K9me3 &nbsp;</td><td>Abcam</td><td>AB1769156</td><td>Concentração de estoque: 1,287 mg/mL&nbsp;</td></tr><tr><td>Tubo Cônico de Polipropileno de Alta Clareza 15 mL&nbsp; &nbsp;</td><td>Corning&nbsp;</td><td>352096</td><td>Usado para soluções fixativas e de têmpera &nbsp;</td></tr><tr><td>Tubo Cônico de Polipropileno de Alta Clareza 50 mL</td><td>Corning</td><td>352070</td><td>Usado para estoques de 40 mL de buffers de bloqueio e lavagem</td></tr><tr><td>Ácido clorídrico (HCl), 12M</td><td>Sigma</td><td>258148</td><td>NA</td></tr><tr><td>Nikon Eclipse Ti-E com sistema de foco perfeito &nbsp;</td><td>Nikon</td><td>TI-DH 611392&nbsp;</td><td>Microscópio invertido&nbsp;</td></tr><tr><td>Nikon SR APO TIRF, ampliação 100x, 1,49 NA&nbsp;</td><td>Nikon</td><td><a href="https://www.microscope.healthcare.nikon.com/products/optics/cfi-apochromat-tirf-series%C2%A0">https://www.microscope.healthcare.nikon.com/products/optics/cfi-apochromat-tirf-series&nbsp; </a></td><td>NA</td></tr><tr><td>Soro normal de cabra</td><td>Abcam</td><td>AB7481-1002</td><td>Usado depois que a primeira etiqueta está pronta. Deve estar presente nos Buffers de Bloqueio e Lavagem</td></tr><tr><td>Paraformaldeído 16 %&nbsp;</td><td>Ciências da Microscopia Eletrônica</td><td>15710</td><td>Usado em solução fixadora que deve ser consumida em até 2 semanas após a fabricação. Mantenha a proteção contra luz em 4&deg; C</td></tr><tr><td>Soro salino tamponado com fosfato (PBS) 10X</td><td>Ambion</td><td>AM9625</td><td>NA</td></tr><tr><td>Ponteiras de Pipeta 1000 uL</td><td>SureOne</td><td>02-707-404</td><td>Qualquer ponta de pipeta é aceitável, desde que ela seja. s apropriado para o volume</td></tr><tr><td>RNAPII-PS2</td><td>Abcam</td><td>AB252855</td><td>Concentração de Estoque: 0,98 mg/mL</td></tr><tr><td>Borohidreto de sódio</td><td>Thermo Fisher</td><td>S678-10</td><td>Use fresh para tampão de têmpera toda vez.</td></tr><tr><td>Hidróxido de sódio (NaOH)</td><td>Thermo Fisher & nbsp;</td><td>A16037.36</td><td>NA</td></tr><tr><td>Sulfito de sódio</td><td>Sigma</td><td>S0505</td><td>NA</td></tr><tr><td>Triton X-100 10%</td><td>Thermo Fisher & nbsp;</td><td>28314</td><td>NA</td></tr></tbody></table>

um protocolo de microscopia de localização de molécula Única multirótulo para investigação da cromatina em ambiente nuclear denso

A Multilabel Single Molecule Localization Microscopy Protocol for Investigation of Chromatin in the Dense Nuclear Environment

Um Protocolo de Microscopia de Localização de Molécula Única Multirótulo para Investigação da Cromatina em Ambiente Nuclear Denso

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