诊断尸检和组织收获

Lab Animal Research

Your institution must subscribe to JoVE's Basic Biology collection to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

Welcome!

Enter your email below to get your free 1 hour trial to JoVE!





By clicking "Submit", you agree to our policies.

 

Overview

来源: 凯斯图尔特, RVT, RLATG, CMAR;瓦莱丽. 施罗德, RVT, RLATG。圣母大学, 在

许多动物实验依赖于收集和检测器官和组织的最终数据收集时间点。使用适当的方法收集器官和组织可以影响样品的质量和分析为组织的测试收集的数据。这种动物的安乐死方法也会影响样品的质量。这份手稿将概述适当的尸检技术的大鼠.

Cite this Video

JoVE Science Education Database. 实验动物研究精要. 诊断尸检和组织收获. JoVE, Cambridge, MA, (2017).

Principles

对老鼠和老鼠来说, 最常用的安乐死方法是过量使用二氧化碳 (CO 2 ) 气体。根据美国兽医医学协会 (AVMA), 使用 CO 2 是可以接受的, 条件是尽量减少厌恶和苦恼。 1 这些动物被放在自己的笼子里, 放在一个房间里。CO 2 逐渐引入到腔室中, 其位移率从10% 到30% 的腔容积/分钟, 这使动物在疼痛知觉之前失去知觉与受活化的碳酸。一旦发生呼吸骤停, 以确保该动物已死亡, 便在会议厅内维持流动。过量的吸入麻醉也是可以接受的, 特别是对于需要使用肺组织的项目, 因为 CO 2 会对肺组织造成损害。动物的失血也可能需要一些实验来减少组织中的血液量.

在尸检中准确记录所有发现是必不可少的。应启动一个记录动物完整历史的表格, 包括动物识别、性别、住房条件、出生日期、死亡日期、研究编号/协议编号和原则调查员的姓名。内部检查是进行的, 因为体腔暴露出内脏。任何明显的异常都应该注意。 2

尸检和组织的收获必须在动物安乐死之后立即开始, 因为肠道细菌渗漏可能会混淆一些化验。内脏应从腹腔开始观察, 并移至胸腔。在移除任何组织标本之前, 观察器官的原位是很重要的。在组织学检查中, 2 器官和组织的收获要求组织进行适当的准备。组织标本的组织学应该是 0.5-1 厘米的厚度, 以允许足够的渗透的固定液。固定保存生物组织防止腐烂, 自和腐烂。它也停止任何正在进行的生化反应, 并可能增加机械强度或稳定性的治疗组织。组织固定的广泛目标是保存细胞和组织成分, 以使薄的, 染色的部分的准备。除非另有规定, 最常用的固定剂是10% 中性缓冲福尔马林。可供使用的10% 中性缓冲福尔马林可从主要供应商那里获得。 3

Figure 1
图1。雌性大鼠的腹部和胸部器官。

Figure 2
图2。雄性大鼠的腹部和胸部器官。

Procedure

1. 外部检查

对身体进行肉眼检查, 包括对身体进行病灶和肿块的目测, 应作为尸检的初始步骤进行。头发脱落的部位应检查毛发。牙齿和指甲被评估为过度增长或磨损。任何染色的毛皮在口腔, 鼻孔, 眼睛, 肛门, 和生殖器的开口应该注意。应进行磁带测试、皮肤刮擦和毛皮检查, 以检测外部寄生虫 (见下面的步骤).

磁带测试所需的
  1. 磁带测试
    1. 设备包括手套、透明玻璃纸带、玻璃显微镜幻灯片和剪刀。
    2. 在处理磁带时总是佩戴手套, 因为胶粘剂会从手指上提升油脂和皮肤细胞, 在评估幻灯片时会模糊发现或引起混淆.
    3. 剪切比显微镜幻灯片的宽度稍窄且比长度短的磁带.
    4. 小心地按下胶带的粘性一侧到肛门和周围区域, 并迅速将其移除.
    5. 使用磁带的另一端, 在肩胛骨之间按它, 并迅速将其移除.
    6. 将磁带应用于显微镜幻灯片.
    7. 磁带测试已准备好进行显微镜检查。寄生虫卵在4X 放大倍率下可见, 但应在10X 放大倍数下检查以正确识别该物种.
    8. 重要的是避免接触胶带的粘合面。磁带将从戴手套的手上抬起碎片, 使阅读幻灯片变得困难.
  2. 皮肤刮擦
    1. 在秃发、皮肤病变或痂的任何部位进行皮肤刮擦试验.
    2. 皮肤刮擦所需的设备是一个干净的玻璃显微镜幻灯片, 矿物油, 和金属刮刀或手术刀刀片.
    3. 在显微镜幻灯片上放置几滴矿物油.
    4. 将皮肤挤压到病灶或感兴趣区域边缘的折叠处.
    5. 在皮肤上放置少量矿物油.
    6. 将刮刀或手术刀刃的边缘放在皮肤上, 并刮向毛发生长的方向.
    7. 继续刮, 直到皮肤上可见少量的红肿.
    8. 将从皮肤表面刮来的毛发和组织放入显微镜幻灯片的油中。如果需要, 传播的材料, 使其均匀分布在石油.
    9. 幻灯片现在可以在显微镜下检查了。如果需要, 片可以应用于滑块上的油滴。在4X 和10X 放大倍数下检查幻灯片.
  3. 毛皮检查
    1. 毛皮检查是最后一次进行的外部检查; 但是, 它实际上是在完成内部检查之后完成的.
    2. 该动物被放置在玻璃或塑料培养皿中后, 所有的内部器官样本已经收集.
    3. 盘子放在冰箱里15分钟.
    4. 在15分钟后, 将盘放在解剖显微镜下, 并检查外部寄生虫的毛皮。大多数毛皮螨会移动到头发的两端, 很容易被观察到.

2。腹腔内总检查

  1. 切除皮肤
    1. 一个小切口只在女性的骨盆前和男性的包皮之上进行.
    2. 皮肤切口延伸到下巴.
    3. 钝夹层用于松弛筋膜和肌肉的皮肤.
    4. 横切口是在后肢前部和前腿后方进行的。应注意不要切断腋窝地区的血管.
    5. 使用钝性解剖暴露宫颈区和胸部。应格外小心, 以避免颈部颈血管破裂.
  2. 乳腺
    1. 在雌性中, 检查乳腺组织以查找肿块、变色或异常。
    2. 哺乳或怀孕的女性将增加乳房组织容积, 牛奶可能存在.
    3. 乳房组织从胸骨顶部的柄到腹面上的生殖器开口处, 并在臀部和肩部两侧近侧伸展.
    4. 乳腺切除术需要用拇指钳抓住腺体的边缘, 用钝夹层将皮肤的附着物松开。一旦腺体已从皮肤分离, 虹膜剪刀可以用来削减任何剩余的附件之前, 把腺体在一个固定解决方案.
  3. 皮下腺体
    1. 包皮腺体是配对的, 位于雄性大鼠的包皮前部。它们看起来很大, 呈灰色至淡黄色, 呈泡沫状.
    2. 颌下腺是配对的, 位于下颌, 沿颈部延伸至柄胸骨。他们有一个强硬的覆盖, 并紧紧粘在肌肉.
    3. 切除这些腺体需要在宫颈区工作时进行钝性解剖和额外的护理, 以防止血管破裂。钝性解剖是解剖解剖中的一种技术, 在这种方法中, 组织被分离, 并在不受切割的情况下暴露.
    4. 对于钝器解剖, 剪刀用来分散组织, 而不是把它们分开。闭合的小贴士被推入组织, 然后在自然平面上打开以分裂组织。这一过程需要耐心和微妙的触觉, 因为组织的伸展会对邻近的器官和血管造成损害.
    5. 一旦从部下的肌肉中解脱出来, 腺体就会被解除, 并 #160; 残余的附件被切断.
    6. 腺体至少需要一个切口, 以使定影液的渗透.
    7. 皮下脂肪的数量和沉积量进行评估。一个肥胖的动物可能有大量的脂肪与皮肤的感觉加厚。脱水的动物会减少皮肤的弹性, 它会感觉更薄.
  4. 肌肉
    1. 观察腹部、肋间和颈部和四肢裸露的肌肉。注意任何异常增厚, 肿块, 或变色.
    2. 如果需要肌肉进行分析, 在采取任何腹部器官以减少血液污染之前, 选择并切除样本.
  5. 打开体腔
    1. 在暴露的腹部肌肉的最尾端处做一个小的横切口。
    2. 将肌肉从器官中抬起, 沿着 式阿尔巴 剑.
    3. 削减腹部肌肉从中线侧, 只是以上的后肢上都两侧.
    4. 沿两侧肋骨的曲线切割腹部肌肉.
  6. 腹部脂肪
    1. 评估体内脂肪的数量和堆积。一个健康的动物将有腹部脂肪垫和一些脂肪沿背部表面在腹腔。一个过于瘦弱的动物, 或一个非常幼小的动物, 在肾脏周围不会有可观数量的脂肪.
    2. 观察身体脂肪的颜色并注意任何异常.

3。腹部器官

  1. 肝脏
    1. 正常情况下, 肝脏颜色应为深红色。边距应平滑, 边缘应清晰。异常的肝脏会有一个加厚的边缘, 可以有凹槽或扇形边缘.
    2. 在处理肝脏时应注意, 因为它是易碎的组织。对器官完整性的任何破坏都会导致血液渗入体腔并使器官模糊不清.
    3. 轻轻地将肝脏从横膈膜上反射出来, 并通过肝前的血管进行切割.
    4. 将肝脏反射回横膈膜, 并抓住连接肝脏所有叶的纤维结点。在切断肠道和胃部所有附着物的同时, 提起肝脏.
    5. 将肝脏取出一条, 并将多余的血液从器官表面上涂抹。它可能被放置在盐水浴, 或冲洗在无菌盐水, 之前切割成更薄的部分, 以允许渗透的固定溶液.
  2. 胆膀胱
    1. 胆囊是一个小的透明囊, 经常出现黄色, 由于胆汁的积累。它是存在于小鼠, 但不是在老鼠.
    2. 胆囊位于肝脏的最高叶之间, 沿中线。它通常是连接到膜片由一个薄带, 可以不小心被撕裂, 导致胆膀胱破裂.
    3. 胆囊可以用肝脏切除, 以后分开检查.
  3. 脾脏
    1. 脾脏为深红色, 位于胃的下部曲率处。它的形状应该是常规的, 表面略有光泽.
    2. 它在男性中通常比雌性大。有内寄生感染、细菌感染或血液病的动物可能扩大了脾脏.
    3. 由于脾脏过滤器损坏的红细胞从循环, 它充满了血液。取出脾脏时, 应避免穿刺器官.
    4. 除去它, 脾脏被解除, 并且附件在胃和脾脏之间切开.
  4. 肠道
    1. 死后发生的变化很快, 包括组织中的血液汇集, 导致瘀伤和肠道膨胀的气体--通常是细菌过度生长产生的。肠道被彻底检查后, 它已经从身体中删除.
    1. 胃位于食道的远端。它似乎是两个色调, 区分肌肉和腺体部分.
    2. 胃应该通过感觉来评估食物的存在。啮齿类动物通常经常吃由于高新陈代谢的率。空腹应注意, 因为它可以表明疾病.
    3. 不要割胃, 因为内容会污染腹腔内的器官.
    4. 从肠道中取出胃部, 食道在胃前被切断。如果将胃放在固定的固定容器中, 可以在食道周围绑一条缝合线, 以防止在切割之前溢出胃的内容.
  5. 小肠
    1. 小肠由三部分组成: 十二指肠、空肠和回肠。它不会含有粪便颗粒.
    2. 十二指肠是从后胃括约肌到空肠开始的较短的部分。胆管进入小肠在十二指肠, 和胰腺组织更牢固地附着在小肠的这部分.
    3. 空肠是小肠的中心部分.
    4. Peyer 和 #39 的补丁-由小椭圆形斑块中的淋巴组织组成-存在于大鼠空肠和回肠的 nonmesenteric 表面。 3 这些都是免疫系统的一部分, 可以帮助诊断免疫疾病.
    5. 回肠是小肠的远端部分, 是最长的部分, 在盲肠处终止.
  6. 盲肠
    1. 盲肠是一种绿色的颜色, 非常柔软。
    2. 它位于小肠和大肠的交界处.
    3. 在盲肠中发生发酵, 因此器官穿刺会导致细菌的恶臭和污染.
  7. 大肠
    1. 大肠开始于盲肠, 并继续肛门。它很容易辨认, 因为粪便颗粒可以在小肠的流明内可视化.
    2. 安乐死后不应立即出现出血或变色的部位.
  8. 肠系膜
    1. 小而大的肠子被肠系膜固定在身体上, 这是一个含有血管、脂肪和淋巴结的膜。
    2. 在清除肠道之前, 应检查肿大的淋巴结和任何肿块.
  9. 胰腺
    1. 胰腺是一种弥漫的器官, 位于胃下面, 在十二指肠的第一个褶皱之间。这是一个浅黄褐色的灰色颜色和组成的多个小裂片不规则的边缘.
    2. 可能无法将胰脏移出一片.
    3. 如果要采集胰腺组织, 必须在切除肠道之前进行.
    4. 被识别为胰腺的组织必须小心地从周围的肠系膜组织中被戏弄.
  10. 移除肠道
    1. 肠道被移除作为一个片断, 从胃开始和延伸到肛门.
    2. 切开是通过大肠, 只是前面的肛门。整个肠道可以解除和任何膜的附件切断。肠道可以从肠系膜上移除, 切成部分, 并固定.
    3. 当将肠道的部分放置到含有其他器官的罐子中时, 必须将末端与肠道细菌的组织污染联系起来.
    4. 肠道的流明可以通过用小的、细尖的剪刀切割其长度来暴露。内部可以冲洗后暴露腔.
    5. 一些研究 m需要切除和冲洗部分肠, 而不是切开。通过将钝针固定在切除的组织的一端, 盐水或定影液可以被强制进入肠道以冲洗其内容.
  11. 肾脏
    1. 肾脏是配对的器官, 位于背部的肌肉。右肾高于左侧。老年动物的肾脏可能被脂肪堆积所包围, 使它们难以形象化.
    2. 它的大小和颜色大约是一个深芸豆, 它的表面应该是平滑的.
    3. 立即肾前是肾上腺, 出现作为一个小的, light-pink 结节.
    4. 取出肾脏, 用镊子将其隔离, 并在肾脏和输尿管之间切开.
    5. 肾脏有一个坚韧的外囊, 可能被剥离, 以更好地可视化的表面。沿长轴和另一肾脏横向切开一个肾脏。注意肾脏内的任何砂砾都可能表明存在晶体或矿床.
  12. 女性生殖系统
    1. 子宫是 Y 形结构。子宫的身体是短的与配对的角在左边和右边。角终止于输卵管和卵巢。在一个妊娠的女性, 角将是淡粉红色和薄。在怀孕的动物中, 牛角会显得较暗, 并有明显的血管在子宫角附近运行。随着妊娠的进行, 子宫角将有一个和 #34; 串珍珠和 #34; 外观。发育中的胚胎会在喇叭中形成一个苍白的区域, 当它们发育时, 子宫会伸展, 组织会变得更薄, 从而使视觉化.
    2. 卵巢将位于肾脏的正下方。他们将有一个粗糙的表面, 由于不同的成熟阶段的卵泡。囊卵巢会有充满液体的囊泡。这种液体可以从稻草色到带下.
    3. 切除卵巢, 切断动脉附件前和输卵管向后。如果需要, 卵巢可以取出附着在子宫上.
    4. 切除子宫时, 必须轻轻地抓住和牵引, 才能在宫颈下切割。切开后, 提起子宫的身体和角, 打破体腔内的任何附着物.
  13. 男性生殖系统
    1. 精囊是白色, 公羊和 #39; s 角状, 配对结构位于前膀胱和附着在中线上的前列腺。大小不同, 但它们可以像盲肠一样大.
    2. 前列腺位于膀胱周围的基地。这种组织通常是浅褐色的。在较年长的动物中, 它可能表现出增生。较年长的动物通常会有更多的体脂, 可能会使前列腺的可视化变得困难.
    3. 睾丸配对, 位于阴囊。表面应光滑, 表面可见细小的血管。小鼠和大鼠缺乏腹股沟环或括约肌, 这使得动物可以将睾丸取出进入腹腔。要形象化这些, 抓住腹部脂肪垫位于下腹部并且拉扯他们前。这将从阴囊中取出睾丸, 以允许检查。附睾是沿着睾丸的下缘和锥形向顶端。输精管附着在附睾末端, 并带回前列腺.
    4. 睾丸切除可以通过切割阴囊上的附着物和切割输精管来完成.
    5. 除去前列腺和精囊需要抓住膀胱的底部和解除, 同时切断前列腺下的附件.

4。胸腔

  1. 肺部
    1. 肺部通常是一个明亮的粉红色的颜色, 和海绵状的纹理与光滑的表面。然而, 安乐死与 CO 2 可能导致肺出血, 导致深红色斑点, 可以覆盖整个肺部表面.
    1. 心脏是暗红色与四室。心室肌肉发达, 触感牢固。心房是深红色的颜色和坐在心室顶部。他们的肌肉少得多, 显得弛缓.
    2. 心包囊是心脏周围的一层薄薄的半透明膜.
  2. 胸腺
    1. 胸腺位于心脏的前处, 并坐在气管上。质地应该平滑.
    2. 在幼小的动物中, 它看起来像褐色, 带有脂肪的质感.
    3. 较年长的动物将有脂肪组织渗入胸腺, 扩大它并给胸腺一个白色的颜色.
  3. 气管
    1. 气管从会厌延伸到支气管的分岔。它是一个脊状, 软骨管, 是灵活的.
    2. 它应该是明确的, 没有任何液体或泡沫液体的流明。安乐死与 CO 2 可以导致液体 (serosanguinous 和/或泡沫) 积聚在肺部和气管由于出血.
  4. 食道
    1. 食道从口腔延伸到胃部。它是一个非常薄的管, 直接位于气管和心脏后, 并通过横膈膜的胃.
    2. 食道很难切除, 因为它很容易撕裂, 即使组织是有弹性的。切除食管是最容易做的, 解剖它远离气管后, 心脏和肺部切除.
  5. 移除胸腔器官
    1. 心脏和肺部最容易被一起移除.
    2. 将镊子垂直于气管, 牢牢地抓住气管, 就在胸腺上方.
    3. 使用剪刀, 将切口垂直于钳前的气管。这伤口应该切断气管和食道.
    4. 不松开气管的抓地力, 将气管抬高尾, 并将肺部的任何附着物剪断到肋骨笼中的脊柱表面.
    5. 食管可能需要切割, 以能够解除心脏和肺部无胸腔.
    6. 心脏从身体中取出后, 可以用生理盐水冲洗, 去除残余血液和血块, 也可以通过主动脉填充固定剂.
    7. 一旦肺切除, 就会用固定剂充气。结扎被松散地放置在气管周围。针附着在含有所选择的固定剂的注射器上, 被穿线到气管的腔内。结扎针周围收紧, 并注射固定剂, 直到肺部充气。拔除针头后, 绷带会收紧以防止渗漏.
  6. 口腔腔
      1. 啮齿动物的舌头是平滑的.
      2. 检查表面是否有病变, 包括下侧.
      3. 舌头很少被收获, 除了专门的调查, 如口腔癌研究.
      4. 移除舌, 将口腔两侧的颊面切开至颞下颌关节.
      5. 脱臼下颌骨, 并反映上颌, 以揭示会厌和舌头的基础.
      6. 使用镊子伸出舌头, 将尾下的附着物切到舌头的底部.
      7. 保持牵引, 在舌头的底部水平地切开到 f它来自口腔.
    1. 齿
      1. 大鼠齿由三颗臼齿和一颗门牙组成, 每个象限由无牙纵。它们只在唇面上被搪瓷覆盖;在牙齿的内部表面是牙本质.
      2. 大鼠的牙齿通常是黄色/橙色的颜色。这种颜色是最明显的门牙珐琅, 是由于存在一个含铁色素。颜色从出生后21天开始, 随着年龄的增长而加深.
      3. 检查牙齿是否过度生长或错牙.

5。头

  1. 眼睛
    1. 眼睛的大小应该相等, 并且清除渗出物。结膜应该光滑.
    2. 移除眼睛, 对眼睛周围的皮肤施加压力向后和向下, 凸出眼睛从轨道。使用一个弯曲尖端钳, 隔离地球, 并削减在插座中保持它的附件.
    1. 观察耳朵以进行识别。一些研究人员要求将耳标记包括在器官样本中以确认动物的身份.
    2. 耳道被检查为任何病变, 肿块, 或渗出物.
    1. 鼻子被观察为液体或渗出物.
    2. 鼻孔应该是对称和明确的.

尸检-意味着器官的死后检查-和组织的收获是许多实验室实验的组成部分, 它依赖于最终收集的数据收集时间点。对收获器官的分析。因此, 重要的是要学习正确的诊断尸检和组织采收技术, 因为该程序可以大大影响样品的质量收集。本演示将对实验室动物的腹部、生殖器和胸器官的解剖和提取方法进行回顾.

在开始此过程之前, 应启动包含动物完整历史记录的窗体: 动物识别号、性别、住房条件、出生日期、死亡日期、研究协议号和原则调查员的名字.

下一步, 准备解剖区域。放置一个长凳覆盖物, 解剖托盘, 仪器指定尸检, 其中包括剪刀, 镊子, 无菌手术刀刀片, 骨刀, 钝探针, 小刮刀和吸收缝合材料。组织学检查器官和组织的收获要求在固定液中保存组织。除非另有规定, 最常用的固定剂是10% 中性缓冲福尔马林。请注意, 组织样本的厚度应为 0.5-1 厘米, 以使定影液有足够的穿透力。固定防止腐烂、自和腐烂;停止任何正在进行的生物化学反应;并可提高经处理的组织的机械强度和稳定性.

动物安乐死的方法也会影响样品的质量。对小鼠和大鼠来说, 最常用的安乐死方法是过量使用二氧化碳气体。动物在他们的家庭笼子被留下, 被安置, 入房间, 并且 CO2 逐渐被介绍入房间以10-30% 的位移率房间容量/分钟。这使动物失去知觉之前, 疼痛的感觉是与受活化的碳酸。在发生呼吸骤停和动物死亡之前, 在枪膛内保持流动.

在安乐死之后, 首先通过目测检查胴体的损伤和肿块, 过度的牙齿生长, 或在口腔、鼻孔、耳朵上的毛发染色来进行初步的外部检查,眼睛和肛门和生殖器的开口。如果有必要, 做一个磁带测试, 皮肤刮擦, 和毛皮检查, 以检测外部寄生虫。一旦外部检查完成, 是时候开始尸检, 从腹腔开始。请注意, 在移除任何组织样本之前, 观察该器官 原位 是很重要的.

开始切除皮肤, 在女性的骨盆前放置一个小切口, 男性的包皮以上。然后, 使用钝剥离技术, 松弛皮肤的筋膜和肌肉。钝夹层是解剖解剖中的一种技术, 其中组织被分离, 底层结构在没有切割的情况下暴露出来。在这种技术中, 剪刀被用来分散组织, 而不是把它们分开。闭合的小贴士被推入组织, 然后在自然平面上打开以分裂组织。这一过程需要耐心和微妙的触觉, 因为组织的伸展会对邻近的器官和血管造成损害。然后将切口延伸至下巴。下一步, 横切口前侧的后肢和前肢后部, 并使用钝性解剖暴露颈部和胸部。应格外小心, 以避免颈部颈动脉破裂.

在女性中, 皮肤切除, 观察乳房组织从胸骨顶部的柄到生殖器开放的腹面表面; 侧向两边伸展。哺乳或怀孕的女性将增加乳房组织容积和牛奶可能存在。切除乳腺, 用钳子抓住组织的边缘, 用钝的解剖来松开皮肤的附着物。一旦腺体被分离, 它可以放在一个固定的解决方案, 随后的组织学分析.

在这个阶段, 你可以观察到下颌涎腺, 它们是配对的, 位于下颌骨--沿着颈部延伸至柄胸骨。切除这些腺体需要钝解剖和额外的护理, 当工作在颈部地区, 以防止血管破裂。一旦从部下的肌肉中解脱出来, 抬起腺体并切断任何残留的附着物。腺体至少需要一个切口, 以使定影液的穿透.

此外, 您可以看到气管, 它从会厌延伸到支气管的分岔。它是一个脊状, 软骨管, 是灵活的。虽然正常情况下, 安乐死与 CO2 可能导致体液积聚在肺部和气管, 看起来像一个泡沫清澈的液体。皮下脂肪也会出现在这个地区。评估它的数量和沉积。一个肥胖的动物可能有大量的脂肪与皮肤的感觉加厚.

在打开体腔前, 观察腹部、肋间和裸露的颈部肌肉, 以及四肢是否有增厚、肿块或变色。要打开体腔, 首先在裸露的腹部肌肉的最尾部点做一个小的横切口。然后将肌肉从器官中抬起, 沿着 式阿尔巴 切割到剑。接下来, 从中线向两侧的后肢侧解剖肌肉。最后, 沿两侧肋骨的曲线切割。一旦体腔被打开, 评估腹部脂肪的数量和积累。一个健康的动物将有腹部脂肪垫和一些脂肪沿背部表面的腔。观察该组织的颜色并注意任何异常.

现在我们准备开始收获腹部器官。首先找到脾脏, 它是深红色的, 沿着胃的下部曲率。它应该是规则的形状, 并与一个稍微磨砂表面。要删除脾抬起器官, 将附件剪断到胃部.

胃位于食道的远端。它似乎是两个色调, 区分肌肉和腺体部分。感觉到食物的存在。空腹应注意, 因为它可以表明疾病。做 切胃, 因为内容会污染腹腔内的器官.

小肠与胃上部和下部相连。小肠有三不同的部分。首先是十二指肠--从胃后部括约肌到空肠开始处较短的部分。胆管进入这里, 胰腺组织更牢固地附着在小肠的这部分。空肠是中心部分。Peyer 和 #39 的斑块, 是由淋巴组织组成的小椭圆形区域, 可以在空肠和回肠表面观察到。回肠是小肠中最长的部分, 位于小肠的交界处, 在盲肠处终止。盲肠的颜色呈绿色, 非常柔软.

大肠继续从盲肠到肛门。这是容易识别的粪便丸可以在这个结构的流明内可视化。小肠和大肠被肠系膜固定在身体上, 这是一个含有血管、脂肪和淋巴结的膜。在切除肠道之前, 应检查肿大的淋巴结和任何肿块。胰腺是一种弥漫的器官, 位于胃后部。这是一个浅黄褐色的灰色颜色和组成的多个小裂片不规则的边缘。收获胰腺, 抓住器官, 轻轻地从周围的肠系膜组织中逗弄它。这必须在切除肠道之前完成.

将整个通道从胃部开始, 延伸到肛门, 首先在直肠处结扎, 然后通过肛门前部的大肠切开。接下来, 在食道和胃的交界处放置一个结扎, 随后整个肠道可以被解除, 任何膜状附着物被切断。整件事可以从肠系膜上分离出来, 切成部分并固定.

肾脏是配对的器官, 位于背部的肌肉。它们应该是一个黑色的芸豆的大小和颜色, 并有一个光滑的表面。紧接在肾脏前的是肾上腺出现作为一个小浅粉红色的结节.

取出肾脏, 用镊子将其隔离, 并在器官和输尿管之间切开。坚硬的外层可以被剥去, 检查表面。沿着长轴和另一条横的方向, 把一个肾脏切成两半。任何砂砾内可能表明存在的晶体或矿床。最后, 去除肝脏, 这是一个深红色的颜色和它的边缘应该是光滑的, 一个清脆的优势。处理肝脏时应注意, 因为它是易碎的组织。对器官完整性的任何破坏都会导致血液渗入体腔, 并使其他器官模糊不清.

移除肝脏, 首先轻轻地将耳垂从隔膜上反射出来, 然后通过结构前的血管进行切割。接下来, 将肝脏反射到横膈膜上, 抓住中央连接所有耳垂的纤维结点。最后, 提起器官, 同时切断所有的肠道和胃的附件.

雌性生殖系统由子宫和卵巢组成。子宫是一个短的 Y 形结构, 角在两个方向延伸。角终止于输卵管和卵巢--位于肾脏的正下方。卵巢将有一个粗糙的表面, 由于不同的成熟阶段的卵泡.

切除卵巢, 切断动脉附件前和输卵管向后。取出子宫, 轻轻地抓住并切开宫颈以下。切开后, 提起子宫的身体和角, 打破体腔内的任何附着物.

在雄性中, 你也可以观察到位于包皮前部的包皮腺体。它们看起来很大, 呈灰色至淡黄色, 呈泡沫状。这些腺体的切除和固定与颌下腺相似。此外, 雄性生殖系统由精囊、前列腺和睾丸组成。精囊是白色的, #34; 公羊和 #39; s 角形和 #34; 结构位于膀胱前部, 附着在前列腺的中线上.

前列腺--一般是浅褐色和 #160; 颜色--位于底部的膀胱周围。为了使睾丸形象化, 抓住位于下腹部的腹部脂肪垫, 把它们前。这将从阴囊中取出睾丸, 以允许检查。表面应光滑, 表面可见良好的血管.

附睾沿睾丸下部边缘向顶端锥形。输精管附着在附睾末端, 并带回前列腺。切除睾丸, 切开阴囊上的附着物, 割断输精管。为了除去前列腺和精囊, 抓住膀胱的底部和解除前列腺下方的附着物.

移动到胸腔内的器官。为了暴露这些重要的结构, 把隔膜从附着物移到肋骨上。接下来, 穿过肋骨两侧侧向柄胸骨的顶部, 然后反射骨骼 cranially, 以可视化胸部器官.

肺部通常呈鲜艳的粉红色, 表面光滑, 质地柔软。然而, 安乐死与 CO2 可导致肺部出血, 导致深红色斑点, 可以覆盖整个肺部表面.

心脏是深红色的, 心室是肌肉发达的, 感觉牢固的触摸。心房是深红色的颜色和坐在心室顶部。他们是少得多肌肉和显得弛缓性。一个叫做心包囊的薄薄的半透明膜围绕着心脏.

胸腺位于心脏的前部, 并坐在气管上。质地应该平滑。你可以看到气管如前所述, 食道是一个非常薄的管, 直接位于气管和心脏后部, 并通过膈胃.

取出胸腔内的器官, 首先抓住胸腺上方的气管, 并在钳前进行垂直切口。在保持抓地的同时, 将气管向上尾, 并将肺部的任何附着物剪断到肋骨笼中的脊柱表面。食管可能需要切割, 以能够解除心脏和肺部的胸部腔

后, 心脏被删除的身体, 冲洗它与生理盐水, 以消除残余的血液和血块, 或填补它与固定通过主动脉。一旦肺被切除, 就会在气管周围放置一个松散的结扎。接着, 将针附着在装有固定剂的注射器上, 插入气管的腔内, 并收紧结扎。然后注射固定剂直到肺部充气。最后, 取下针, 再拧紧绷带以防止渗漏.

关于啮齿类动物尸检和组织收获的知识的呼吸, 让 & #39; 看一些e 当前实验室实验涉及这些程序.

诊断尸检是肿瘤转移实验的常见终点。在这个例子中, 研究者将癌细胞注入啮齿动物和 #39; 然后, 三十到六十天后, 他们进行了尸检, 这显示了明显的肝转移.

组织提取通常伴随着组织学分析, 这有助于研究样品的显微解剖。根据组织的固定、嵌入、切片和染色的协议, 研究者能够研究这些器官的显微结构, 并揭示在原子水平上的基因或药理干预的作用.

有时研究人员移除组织以研究生理过程, 如血管生成。在这里, 实验者形象化老鼠和 #39 的肠系膜组织来刺激血管生长。然后, 他们收获了几个部分, 并处理他们的标记, 染色细胞的任何血管, 研究的细胞动力学参与血管网络的增长.

您和 #39; 我刚刚看了朱庇特和 #39 的视频, 详述了实验室动物诊断尸检和组织收获的步骤。使用适当的器官去除和保存技术是重要的, 因此提取过程对收集的数据的解释没有影响。一如既往, 感谢收看!

Summary

许多研究项目的最后一步是实验动物的尸检。详细观察外部和内部结构, 然后收集组织进行进一步分析, 提供了大量的研究数据。适当的方法, 组织去除和保存适当的固定液是必不可少的正确解释的结果.

References

  1. Leary, S., Underwood, W., Anthony, R., Cartner, S., Corey, D., Grandin, T., et al. 2013. AVMA guidelines for the euthanasia of animals: 2013 edition.
  2. Parkinson, C.M., O'Brien, A., Albers, T.M., Simon, M.A., Clifford, C.B. and Pritchett-Corning, K.R. 2011. Diagnostic Necropsy and Selected Tissue and Sample Collection in Rats and Mice. 54. e2966. 1-7.
  3. Fiette, L. and Slaoui, M. 2011. Necropsy and Sampling Procedures in Rodents. Drug Safety Evaluation: Methods and Protocols, 39-67.
  4. Youngson, R.M. 2005. Collins dictionary of Medicine fourth edition.

1. 外部检查

对身体进行肉眼检查, 包括对身体进行病灶和肿块的目测, 应作为尸检的初始步骤进行。头发脱落的部位应检查毛发。牙齿和指甲被评估为过度增长或磨损。任何染色的毛皮在口腔, 鼻孔, 眼睛, 肛门, 和生殖器的开口应该注意。应进行磁带测试、皮肤刮擦和毛皮检查, 以检测外部寄生虫 (见下面的步骤).

磁带测试所需的
  1. 磁带测试
    1. 设备包括手套、透明玻璃纸带、玻璃显微镜幻灯片和剪刀。
    2. 在处理磁带时总是佩戴手套, 因为胶粘剂会从手指上提升油脂和皮肤细胞, 在评估幻灯片时会模糊发现或引起混淆.
    3. 剪切比显微镜幻灯片的宽度稍窄且比长度短的磁带.
    4. 小心地按下胶带的粘性一侧到肛门和周围区域, 并迅速将其移除.
    5. 使用磁带的另一端, 在肩胛骨之间按它, 并迅速将其移除.
    6. 将磁带应用于显微镜幻灯片.
    7. 磁带测试已准备好进行显微镜检查。寄生虫卵在4X 放大倍率下可见, 但应在10X 放大倍数下检查以正确识别该物种.
    8. 重要的是避免接触胶带的粘合面。磁带将从戴手套的手上抬起碎片, 使阅读幻灯片变得困难.
  2. 皮肤刮擦
    1. 在秃发、皮肤病变或痂的任何部位进行皮肤刮擦试验.
    2. 皮肤刮擦所需的设备是一个干净的玻璃显微镜幻灯片, 矿物油, 和金属刮刀或手术刀刀片.
    3. 在显微镜幻灯片上放置几滴矿物油.
    4. 将皮肤挤压到病灶或感兴趣区域边缘的折叠处.
    5. 在皮肤上放置少量矿物油.
    6. 将刮刀或手术刀刃的边缘放在皮肤上, 并刮向毛发生长的方向.
    7. 继续刮, 直到皮肤上可见少量的红肿.
    8. 将从皮肤表面刮来的毛发和组织放入显微镜幻灯片的油中。如果需要, 传播的材料, 使其均匀分布在石油.
    9. 幻灯片现在可以在显微镜下检查了。如果需要, 片可以应用于滑块上的油滴。在4X 和10X 放大倍数下检查幻灯片.
  3. 毛皮检查
    1. 毛皮检查是最后一次进行的外部检查; 但是, 它实际上是在完成内部检查之后完成的.
    2. 该动物被放置在玻璃或塑料培养皿中后, 所有的内部器官样本已经收集.
    3. 盘子放在冰箱里15分钟.
    4. 在15分钟后, 将盘放在解剖显微镜下, 并检查外部寄生虫的毛皮。大多数毛皮螨会移动到头发的两端, 很容易被观察到.

2。腹腔内总检查

  1. 切除皮肤
    1. 一个小切口只在女性的骨盆前和男性的包皮之上进行.
    2. 皮肤切口延伸到下巴.
    3. 钝夹层用于松弛筋膜和肌肉的皮肤.
    4. 横切口是在后肢前部和前腿后方进行的。应注意不要切断腋窝地区的血管.
    5. 使用钝性解剖暴露宫颈区和胸部。应格外小心, 以避免颈部颈血管破裂.
  2. 乳腺
    1. 在雌性中, 检查乳腺组织以查找肿块、变色或异常。
    2. 哺乳或怀孕的女性将增加乳房组织容积, 牛奶可能存在.
    3. 乳房组织从胸骨顶部的柄到腹面上的生殖器开口处, 并在臀部和肩部两侧近侧伸展.
    4. 乳腺切除术需要用拇指钳抓住腺体的边缘, 用钝夹层将皮肤的附着物松开。一旦腺体已从皮肤分离, 虹膜剪刀可以用来削减任何剩余的附件之前, 把腺体在一个固定解决方案.
  3. 皮下腺体
    1. 包皮腺体是配对的, 位于雄性大鼠的包皮前部。它们看起来很大, 呈灰色至淡黄色, 呈泡沫状.
    2. 颌下腺是配对的, 位于下颌, 沿颈部延伸至柄胸骨。他们有一个强硬的覆盖, 并紧紧粘在肌肉.
    3. 切除这些腺体需要在宫颈区工作时进行钝性解剖和额外的护理, 以防止血管破裂。钝性解剖是解剖解剖中的一种技术, 在这种方法中, 组织被分离, 并在不受切割的情况下暴露.
    4. 对于钝器解剖, 剪刀用来分散组织, 而不是把它们分开。闭合的小贴士被推入组织, 然后在自然平面上打开以分裂组织。这一过程需要耐心和微妙的触觉, 因为组织的伸展会对邻近的器官和血管造成损害.
    5. 一旦从部下的肌肉中解脱出来, 腺体就会被解除, 并 #160; 残余的附件被切断.
    6. 腺体至少需要一个切口, 以使定影液的渗透.
    7. 皮下脂肪的数量和沉积量进行评估。一个肥胖的动物可能有大量的脂肪与皮肤的感觉加厚。脱水的动物会减少皮肤的弹性, 它会感觉更薄.
  4. 肌肉
    1. 观察腹部、肋间和颈部和四肢裸露的肌肉。注意任何异常增厚, 肿块, 或变色.
    2. 如果需要肌肉进行分析, 在采取任何腹部器官以减少血液污染之前, 选择并切除样本.
  5. 打开体腔
    1. 在暴露的腹部肌肉的最尾端处做一个小的横切口。
    2. 将肌肉从器官中抬起, 沿着 式阿尔巴 剑.
    3. 削减腹部肌肉从中线侧, 只是以上的后肢上都两侧.
    4. 沿两侧肋骨的曲线切割腹部肌肉.
  6. 腹部脂肪
    1. 评估体内脂肪的数量和堆积。一个健康的动物将有腹部脂肪垫和一些脂肪沿背部表面在腹腔。一个过于瘦弱的动物, 或一个非常幼小的动物, 在肾脏周围不会有可观数量的脂肪.
    2. 观察身体脂肪的颜色并注意任何异常.

3。腹部器官

  1. 肝脏
    1. 正常情况下, 肝脏颜色应为深红色。边距应平滑, 边缘应清晰。异常的肝脏会有一个加厚的边缘, 可以有凹槽或扇形边缘.
    2. 在处理肝脏时应注意, 因为它是易碎的组织。对器官完整性的任何破坏都会导致血液渗入体腔并使器官模糊不清.
    3. 轻轻地将肝脏从横膈膜上反射出来, 并通过肝前的血管进行切割.
    4. 将肝脏反射回横膈膜, 并抓住连接肝脏所有叶的纤维结点。在切断肠道和胃部所有附着物的同时, 提起肝脏.
    5. 将肝脏取出一条, 并将多余的血液从器官表面上涂抹。它可能被放置在盐水浴, 或冲洗在无菌盐水, 之前切割成更薄的部分, 以允许渗透的固定溶液.
  2. 胆膀胱
    1. 胆囊是一个小的透明囊, 经常出现黄色, 由于胆汁的积累。它是存在于小鼠, 但不是在老鼠.
    2. 胆囊位于肝脏的最高叶之间, 沿中线。它通常是连接到膜片由一个薄带, 可以不小心被撕裂, 导致胆膀胱破裂.
    3. 胆囊可以用肝脏切除, 以后分开检查.
  3. 脾脏
    1. 脾脏为深红色, 位于胃的下部曲率处。它的形状应该是常规的, 表面略有光泽.
    2. 它在男性中通常比雌性大。有内寄生感染、细菌感染或血液病的动物可能扩大了脾脏.
    3. 由于脾脏过滤器损坏的红细胞从循环, 它充满了血液。取出脾脏时, 应避免穿刺器官.
    4. 除去它, 脾脏被解除, 并且附件在胃和脾脏之间切开.
  4. 肠道
    1. 死后发生的变化很快, 包括组织中的血液汇集, 导致瘀伤和肠道膨胀的气体--通常是细菌过度生长产生的。肠道被彻底检查后, 它已经从身体中删除.
    1. 胃位于食道的远端。它似乎是两个色调, 区分肌肉和腺体部分.
    2. 胃应该通过感觉来评估食物的存在。啮齿类动物通常经常吃由于高新陈代谢的率。空腹应注意, 因为它可以表明疾病.
    3. 不要割胃, 因为内容会污染腹腔内的器官.
    4. 从肠道中取出胃部, 食道在胃前被切断。如果将胃放在固定的固定容器中, 可以在食道周围绑一条缝合线, 以防止在切割之前溢出胃的内容.
  5. 小肠
    1. 小肠由三部分组成: 十二指肠、空肠和回肠。它不会含有粪便颗粒.
    2. 十二指肠是从后胃括约肌到空肠开始的较短的部分。胆管进入小肠在十二指肠, 和胰腺组织更牢固地附着在小肠的这部分.
    3. 空肠是小肠的中心部分.
    4. Peyer 和 #39 的补丁-由小椭圆形斑块中的淋巴组织组成-存在于大鼠空肠和回肠的 nonmesenteric 表面。 3 这些都是免疫系统的一部分, 可以帮助诊断免疫疾病.
    5. 回肠是小肠的远端部分, 是最长的部分, 在盲肠处终止.
  6. 盲肠
    1. 盲肠是一种绿色的颜色, 非常柔软。
    2. 它位于小肠和大肠的交界处.
    3. 在盲肠中发生发酵, 因此器官穿刺会导致细菌的恶臭和污染.
  7. 大肠
    1. 大肠开始于盲肠, 并继续肛门。它很容易辨认, 因为粪便颗粒可以在小肠的流明内可视化.
    2. 安乐死后不应立即出现出血或变色的部位.
  8. 肠系膜
    1. 小而大的肠子被肠系膜固定在身体上, 这是一个含有血管、脂肪和淋巴结的膜。
    2. 在清除肠道之前, 应检查肿大的淋巴结和任何肿块.
  9. 胰腺
    1. 胰腺是一种弥漫的器官, 位于胃下面, 在十二指肠的第一个褶皱之间。这是一个浅黄褐色的灰色颜色和组成的多个小裂片不规则的边缘.
    2. 可能无法将胰脏移出一片.
    3. 如果要采集胰腺组织, 必须在切除肠道之前进行.
    4. 被识别为胰腺的组织必须小心地从周围的肠系膜组织中被戏弄.
  10. 移除肠道
    1. 肠道被移除作为一个片断, 从胃开始和延伸到肛门.
    2. 切开是通过大肠, 只是前面的肛门。整个肠道可以解除和任何膜的附件切断。肠道可以从肠系膜上移除, 切成部分, 并固定.
    3. 当将肠道的部分放置到含有其他器官的罐子中时, 必须将末端与肠道细菌的组织污染联系起来.
    4. 肠道的流明可以通过用小的、细尖的剪刀切割其长度来暴露。内部可以冲洗后暴露腔.
    5. 一些研究 m需要切除和冲洗部分肠, 而不是切开。通过将钝针固定在切除的组织的一端, 盐水或定影液可以被强制进入肠道以冲洗其内容.
  11. 肾脏
    1. 肾脏是配对的器官, 位于背部的肌肉。右肾高于左侧。老年动物的肾脏可能被脂肪堆积所包围, 使它们难以形象化.
    2. 它的大小和颜色大约是一个深芸豆, 它的表面应该是平滑的.
    3. 立即肾前是肾上腺, 出现作为一个小的, light-pink 结节.
    4. 取出肾脏, 用镊子将其隔离, 并在肾脏和输尿管之间切开.
    5. 肾脏有一个坚韧的外囊, 可能被剥离, 以更好地可视化的表面。沿长轴和另一肾脏横向切开一个肾脏。注意肾脏内的任何砂砾都可能表明存在晶体或矿床.
  12. 女性生殖系统
    1. 子宫是 Y 形结构。子宫的身体是短的与配对的角在左边和右边。角终止于输卵管和卵巢。在一个妊娠的女性, 角将是淡粉红色和薄。在怀孕的动物中, 牛角会显得较暗, 并有明显的血管在子宫角附近运行。随着妊娠的进行, 子宫角将有一个和 #34; 串珍珠和 #34; 外观。发育中的胚胎会在喇叭中形成一个苍白的区域, 当它们发育时, 子宫会伸展, 组织会变得更薄, 从而使视觉化.
    2. 卵巢将位于肾脏的正下方。他们将有一个粗糙的表面, 由于不同的成熟阶段的卵泡。囊卵巢会有充满液体的囊泡。这种液体可以从稻草色到带下.
    3. 切除卵巢, 切断动脉附件前和输卵管向后。如果需要, 卵巢可以取出附着在子宫上.
    4. 切除子宫时, 必须轻轻地抓住和牵引, 才能在宫颈下切割。切开后, 提起子宫的身体和角, 打破体腔内的任何附着物.
  13. 男性生殖系统
    1. 精囊是白色, 公羊和 #39; s 角状, 配对结构位于前膀胱和附着在中线上的前列腺。大小不同, 但它们可以像盲肠一样大.
    2. 前列腺位于膀胱周围的基地。这种组织通常是浅褐色的。在较年长的动物中, 它可能表现出增生。较年长的动物通常会有更多的体脂, 可能会使前列腺的可视化变得困难.
    3. 睾丸配对, 位于阴囊。表面应光滑, 表面可见细小的血管。小鼠和大鼠缺乏腹股沟环或括约肌, 这使得动物可以将睾丸取出进入腹腔。要形象化这些, 抓住腹部脂肪垫位于下腹部并且拉扯他们前。这将从阴囊中取出睾丸, 以允许检查。附睾是沿着睾丸的下缘和锥形向顶端。输精管附着在附睾末端, 并带回前列腺.
    4. 睾丸切除可以通过切割阴囊上的附着物和切割输精管来完成.
    5. 除去前列腺和精囊需要抓住膀胱的底部和解除, 同时切断前列腺下的附件.

4。胸腔

  1. 肺部
    1. 肺部通常是一个明亮的粉红色的颜色, 和海绵状的纹理与光滑的表面。然而, 安乐死与 CO 2 可能导致肺出血, 导致深红色斑点, 可以覆盖整个肺部表面.
    1. 心脏是暗红色与四室。心室肌肉发达, 触感牢固。心房是深红色的颜色和坐在心室顶部。他们的肌肉少得多, 显得弛缓.
    2. 心包囊是心脏周围的一层薄薄的半透明膜.
  2. 胸腺
    1. 胸腺位于心脏的前处, 并坐在气管上。质地应该平滑.
    2. 在幼小的动物中, 它看起来像褐色, 带有脂肪的质感.
    3. 较年长的动物将有脂肪组织渗入胸腺, 扩大它并给胸腺一个白色的颜色.
  3. 气管
    1. 气管从会厌延伸到支气管的分岔。它是一个脊状, 软骨管, 是灵活的.
    2. 它应该是明确的, 没有任何液体或泡沫液体的流明。安乐死与 CO 2 可以导致液体 (serosanguinous 和/或泡沫) 积聚在肺部和气管由于出血.
  4. 食道
    1. 食道从口腔延伸到胃部。它是一个非常薄的管, 直接位于气管和心脏后, 并通过横膈膜的胃.
    2. 食道很难切除, 因为它很容易撕裂, 即使组织是有弹性的。切除食管是最容易做的, 解剖它远离气管后, 心脏和肺部切除.
  5. 移除胸腔器官
    1. 心脏和肺部最容易被一起移除.
    2. 将镊子垂直于气管, 牢牢地抓住气管, 就在胸腺上方.
    3. 使用剪刀, 将切口垂直于钳前的气管。这伤口应该切断气管和食道.
    4. 不松开气管的抓地力, 将气管抬高尾, 并将肺部的任何附着物剪断到肋骨笼中的脊柱表面.
    5. 食管可能需要切割, 以能够解除心脏和肺部无胸腔.
    6. 心脏从身体中取出后, 可以用生理盐水冲洗, 去除残余血液和血块, 也可以通过主动脉填充固定剂.
    7. 一旦肺切除, 就会用固定剂充气。结扎被松散地放置在气管周围。针附着在含有所选择的固定剂的注射器上, 被穿线到气管的腔内。结扎针周围收紧, 并注射固定剂, 直到肺部充气。拔除针头后, 绷带会收紧以防止渗漏.
  6. 口腔腔
      1. 啮齿动物的舌头是平滑的.
      2. 检查表面是否有病变, 包括下侧.
      3. 舌头很少被收获, 除了专门的调查, 如口腔癌研究.
      4. 移除舌, 将口腔两侧的颊面切开至颞下颌关节.
      5. 脱臼下颌骨, 并反映上颌, 以揭示会厌和舌头的基础.
      6. 使用镊子伸出舌头, 将尾下的附着物切到舌头的底部.
      7. 保持牵引, 在舌头的底部水平地切开到 f它来自口腔.
    1. 齿
      1. 大鼠齿由三颗臼齿和一颗门牙组成, 每个象限由无牙纵。它们只在唇面上被搪瓷覆盖;在牙齿的内部表面是牙本质.
      2. 大鼠的牙齿通常是黄色/橙色的颜色。这种颜色是最明显的门牙珐琅, 是由于存在一个含铁色素。颜色从出生后21天开始, 随着年龄的增长而加深.
      3. 检查牙齿是否过度生长或错牙.

5。头

  1. 眼睛
    1. 眼睛的大小应该相等, 并且清除渗出物。结膜应该光滑.
    2. 移除眼睛, 对眼睛周围的皮肤施加压力向后和向下, 凸出眼睛从轨道。使用一个弯曲尖端钳, 隔离地球, 并削减在插座中保持它的附件.
    1. 观察耳朵以进行识别。一些研究人员要求将耳标记包括在器官样本中以确认动物的身份.
    2. 耳道被检查为任何病变, 肿块, 或渗出物.
    1. 鼻子被观察为液体或渗出物.
    2. 鼻孔应该是对称和明确的.

尸检-意味着器官的死后检查-和组织的收获是许多实验室实验的组成部分, 它依赖于最终收集的数据收集时间点。对收获器官的分析。因此, 重要的是要学习正确的诊断尸检和组织采收技术, 因为该程序可以大大影响样品的质量收集。本演示将对实验室动物的腹部、生殖器和胸器官的解剖和提取方法进行回顾.

在开始此过程之前, 应启动包含动物完整历史记录的窗体: 动物识别号、性别、住房条件、出生日期、死亡日期、研究协议号和原则调查员的名字.

下一步, 准备解剖区域。放置一个长凳覆盖物, 解剖托盘, 仪器指定尸检, 其中包括剪刀, 镊子, 无菌手术刀刀片, 骨刀, 钝探针, 小刮刀和吸收缝合材料。组织学检查器官和组织的收获要求在固定液中保存组织。除非另有规定, 最常用的固定剂是10% 中性缓冲福尔马林。请注意, 组织样本的厚度应为 0.5-1 厘米, 以使定影液有足够的穿透力。固定防止腐烂、自和腐烂;停止任何正在进行的生物化学反应;并可提高经处理的组织的机械强度和稳定性.

动物安乐死的方法也会影响样品的质量。对小鼠和大鼠来说, 最常用的安乐死方法是过量使用二氧化碳气体。动物在他们的家庭笼子被留下, 被安置, 入房间, 并且 CO2 逐渐被介绍入房间以10-30% 的位移率房间容量/分钟。这使动物失去知觉之前, 疼痛的感觉是与受活化的碳酸。在发生呼吸骤停和动物死亡之前, 在枪膛内保持流动.

在安乐死之后, 首先通过目测检查胴体的损伤和肿块, 过度的牙齿生长, 或在口腔、鼻孔、耳朵上的毛发染色来进行初步的外部检查,眼睛和肛门和生殖器的开口。如果有必要, 做一个磁带测试, 皮肤刮擦, 和毛皮检查, 以检测外部寄生虫。一旦外部检查完成, 是时候开始尸检, 从腹腔开始。请注意, 在移除任何组织样本之前, 观察该器官 原位 是很重要的.

开始切除皮肤, 在女性的骨盆前放置一个小切口, 男性的包皮以上。然后, 使用钝剥离技术, 松弛皮肤的筋膜和肌肉。钝夹层是解剖解剖中的一种技术, 其中组织被分离, 底层结构在没有切割的情况下暴露出来。在这种技术中, 剪刀被用来分散组织, 而不是把它们分开。闭合的小贴士被推入组织, 然后在自然平面上打开以分裂组织。这一过程需要耐心和微妙的触觉, 因为组织的伸展会对邻近的器官和血管造成损害。然后将切口延伸至下巴。下一步, 横切口前侧的后肢和前肢后部, 并使用钝性解剖暴露颈部和胸部。应格外小心, 以避免颈部颈动脉破裂.

在女性中, 皮肤切除, 观察乳房组织从胸骨顶部的柄到生殖器开放的腹面表面; 侧向两边伸展。哺乳或怀孕的女性将增加乳房组织容积和牛奶可能存在。切除乳腺, 用钳子抓住组织的边缘, 用钝的解剖来松开皮肤的附着物。一旦腺体被分离, 它可以放在一个固定的解决方案, 随后的组织学分析.

在这个阶段, 你可以观察到下颌涎腺, 它们是配对的, 位于下颌骨--沿着颈部延伸至柄胸骨。切除这些腺体需要钝解剖和额外的护理, 当工作在颈部地区, 以防止血管破裂。一旦从部下的肌肉中解脱出来, 抬起腺体并切断任何残留的附着物。腺体至少需要一个切口, 以使定影液的穿透.

此外, 您可以看到气管, 它从会厌延伸到支气管的分岔。它是一个脊状, 软骨管, 是灵活的。虽然正常情况下, 安乐死与 CO2 可能导致体液积聚在肺部和气管, 看起来像一个泡沫清澈的液体。皮下脂肪也会出现在这个地区。评估它的数量和沉积。一个肥胖的动物可能有大量的脂肪与皮肤的感觉加厚.

在打开体腔前, 观察腹部、肋间和裸露的颈部肌肉, 以及四肢是否有增厚、肿块或变色。要打开体腔, 首先在裸露的腹部肌肉的最尾部点做一个小的横切口。然后将肌肉从器官中抬起, 沿着 式阿尔巴 切割到剑。接下来, 从中线向两侧的后肢侧解剖肌肉。最后, 沿两侧肋骨的曲线切割。一旦体腔被打开, 评估腹部脂肪的数量和积累。一个健康的动物将有腹部脂肪垫和一些脂肪沿背部表面的腔。观察该组织的颜色并注意任何异常.

现在我们准备开始收获腹部器官。首先找到脾脏, 它是深红色的, 沿着胃的下部曲率。它应该是规则的形状, 并与一个稍微磨砂表面。要删除脾抬起器官, 将附件剪断到胃部.

胃位于食道的远端。它似乎是两个色调, 区分肌肉和腺体部分。感觉到食物的存在。空腹应注意, 因为它可以表明疾病。做 切胃, 因为内容会污染腹腔内的器官.

小肠与胃上部和下部相连。小肠有三不同的部分。首先是十二指肠--从胃后部括约肌到空肠开始处较短的部分。胆管进入这里, 胰腺组织更牢固地附着在小肠的这部分。空肠是中心部分。Peyer 和 #39 的斑块, 是由淋巴组织组成的小椭圆形区域, 可以在空肠和回肠表面观察到。回肠是小肠中最长的部分, 位于小肠的交界处, 在盲肠处终止。盲肠的颜色呈绿色, 非常柔软.

大肠继续从盲肠到肛门。这是容易识别的粪便丸可以在这个结构的流明内可视化。小肠和大肠被肠系膜固定在身体上, 这是一个含有血管、脂肪和淋巴结的膜。在切除肠道之前, 应检查肿大的淋巴结和任何肿块。胰腺是一种弥漫的器官, 位于胃后部。这是一个浅黄褐色的灰色颜色和组成的多个小裂片不规则的边缘。收获胰腺, 抓住器官, 轻轻地从周围的肠系膜组织中逗弄它。这必须在切除肠道之前完成.

将整个通道从胃部开始, 延伸到肛门, 首先在直肠处结扎, 然后通过肛门前部的大肠切开。接下来, 在食道和胃的交界处放置一个结扎, 随后整个肠道可以被解除, 任何膜状附着物被切断。整件事可以从肠系膜上分离出来, 切成部分并固定.

肾脏是配对的器官, 位于背部的肌肉。它们应该是一个黑色的芸豆的大小和颜色, 并有一个光滑的表面。紧接在肾脏前的是肾上腺出现作为一个小浅粉红色的结节.

取出肾脏, 用镊子将其隔离, 并在器官和输尿管之间切开。坚硬的外层可以被剥去, 检查表面。沿着长轴和另一条横的方向, 把一个肾脏切成两半。任何砂砾内可能表明存在的晶体或矿床。最后, 去除肝脏, 这是一个深红色的颜色和它的边缘应该是光滑的, 一个清脆的优势。处理肝脏时应注意, 因为它是易碎的组织。对器官完整性的任何破坏都会导致血液渗入体腔, 并使其他器官模糊不清.

移除肝脏, 首先轻轻地将耳垂从隔膜上反射出来, 然后通过结构前的血管进行切割。接下来, 将肝脏反射到横膈膜上, 抓住中央连接所有耳垂的纤维结点。最后, 提起器官, 同时切断所有的肠道和胃的附件.

雌性生殖系统由子宫和卵巢组成。子宫是一个短的 Y 形结构, 角在两个方向延伸。角终止于输卵管和卵巢--位于肾脏的正下方。卵巢将有一个粗糙的表面, 由于不同的成熟阶段的卵泡.

切除卵巢, 切断动脉附件前和输卵管向后。取出子宫, 轻轻地抓住并切开宫颈以下。切开后, 提起子宫的身体和角, 打破体腔内的任何附着物.

在雄性中, 你也可以观察到位于包皮前部的包皮腺体。它们看起来很大, 呈灰色至淡黄色, 呈泡沫状。这些腺体的切除和固定与颌下腺相似。此外, 雄性生殖系统由精囊、前列腺和睾丸组成。精囊是白色的, #34; 公羊和 #39; s 角形和 #34; 结构位于膀胱前部, 附着在前列腺的中线上.

前列腺--一般是浅褐色和 #160; 颜色--位于底部的膀胱周围。为了使睾丸形象化, 抓住位于下腹部的腹部脂肪垫, 把它们前。这将从阴囊中取出睾丸, 以允许检查。表面应光滑, 表面可见良好的血管.

附睾沿睾丸下部边缘向顶端锥形。输精管附着在附睾末端, 并带回前列腺。切除睾丸, 切开阴囊上的附着物, 割断输精管。为了除去前列腺和精囊, 抓住膀胱的底部和解除前列腺下方的附着物.

移动到胸腔内的器官。为了暴露这些重要的结构, 把隔膜从附着物移到肋骨上。接下来, 穿过肋骨两侧侧向柄胸骨的顶部, 然后反射骨骼 cranially, 以可视化胸部器官.

肺部通常呈鲜艳的粉红色, 表面光滑, 质地柔软。然而, 安乐死与 CO2 可导致肺部出血, 导致深红色斑点, 可以覆盖整个肺部表面.

心脏是深红色的, 心室是肌肉发达的, 感觉牢固的触摸。心房是深红色的颜色和坐在心室顶部。他们是少得多肌肉和显得弛缓性。一个叫做心包囊的薄薄的半透明膜围绕着心脏.

胸腺位于心脏的前部, 并坐在气管上。质地应该平滑。你可以看到气管如前所述, 食道是一个非常薄的管, 直接位于气管和心脏后部, 并通过膈胃.

取出胸腔内的器官, 首先抓住胸腺上方的气管, 并在钳前进行垂直切口。在保持抓地的同时, 将气管向上尾, 并将肺部的任何附着物剪断到肋骨笼中的脊柱表面。食管可能需要切割, 以能够解除心脏和肺部的胸部腔

后, 心脏被删除的身体, 冲洗它与生理盐水, 以消除残余的血液和血块, 或填补它与固定通过主动脉。一旦肺被切除, 就会在气管周围放置一个松散的结扎。接着, 将针附着在装有固定剂的注射器上, 插入气管的腔内, 并收紧结扎。然后注射固定剂直到肺部充气。最后, 取下针, 再拧紧绷带以防止渗漏.

关于啮齿类动物尸检和组织收获的知识的呼吸, 让 & #39; 看一些e 当前实验室实验涉及这些程序.

诊断尸检是肿瘤转移实验的常见终点。在这个例子中, 研究者将癌细胞注入啮齿动物和 #39; 然后, 三十到六十天后, 他们进行了尸检, 这显示了明显的肝转移.

组织提取通常伴随着组织学分析, 这有助于研究样品的显微解剖。根据组织的固定、嵌入、切片和染色的协议, 研究者能够研究这些器官的显微结构, 并揭示在原子水平上的基因或药理干预的作用.

有时研究人员移除组织以研究生理过程, 如血管生成。在这里, 实验者形象化老鼠和 #39 的肠系膜组织来刺激血管生长。然后, 他们收获了几个部分, 并处理他们的标记, 染色细胞的任何血管, 研究的细胞动力学参与血管网络的增长.

您和 #39; 我刚刚看了朱庇特和 #39 的视频, 详述了实验室动物诊断尸检和组织收获的步骤。使用适当的器官去除和保存技术是重要的, 因此提取过程对收集的数据的解释没有影响。一如既往, 感谢收看!

A subscription to JoVE is required to view this article.
You will only be able to see the first 20 seconds.

RECOMMEND JoVE