Summary
כאן אנו מתארים הליך ניתוחי לב להשתיל רקמה מהונדסת העליות והחדרים (AV), חריץ של עכברוש לואיס מבוגר.
Abstract
ניתוח מכרסמים לעתים קרובות מרכיב חשוב בהערכת התועלת של רקמות מהונדסות. מגוון רחב של ניתוחים ניתן לבצע חולדות מעבדה או עכברים משותפים אלה לעתים קרובות לשמש שלב ביניים בין העליונה הספסל ניסויים ניסויים בבעלי חיים גדולים או בניסויים בבני אדם. בהתחשב בכך מכרסמים לספק מערכת מודל הוקמה, העלות האפקטיבית, ו-פיזיולוגית רלוונטי אשר לבדוק שילובים הרומן של חומרים פיגומים התאים, הם מתאימים במיוחד ללימודי הנדסה רקמות וכלי דם. נכון להיום, אנו מתארים הליך ניתוחי לב פתוח להשתיל רקמות מהונדסות המכיל ובתאים myogenic בתוך החדרים והעליות (AV) חריץ של לב חולדה. שתלים אלו נועדו ליצור צינור חשמל בין אטריום הנכון החדר הימני עם המטרה הסופית של מתן טיפול חלופי השתלת קוצב לב קונבנציונאלי מטופלים ילדים עם לחסום לב שלם [1]. רקמות מהונדסות הוא מושתל ה-AV-Groove באמצעות פתיחת בית החזה. לענייננו, חולדות לואיס מורדמים ומאוורר פולשני כדי לשמור על לחץ חיובי בדרכי הנשימה במהלך ההליך הכירורגי סטרילית. הגישה אל הלב מבוצע על ידי פתיחת בית החזה זכות דרך חתך לרוחב antero-ב 5
Protocol
חלק 1: אינדוקציה של הרדמה כללית
- חולדה 200-250 גרם לואיס הוא הרדים עם קטמין מ"ג / ק"ג 50 ו -4 מ"ג / ק"ג Xylazine מוזרק עם מחט 30 G לחלל intraperitoneal. הבטן העליונה והחזה הנכונים מקוטע להסיר שיער באתר חתך לנקות ביסודיות עם אתנול 70% ולאחר מכן פתרון povidone-יוד חיטוי מקומי.
- בעל חיים הוא מחובר לצינורות endotracheally באמצעות קטטר תוך ורידי 16 G מחובר למכונת הנשמה חיה קטנה (Apparatus הרווארד). הנשמה מחוברת מאדה לספק 0.5% עד 1.0 Isoflurane (Baxter) מעורבב עם חמצן 100% כדי לשמור על הרדמה כללית. קצב הנשימה ונפח גאות מותאם על פי משקל הגוף של החולדה. חיה ממוקם על כרית חימום (הוד Thermo-Pad), כדי לשמור על חום הגוף במהלך ההליך הכירורגי.
- כדי לעקוב אחר קצב הלב ואת הרוויה חמצן בכל ההליך הכירורגי מכשיר pulsoximeter (Nellcor) נחתך על אחת הגפיים בחזרה.
חלק 2: פתיחת בית החזה ואת השתלת רקמות מהונדסות
- האתר כירורגית מוכן עם כורכת כירורגי סטרילי כי הוא החזיק במקום מלחציים עם מגבת.
- מבצעים חתך מן antero-לרוחב הקיר לרוחב של החזה הימני, ממש מעל המרחב צלעי ה 5. החלל הפנימי של החזה הוא לגשת בחלל צלעי 5 וה מפשק קטן (Roboz) ממוקמת על מנת למקסם את התצוגה.
- קרום הלב היא לחתוך ממש מעל התוספתן של אטריום הנכון החדר הימני מהבסיס לכיוון הקודקוד של הלב. לאחר מכן, חריץ ה-AV מזוהה ואת השכבה epicardial סמוך למשולש aorto-atrio-חדרית היא הקניטה בעדינות מזה.
- 7-0 Prolene תפר (Ethicon) ממוקם דרך הכתף הבסיס של החדר הימני. 2 x 2 x 2 מ"מ הוא חתיכת גזור מן לבנות את רקמות מהונדסות וממוקמים בתוך חריץ ה-AV וקשר מעדנות עם תפר Prolene.
- בתחום כירורגית לוודא שהדימום ושני תפרים Vicryl 4-0 (Ethicon) ממוקמים בין העליון מרחב צלעי נמוך סגירת כלוב הצלעות.
- Pneumothorax נראית לעין הוא נחפר על ידי הרחבת הריאות בדרך של מכונת ההנשמה.
- קיר החזה סגור אז בשכבות.
חלק 3: שחזור
- בעוד החיה מתאושש מהניתוח, האתר הוא חתך שחדר עם 5 מ"ל 0.25% Bupivacaine [2].
- החיה היא extubated הבאים הגמילה ממכונת ההנשמה והוא חזר כלוב עם מצע טרי פעם אחת הוא ער לחלוטין sternal. עכברוש ניתנת לאחר מכן 0.01 מ"ג / ק"ג עצירות כאבים תת עורי כל 12 שעות במשך 3 ימים.
חלק 4: תוצאות נציג
אם מבוצעת כראוי, תיאר כירורגי של השתלת רקמות מהונדסות ב AV-חריץ של הלב (איור 1) תוצאות התאוששות יותר מ 90% של בעלי החיים.
באיור 1. תצלום של הלב החשוף מראה את האתר של השתלת רקמות מהונדסות.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
לקבלת תוצאה חיובית כדי ההליך הכירורגי, חשוב שצריך לצנרר ו פולשני לאוורר את החיה. אם הוא עכברוש מסומם בפשטות מותר לנשום באופן ספונטני, הריאות הן בהכרח התמוטטות בעוד החזה נפתח עקב הצדר נפוץ במכרסמים. לפני שסגר את החזה, pneumothorax כל צריך לחסל לחלוטין הריאות מלא מורחבת להפחית atelectasis. אחרת, הגמילה ממכונת ההנשמה וההחלמה יהיו מוצלחים ובעלי חיים יהפוך hypercapnic ו / או hypoxic [3]. הסרה של רקמת epicardial בתוך חריץ ה-AV הוא מסוכנים ואת עלולה לגרום לדימום ורידי מסיבי מן העלייה הימנית בשל האופי העדין של הקיר עכברוש פרוזדורים. בעוד הנחת תפר Prolene בשלב 2.4, הכרחי להיות מודעים ולהימנע הענפים כלילית epicardial. חיה יש לשמור על משטח חם כותרת במהלך תקופת ההחלמה או טמפרטורת הגוף שלה ייפול בפתאומיות.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
ניסויים בבעלי חיים בוצעו בהתאם להנחיות והתקנות שנקבעו על ידי טיפול בבעלי חיים מוסדיים ועדת השתמש ב מבית החולים לילדים בבוסטון זה.
Acknowledgments
עבודה זו נתמכת על ידי מענקי מחקר מן המכון הלאומי לבריאות (HL068915; HL088206) ותרומות לקרן הולכה לב בבית החולים לילדים בבוסטון.
Materials
| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| 7x4 Thermo Pad 4/box | Equipment | Hood Thermo-Pad, Summerland, BC Canada | MODEL 704R | |
| Inspira ASV Ventilator | Equipment | Harvard Apparatus | ||
| Handheld Pulse Oximeter | Equipment | Nellcor | N20PA | |
| Retractor | Equipment | Roboz Surgical Instruments Co. | RS-6514 | |
| Isoflurane (Forane) | Reagent | Baxter Internationl Inc. | 1001936040 | |
| Ketamine HCl | Reagent | Hospira Inc. | RL-0065 | |
| Xylazine (AnaSed) | Reagent | Lloyd, Inc. | LB15705A | |
| Buprenorphine HCL Inject | Reagent | Bedford Laboratories | Div-BUP-P00 | |
| Bupivacaine 0.25% | Reagent | Hospira Inc. |
References
- Choi, Y. H. Cardiac conduction through engineered tissue. Am J Pathol. 169, 72-85 (2006).
- Shin, J. W. Low-dose systemic bupivacaine prevents the development of allodynia after thoracotomy in rats. Anesth Analg. 107, 1587-1591 (2008).
- Horstick, G. Surgical procedure affects physiological parameters in rat myocardial ischemia: need for mechanical ventilation. Am J Physiol. 276, H472-H479 (1999).
