Brain-Banking: Making the Most Ihrer Forschung Proben
Summary
Brain-Banking und systematische Entnahme von biologischem Material bildet die Grundlage für unvoreingenommene Stereologie und maximiert das Potenzial von Daten aus jeder Probe erhalten.
Abstract
Unvoreingenommene Stereologie ist eine Methode zur genauen und effizienten Schätzung der insgesamt Neuron-Nummer (oder anderen Zelltyp) in einem bestimmten Bereich von Interesse<sup> 1</sup>. Um dieses Ziel zu erreichen 6-10 systematische Abschnitte sollten untersucht werden, die den gesamten Aufbau. Typischerweise geht mit der Verarbeitung 1 / 5 Abschnitte, die eine erhebliche Menge an Material unbearbeitet lässt. Um das Material zu maximieren, schlagen wir ein kostengünstiges Verfahren zur Konservierung von fixiertem Gewebe als Teil einer langfristigen Lagerung Forschungsplan. Als Gewebe wird in Scheiben geschnitten und für den gewünschten Fleck oder Antikörper, alternative Abschnitte verarbeitet werden, sollten systematisch in Antigen platziert werden erhalten bei -20 ° C für die zukünftige Verarbeitung. Mit 24-Well-Platten, können Abschnitte, um für den späteren Abruf gestellt werden. Mit dieser Methode kann Gewebe gespeichert und verarbeitet werden für die Immunhistochemie im Laufe der Jahre.
Protocol
Discussion
Systematische Stichproben ist eine kostengünstige Methode soll Forschungsmaterial zu maximieren. Diese Strategie der Probenahme ist so konzipiert, mit dem geltenden nationalen unvoreingenommene Stereologie, dass die systematische Stichproben in der gesamten Region erfordert entsprechen. Es ist wichtig, dass die Reihenfolge der Abschnitte für jede Serie beibehalten wird. In unserem Labor haben wir erfolgreich diese Methode für Banken sowohl Hamster und nicht-menschlichen Primaten Hirnschnitten verwendet. Bisher haben …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Die Autoren bedanken sich bei Ikiel Ptito für seine weitere fachliche Unterstützung danken.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Ethylene glycol | Fisher | E178-4 | ||
| Polyvinyl pyrrolidone | Fisher | BP431-500 | ||
| Thermal Scientific Embedding Medium | Fisher |
References
- West, M., Slomianka, L., Gundersen, H. Unbiased stereological estimation of the total number of neurons in the subdivisions of the rat hippocampus using the optical fractionator. Aat Rec. 231, 482-497 (1991).
- Burke, M. W., Zangenehpour, S., Boire, D., Ptito, M. Dissecting the Non-human Primate Brain in Stereotaxic Space. J Vis Exp. , (2009).
