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Biology

A Novel RFP Reporter in der Visualisierung des Eye Imaginalscheibe in Aid Drosophila doi: 10.3791/1617 Published: December 15, 2009

Summary

Wir beschreiben ein neuartiges rot fluoreszierendes Protein (RFP) Reporter, der speziell in den Ausdruck

Abstract

Die

Protocol

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Dissektion der Drosophila Auge Imaginalscheibe ist einfach, aber kann die Zeit zu meistern. Die entscheidenden Schritte sind die Identifikation des Auges Disc und ihre dissection vom larvalen Gehirn. Bezeichnung des Auges Disc wird dadurch erleichtert, mit dem Eye-RFP line hier beschrieben. Mögliche Änderungen werden dem Fühlerglied Disc oder der peripodial Membran zu entfernen, oder zur optischen Lappen an der PR Axone in das Gehirn zu visualisieren lassen.

Das Auge-RFP Linie wurde durch Klonierung eines neuen Eye-spezifischen Enhancer-Element aus der zweiten Intron des spitzen P2-Gen 2 in die pred H-Stinger-Enhancer-Reporter-Vektor 3 erzeugt und mit dieser transgene Fliegen zu schaffen. Das Auge-RFP-Reporter ist in eine spezifische Untergruppe von PRs und in Kegel-Zellen (Abbildung 2). Ausgedrückt. Es kann daher festgestellt werden, ob ein Gen von Interesse in diesen Zelltypen exprimiert werden. Das Auge-RFP Linie ist auf Anfrage erhältlich.

Die Entwicklung von Drosophila Auge ist ein leistungsfähiges Modell für die Erforschung der Gene und molekularen Mechanismen steuern PR Neurogenese 1. Die Methodik und die Reporter können die hier beschriebenen verwendet werden, um das Verständnis dieses Prozesses weiter.

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Acknowledgments

Diese Arbeit wurde vom Kings College London und der Royal Society finanziert.

References

  1. Doroquez, D. B., Rebay, I. Crit Rev Biochem Mol Biol. 41, (6), 339-339 (2006).
  2. Kaul, A. K., Craig, G. M., McNeill, H., Bateman, J. M. Forthcoming.
  3. Barolo, S., Castro, B., Posakony, J. W. Biotechniques. 36, (3), 436-436 (2004).
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Kaul, A. K., Bateman, J. M. A Novel RFP Reporter to Aid in the Visualization of the Eye Imaginal Disc in Drosophila. J. Vis. Exp. (34), e1617, doi:10.3791/1617 (2009).More

Kaul, A. K., Bateman, J. M. A Novel RFP Reporter to Aid in the Visualization of the Eye Imaginal Disc in Drosophila. J. Vis. Exp. (34), e1617, doi:10.3791/1617 (2009).

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