此过程说明如何使用基因脉冲MXcell电系统,以迅速和容易地识别小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)或其他主要细胞的最佳电条件。故障排除注意事项还讨论了相关的视频。
这是越来越明显,电是最有效的方法,引入的原代细胞的质粒DNA或siRNA。基因脉冲MXcell电系统和基因脉冲电击缓冲液(BIO – RAD)专门开发的,很容易转染哺乳动物细胞和难以转染的细胞,如小学和干细胞,的核酸。我们将演示如何执行一个简单的实验,以迅速确定最佳电条件。我们将演示如何通过电条件的范围,这样一个实验可以在同一时间进行优化执行运行中的几个样本。我们还将展示最佳条件,确定如何使用96孔电板可以使用标准电试管,促进电板开关,电试管,同时保持相同的电效率。在录像中,我们还将讨论一些可能导致电击实验的成功或失败的的关键因素。
此视频文章演示了如何使用MXcell电系统可以轻松地找到MEFs或其他主要细胞株的最佳电条件。 96孔板格式允许对许多重复实验或优化的条件下同时进行,这可以消除许多不同的实验需要。在进行此过程中,人们应该记住使用健康细胞后尽快隔离,尽可能使用电条件,匹配电缓冲区。
The authors have nothing to disclose.