इस प्रक्रिया से पता चलता है कि किस तरह जीन Pulser MXcell electroporation प्रणाली का उपयोग करने के लिए तेजी से और आसानी से माउस भ्रूणीय (MEFs) fibroblasts या अन्य प्राथमिक कोशिकाओं के लिए सबसे अच्छा electroporation शर्तों की पहचान है. समस्या निवारण के लिए विचारणीय बातें भी जुड़े वीडियो में चर्चा कर रहे हैं.
यह तेजी से स्पष्ट होता जा रहा है कि electroporation प्राथमिक कोशिकाओं में डीएनए प्लाज्मिड या siRNA परिचय का सबसे प्रभावी तरीका है. जीन Pulser MXcell electroporation प्रणाली और जीन Pulser electroporation बफर (जैव रेड) विशेष रूप से आसानी से स्तनधारी कोशिकाओं और प्राथमिक और स्टेम कोशिकाओं के रूप में मुश्किल – transfect कोशिकाओं में न्यूक्लिक एसिड transfect करने के लिए विकसित किए गए. हम प्रदर्शन करेंगे कैसे प्रदर्शन करने के लिए एक सरल प्रयोग करने के लिए जल्दी से सर्वोत्तम electroporation शर्तों पहचान. हम कैसे इतना है कि एक प्रयोग के अनुकूलन के रूप में किया जाता है एक ही समय पर आयोजित किया जा सकता electroporation स्थितियों की एक श्रृंखला के माध्यम से कई नमूने को चलाने के लिए प्रदर्शन करेंगे. हम भी दिखा कैसे इष्टतम स्थितियों 96 अच्छी तरह से electroporation प्लेटों का उपयोग पहचान मानक electroporation cuvettes के साथ इस्तेमाल किया जा सकता है, electroporation cuvettes electroporation प्लेटों से स्विच की सुविधा जबकि एक ही electroporation क्षमता को बनाए रखने जाएगा. वीडियो में, हम भी महत्वपूर्ण कारक है कि electroporation प्रयोगों की सफलता या विफलता के लिए नेतृत्व कर सकते हैं यह कुछ चर्चा करेंगे.
यह वीडियो लेख दर्शाता है कि कैसे MXcell electroporation प्रणाली का उपयोग करने के लिए आसानी MEFs या अन्य प्राथमिक कोशिका लाइनों के लिए इष्टतम electroporation शर्तों की पहचान. थाली 96 अच्छी तरह प्रारूप की अनुमति देता है के लिए प्रयोगात्मक या अनुकूलन के लिए एक साथ प्रदर्शन किया जा स्थितियों, जो कई अलग प्रयोगों के लिए आवश्यकता को समाप्त कर सकते हैं के कई replicates. हालांकि इस प्रक्रिया को ले जाने, एक के लिए संभव के रूप में अलगाव के बाद के रूप में जल्द ही स्वस्थ कोशिकाओं का उपयोग करने के लिए और electroporation की स्थिति है कि electroporation बफर करने के लिए मिलान कर रहे हैं का उपयोग याद रखना चाहिए.
The authors have nothing to disclose.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
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Gene Pulser® Electroporation Buffer | Bio-Rad Laboratories, Inc. | 165-2676 | ||
Gene Pulser MXcell™ Electroporation System | Bio-Rad Laboratories, Inc. | 165-2670 | ||
Gene Pulser MXcell™ ShockPod™ Cuvette Chamber | Bio-Rad Laboratories, Inc. | 165-2673 | ||
Gene Pulser MXcell™ Electroporation System With ShockPod™ Cuvette Chamber | Bio-Rad Laboratories, Inc. | 165-2674 |