يصف هذا البروتوكول إجراء تشريح لتحديد وأعضاء من الزرد الكبار.
على مدى السنوات ال 20 الماضية ، أصبح الزرد كائن نموذج قوية لفهم تطور الفقاريات والمرض. على الرغم من التحليل التجريبي للجنين واليرقة واسعة النطاق ، وقد وثقت التشكل جيدا ، وصفا للتشريح الزرد الكبار والدراسات لتنمية الهياكل الكبار وأجهزتها ، وجنبا إلى جنب مع تقنيات العمل مع الكبار مفتقدة. أجهزة اليرقة تخضع لتغييرات كبيرة في بنيتها الشاملة ، مورفولوجيا ، وموقعها التشريحي اليرقات خلال الانتقال إلى الكبار. خارجيا ، ويرقة شفافة تتميز به من تطور نمط أخلاقي الصباغ شريطية وزعانف الحوض مقترن ، بينما داخليا ، والخضوع لأجهزة النمو الهائل والتجديد. إضافة إلى ذلك ، منشم الغدد التناسلية إما ثنائي المكنة تطور الى الخصية أو المبيض. ويحدد هذا البروتوكول العديد من أجهزة الكبار ويوضح طرائق تشريح الدماغ والغدد التناسلية ، الجهاز الهضمي والقلب والكلى من الزرد الكبار. ويمكن استخدام أجهزة تشريح للتهجين في الموضع التقنيات الجزيئية المناعية ، الأنسجة ، استخراج الحمض النووي الريبي ، وتحليل البروتين ، وغيرها. وسيساعد ذلك البروتوكول في توسيع نطاق الدراسات في الزرد لتشمل إعادة تشكيل الأجهزة اليرقات ، والتشكل من أجهزة معينة للتحقيقات الكبار وغيرها من نظم الجهاز الكبار.
The authors have nothing to disclose.
وأيد هذا العمل من قبل المعاهد الوطنية للصحة منح R01 HD050901 إلى مليون متر مكعب وزمالة جمعية السرطان الاميركية بعد الدكتوراة # PF – 05 – 041 – 01 – DDC إلى TG.
Reagents:
0.2% Tricaine (ethyl 3-aminobenzoate)
200 mg tricaine powder
97.9 ml DD water
~1 ml 1 M Tris (pH 9)
Adjust pH to 7.0
Phosphate buffered saline (PBS)
4.0 g NaCl
0.1 g KCl
100 ml 0.1 M PO4 Buffer, pH 7.3
150 ml dH2O
Ringer’s solution
6.7g NaCl
0.2g KCl
0.2g CaCl2
1.2g Hepes
1 L H2O
Adjust pH to 7.2
Equipment:
Dissecting dish with mat
Electron Microscopy Sciences
catalog #70540
Vannas spring scissors
Fine Science Tools
catalog #91500-09