发光法小鼠肝肿瘤模型
Summary
本文介绍了一种发光小鼠原位肝肿瘤的诱导，和随后的分析局限于使用Live全身发光成像的肝肿瘤的生长过程。
Abstract
本视频介绍了建立在小鼠模型可随后由发光成像分析肝转移。诱发局部肝肿瘤肝肿瘤细胞是专门管理，通过动员健脾和分裂成两个，留下完好的血管蒂脾各占一半。组成性表达萤火虫荧光素酶基因（luc1）的Lewis肺癌细胞接种到一个半脾，这是10分钟后，然后切除。其他半脾保持不变，并返回到腹部。可以使用IVIS全身成像系统由生物发光成像监测肝肿瘤的生长。使用IVIS定量成像肿瘤的生长提供了可行的肿瘤细胞的精确定量。减少在发光信号，表明早期肿瘤细胞死亡和坏死由于药物治疗。允许调查转移性肿瘤细胞的生存和发展的内在机制，这种小鼠模型，可用于评价治疗肝转移。
Protocol
简介肝脏往往是转移性疾病的第一个站点，可能是唯一的站点多达30〜40％的晚期患者的蔓延。然而，用于治疗转移性肝癌肿瘤的选项很少，少数病人适合手术切除和化疗药物的只有23％的主要反应。在这一领域的临床前研究已经有限，没有一个合适的小鼠模型，研究离体肝疾病。我们描述一个分裂脾脏的方法，可以用来可靠地建立统一的，弥漫性肝转移。这一半的脾切除?…
Discussion
可靠的体内研究肝转移模型的发展是越来越重要的新的治疗策略的到来。对于新战略的准确研究，动物模型，应该是比较容易执行，形成的大量转移，涉及转移级联的所有步骤和记者有一个系统，使检测和计数的转移细胞的数量有限。分裂脾脏的方法，所述涉及一个单一的操作，是一个相对容易的技术学习，建立统一的肝 脏弥漫性转移的癌病和门静脉血栓形成1的风险非常低。…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
这项工作是通过科克南疗养院维多利亚大学医院乳腺基金，爱尔兰癌症协会（CRI07TAN）和科克癌症研究中心资助。 Lewis肺癌细胞株稳定表达荧光素酶是一个博士样的礼物，卡琳Jooss细胞Genesys公司，美国旧金山。
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| DMEM | Sigma-Aldrich | D6429 | ||
| PBS | Sigma-Aldrich | D8537 | ||
| Ketamine | Vetoquinol | |||
| Xylazine | Vetoquinol | |||
| Carprofen | Vetoquinol | |||
| Videne | Ecolab, Leeds, UK | |||
| Vicryl 4-0 suture | Ethicon | |||
| PDS 4-0 suture | Ethicon | |||
| Prolene 4-0 suture | Ethicon | |||
| Firefly Luciferin | Biosynth, Zurich, Switzerland |
References
- Kasuya, H. Mouse models of subcutaneous spleen reservoir for multiple portal venous injections to treat liver malignancies. Cancer Res. 65, 3823-3827 (2005).
- Liu, Q. Z., Tuo, C. W., Wang, B., Wu, B. Q., Zhang, Y. H. Liver metastasis models of human colorectal carcinoma established in nude mice by orthotopic transplantation and their biologic characteristic. World J Gastroenterol. 4, 409-411 (1998).
- Li, Z. Y., Ni, S., Yang, X., Kiviat, N., Lieber, A. Xenograft models for liver metastasis: Relationship between tumor morphology and adenovirus vector transduction. Mol Ther. 9, 650-657 (2004).
- Cashman, J. P. Immune gene therapy as a neoadjuvant to surgical excision to control metastatic cancers. Cancer Lett. , (2008).
Tags
MurineBioluminescentHepatic Tumour ModelLiver MetastasesMouse ModelBioluminescent ImagingTumour CellsLiver TumourSpleen MobilisationVascular PedicleLewis Lung Carcinoma CellsFirefly Luciferase GeneHemi-spleen ResectionAbdomenBioluminescence ImagingIVIS Whole Body Imaging SystemQuantitative ImagingViable Tumour CellsTumour Cell DeathNecrosisDrug TreatmentMetastatic Tumour-cell SurvivalGrowth MechanismsEvaluation Of Therapeutics
Cite This Article
Rajendran, S., Salwa, S., Gao, X., Tabirca, S., O’Hanlon, D., O’Sullivan, G. C., Tangney, M. Murine Bioluminescent Hepatic Tumour Model. J. Vis. Exp. (41), e1977, doi:10.3791/1977 (2010).