Bioluminescent modello murino epatica Tumori
Summary
Questo articolo descrive una procedura per l'induzione di tumori al fegato ortotopico bioluminescenti nei topi, e la successiva analisi di crescita del tumore confinato al fegato utilizzando vivere tutto l'imaging luminescenza corpo.
Abstract
Questo video descrive la creazione di metastasi del fegato in un modello murino che può essere successivamente analizzato da immagini bioluminescenti. Le cellule tumorali vengono somministrati appositamente per il fegato per indurre un tumore localizzato al fegato, attraverso la mobilitazione della milza e la divisione in due, lasciando intatto il peduncolo vascolare per ogni metà della milza. Lewis cellule di carcinoma del polmone che esprimono costitutivamente il gene della luciferasi lucciola (luc1) vengono inoculati in un emi-milza che viene poi asportato dopo 10 minuti. L'altro emi-milza viene lasciato integro e restituito all'addome. La crescita del tumore del fegato può essere monitorato l'imaging bioluminescenza utilizzando l'intero IVIS sistema di imaging del corpo. L'imaging quantitativo della crescita tumorale mediante IVIS fornisce quantificazione precisa delle cellule tumorali vitali. La morte delle cellule tumorali e la necrosi a causa di un trattamento farmacologico è indicato all'inizio di una riduzione del segnale bioluminescente. Questo modello del mouse permette di indagare i meccanismi alla base del tumore metastatico delle cellule di sopravvivenza e di crescita e può essere utilizzato per la valutazione delle terapie delle metastasi epatiche.
Protocol
Discussion
Lo sviluppo di affidabili modelli in vivo per lo studio delle metastasi al fegato sta diventando sempre più importante con l'avvento di nuove strategie terapeutiche. Per lo studio accurato di nuove strategie, modelli animali dovrebbe essere relativamente facile da eseguire, formare un numero significativo di metastasi, coinvolgere tutte le fasi della cascata metastatica e hanno un sistema giornalista che consente il rilevamento e il conteggio di un numero limitato di cellule metastatiche. Split-milza appro…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Questo lavoro è stato finanziato attraverso il Cork Sud Infermeria fondo Victoria University Hospital con il seno, il Cancer Society irlandese (CRI07TAN) e il Cancer Centre Cork Research. Linea del polmone Lewis cellule che esprimono stabilmente luciferasi è stato un gentile dono del Dr. Karin Jooss, Cell Genesys, Inc., San Francisco, USA.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| DMEM | Sigma-Aldrich | D6429 | ||
| PBS | Sigma-Aldrich | D8537 | ||
| Ketamine | Vetoquinol | |||
| Xylazine | Vetoquinol | |||
| Carprofen | Vetoquinol | |||
| Videne | Ecolab, Leeds, UK | |||
| Vicryl 4-0 suture | Ethicon | |||
| PDS 4-0 suture | Ethicon | |||
| Prolene 4-0 suture | Ethicon | |||
| Firefly Luciferin | Biosynth, Zurich, Switzerland |
References
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