Murina Bioluminescent Nedsatt tumör Modell
Summary
I artikeln beskrivs ett förfarande för induktion av orthotopic självlysande levertumörer hos möss, och efterföljande analys av tumörtillväxt begränsade till levern använder levande hela imaging kroppen luminiscens.
Abstract
Denna video beskriver upprättandet av metastaser i levern i en musmodell som senare kan analyseras med självlysande avbildning. Tumörceller ges specifikt till levern för att inducera en lokal levertumör, genom mobilisering av mjälten och delas upp i två, lämnar intakt vaskulära BLOMSTJÄLK för varje halva av mjälte. Lewis lungcancer celler som konstitutivt uttryck för Firefly luciferas genen (luc1) är inokuleras i en hemi-mjälte som sedan opererande 10 minuter senare. Den andra hemi-mjälten är kvar intakt och återvände till buken. Lever tumörtillväxt kan övervakas av mareld avbildning med IVIS hela systemet kropp avbildning. Kvantitativa avbildning av tumörtillväxt med IVIS ger exakt kvantifiering av livskraftiga tumörceller. Tumör celldöd och nekros på grund av läkemedelsbehandling är indicerad tidigt av en minskning av den självlysande signalen. Denna musmodell gör för att undersöka mekanismerna bakom metastaserande tumör-cell överlevnad och tillväxt och kan användas för utvärdering av läkemedel av levermetastaser.
Protocol
Discussion
Utvecklingen av tillförlitliga in vivo-modeller för studier av levermetastaser blir allt viktigare med tillkomsten av nya terapeutiska strategier. För noggrann studie av nya strategier bör djurmodeller vara relativt lätt att utföra, utgör ett betydande antal metastaser, omfatta alla stegen i metastaserande kaskad och har en reporter som gör det möjligt att upptäcka och räkning av ett begränsat antal metastaserande celler. Uppdelningen-mjälte tillvägagångssätt som beskrivs görs en enda gång och…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Detta arbete har finansierats genom Cork South Infirmary Victoria Universitetssjukhuset bröstcancer fond, den irländska Cancer Society (CRI07TAN) och Cork Cancer Research Centre. Lewis lunga cellinje stabilt uttrycker luciferas var en slags gåva från Dr Karin Jooss, Cell Genesys, Inc., San Francisco, USA.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| DMEM | Sigma-Aldrich | D6429 | ||
| PBS | Sigma-Aldrich | D8537 | ||
| Ketamine | Vetoquinol | |||
| Xylazine | Vetoquinol | |||
| Carprofen | Vetoquinol | |||
| Videne | Ecolab, Leeds, UK | |||
| Vicryl 4-0 suture | Ethicon | |||
| PDS 4-0 suture | Ethicon | |||
| Prolene 4-0 suture | Ethicon | |||
| Firefly Luciferin | Biosynth, Zurich, Switzerland |
References
- Kasuya, H. Mouse models of subcutaneous spleen reservoir for multiple portal venous injections to treat liver malignancies. Cancer Res. 65, 3823-3827 (2005).
- Liu, Q. Z., Tuo, C. W., Wang, B., Wu, B. Q., Zhang, Y. H. Liver metastasis models of human colorectal carcinoma established in nude mice by orthotopic transplantation and their biologic characteristic. World J Gastroenterol. 4, 409-411 (1998).
- Li, Z. Y., Ni, S., Yang, X., Kiviat, N., Lieber, A. Xenograft models for liver metastasis: Relationship between tumor morphology and adenovirus vector transduction. Mol Ther. 9, 650-657 (2004).
- Cashman, J. P. Immune gene therapy as a neoadjuvant to surgical excision to control metastatic cancers. Cancer Lett. , (2008).
