Démonstration dans cette vidéo sont les techniques pour flash de congélation et de sectionnement des tissus cérébraux embryonnaires à partir de la souris. Conseils utiles pour l'utilisation du cryostat sont donnés, y compris les méthodes de dépannage qui peut être utilisé pendant la coupe pour s'assurer que les sections résultante tissus sont exempts de fissures et d'autres distorsions.
Protocol
Fixer le tissu dans du paraformaldéhyde 4% dans du PBS pendant le temps désiré. Saccharose infuser tissus (cryoprotection) Faire solution de saccharose à 30% dans le PBS p / v en 2059 tube. Rincez le tissu 3x dans du PBS (~ 5 min avec bascule). Tissulaire lieu en solution de saccharose à 30%. Tissus ne va pas couler. Placez le tissu dans 4 ° C pendant la nuit, ou jusqu'à ce qu'il ait coulé. Taille de l'étiquette appropriée cryomold d'informat…