Overview
本文描述了一种技术，以消除昆虫的幼虫，同时保持内部幼虫完好无损，因此适合进一步调查。示例协议显示了与 德罗索菲拉内蒂费拉的程序：然而，这种技术适用于其他 果蝇 物种。
Protocol
该协议是摘自福托米等人，分期普帕尔时期的方法和测量翼色素沉着的德罗索菲拉肠胃 ，J.维斯Exp。(2018).
1. 去除浮肿
注释德罗索菲拉的普佩被一种叫做"普帕里姆"的结构所覆盖。莫斯科莫法昆虫（苍蝇）不会在幼崽时脱落幼虫皮质：相反，它在多面体后使皮质层变硬，并将其用作幼虫（pupa）的保护盖。住在幼崽体内的小狗有一个真正的幼崽，这是非常柔软和脆弱的。在P4（ii）左右发生多面体之前，上皮和氦是连接在一起的，因此在没有损伤的情况下去除氦是非常困难的。在P5之后，去除幼虫是费力的，但可用于形态观察和普帕尔阶段的定义。这一进程如下。
- 在一条纸巾上贴一块双面胶带。
- 将一个小狗放在双面胶带的通风口侧上（图1A）。
- 定位幼崽前侧和内部幼崽之间的空间。用钳子抓住并取出此缝隙周围的幼崽，并暴露 pupa 头部前侧。
- 将钳尖与前后轴平行移动，插入钳尖。抬起钳尖，局部地打破幼崽。重复此操作，直到破损到达幼崽的后部。确保在幼崽和幼崽腿之间也形成间隙，并打破幼崽的腹侧，并尽量减少对内脓包（图1B）的损害。
- 尽可能多地打破浮雕后，使用细画笔（#5/0）（图1C）取出小狗。
- 将 pupa 放在一张纸巾上，该纸巾已用 ddH2O 滋润，并放入塑料培养皿中（直径 60 mm x 高度 15 mm）。尽快拍照，因为暴露的小狗是脆弱的，很容易变得干燥。
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Representative Results
图1。去除浮肿的插图。（A） 将一个 pupa 腹侧放在一块双面胶带上。取出幼虫前部。（B） 用来自腹腔侧的钳子打破幼崽。（C） 打破浮雕后，用画笔取出小狗。
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Drosophila guttifera | The Drosophila Species Stock Center at the U.C. San Diego | 15130-1971.10 | Drosophila guttifera, a fruit fly species used in this article |
| NICETACK double sided tape | Nichiban | NW-15SF | Double sided tape, for removing puparium |
| Dumont #5 forceps | Fine Science Tools | 11252-20 | Forceps, for removing puparium |
| Van Gogh VISUAL Paint brush | Talens Japan | GWVR-#5/0 | Paint brush, for removing puparium |
| Stereomicroscope | Olympus | SZX16 | Stereomicroscope, for morphological observation |
| Digital camera | Olympus | DSE-330-A | Digital camera, for imaging |
| Falcon standard tissue culture dish | Corning | 353002 | Plastic Petri dish (diameter 60 mm x height 15 mm) |
