Summary
Dit protocol presenteert een testsysteem dat wordt gebruikt om kwantificeerbare en gecontroleerde vermoeidheidsblessures in een achillespees van een rat te induceren voor een in-vivo model van door overbelasting geïnduceerde tendinopathie. De procedure bestaat uit het vastzetten van de enkel van de rat aan een gewrichtsactuator die passieve enkeldorsaalflexie uitvoert met een op maat geschreven MATLAB-script.
Abstract
Tendinopathie is een chronische peesaandoening die leidt tot pijn en functieverlies en wordt veroorzaakt door herhaalde overbelasting van de pees en een beperkte hersteltijd. Dit protocol beschrijft een testsysteem dat cyclisch mechanische belastingen toepast via passieve dorsaalflexie op de achillespees van de rat. De op maat geschreven code bestaat uit pre- en postcyclische belastingsmetingen om de effecten van het belastingsprotocol te beoordelen, samen met het op feedbackcontrole gebaseerde cyclische vermoeiingsbelastingsregime.
We gebruikten 25 Sprague-Dawley-ratten voor deze studie, waarbij 5 ratten per groep 500, 1.000, 2.000, 3.600 of 7.200 cycli vermoeidheidsbelastingen kregen. De procentuele verschillen tussen de pre- en postcyclische belastingsmetingen van de hysterese, piekspanning en laad- en ontlaadmoduli werden berekend. De resultaten tonen aan dat het systeem verschillende gradaties van schade aan de achillespees kan veroorzaken op basis van het aantal uitgeoefende belastingen. Dit systeem biedt een innovatieve benadering om gekwantificeerde en fysiologische variërende gradaties van cyclische belastingen op de achillespees toe te passen voor een in vivo model van door vermoeidheid veroorzaakte overbelastingspeesblessures.
Introduction
Omdat pezen spieren met botten verbinden en gedurende hun hele leven dagelijks repetitieve bewegingen ervaren, zijn ze zeer vatbaar voor overbelastingsblessures die pijnlijk en beperkend zijn en resulteren in een verminderde mechanische functie, die 30-50% van de bevolkingtreft1. Tendinopathieën zijn chronische aandoeningen die worden beschouwd als overbelastingsblessures als gevolg van repetitieve vermoeidheidsbewegingen en onvoldoende genezing tot het niveau van vóór de blessure. Zowel de bovenste als de onderste ledematen worden vaak aangetast, waaronder de rotator cuff, elleboog, achillespees en patellapees 2,3,4,5. Achillespeesontsteking komt vaak voor bij activiteiten met rennen en springen, vooral atleten die betrokken zijn bij atletiek, hardlopen op middellange en lange afstanden, tennis en andere balsporten, en treft 7-9% van de hardlopers 6,7. Blessures door rennen en springen kunnen ook een beperkte dorsaalflexie van de enkel veroorzaken, wat een risicofactor is voor achillespees- en patellapeesontstekingen 8,9,10. Er is dus behoefte aan een betere beoordeling en karakterisering van tendinopathie, die deze studie kan bieden als een rattenmodel van passieve dorsaalflexie van de enkel voor overbelasting van achillespeesblessures.
Eerder werk met kleine diermodellen was gericht op het bestuderen van de ontwikkeling en markers van tendinopathie. Deze omvatten loopbandoefeningen, herhaaldelijk reiken, directe peesbelasting, collagenase-injecties, chirurgie en in vitro onderzoeken 11,12,13,14,15,16. Hoewel de literatuur baat heeft gehad bij de identificatie van schademarkers door het gebruik van deze tendinopathiemodellen, zijn de beperkingen onder meer het belasten van de pees in niet-fysiologisch relevante gewrichtsbewegingen, zoals in het geval van directe belasting van de pees, het niet rechtstreeks meten van toegepaste belastingen, zoals voor loopbandonderzoeken, en het niet gebruiken van fysiologisch overmatig gebruik, zoals in het geval van collagenase-injecties, onder andere. Daartoe had deze studie tot doel een systeem te ontwikkelen dat niet-invasief gekwantificeerde belastingen toepast op de achillespees met de toepassing van door overbelasting geïnduceerde tendinopathiestudies om de hiaten in eerder ontwikkelde kleine diermodellen voor tendinopathie op te vullen. We hebben een pilotstudie uitgevoerd om aan te tonen dat het systeem reproduceerbare veranderingen in mechanische eigenschappen induceert over een reeks belastingscycli. Dit systeem maakt het mogelijk om fysiologisch relevante beweging en belasting overmatig gebruik te induceren en tegelijkertijd de krachten te kwantificeren en te meten die op de pees worden uitgeoefend en erdoor worden ervaren tijdens het belastingsregime.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Deze studie werd uitgevoerd volgens de goedkeuring van het Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) in het Beth Israel Deaconess Medical Center. De dieren werden verdoofd met 5% isofluraan voor inductie en 2,5% voor onderhoud, en er werd voor gezorgd dat onderkoeling werd voorkomen.
1. Opzetten van het testsysteem
- Regel de passieve enkelrotatie door een stappenmotor om consistente rotatie en koppel toe te passen. Bedien de stappenmotor met een microcontroller. Gebruik de invoer van het 3D-positie- en oriëntatiesysteem om de rotatiegraden te markeren. Gebruik de uitgangen van de koppelsensor om feedbackcontrole te bieden voor het vergroten van de dorsaalflexiehoek als de limiet tot de drempel niet wordt bereikt.
- Sluit om te beginnen de microcontroller, koppelsensor, 3D elektromagnetische positionering en oriëntatiesysteem aan op een computer en de voeding. Bedien het op maat gemaakte systeem met behulp van een in-house ontwikkelde MATLAB-code (Figuur 1). Download de MATLAB-codebestanden van GitHub en volg specifieke instructies voor het uitvoeren van de code uit de instructies op de GitHub-pagina (https://github.com/Nazarian-Lab/PassiveAnkleDorsiflexionSystem).
- Open MATLAB met de codebestanden. Open de PDImfc-software om het 3D elektromagnetische positionerings- en oriëntatiesysteem aan te sluiten op het MATLAB-programma. Klik op Verbinden | Doorlopende P&O | StartSockExport(). Houd de applicatie op de achtergrond geopend.
2. Ex-vivo en post-mortem
- Euthanasie van zes 13 weken oude Sprague-Dawley-ratten via CO2 -inhalatie en een secundaire methode van euthanasie via thoracotomie. Ontleed de rechter achillespees met de calcaneus en myotendineuze overgang intact. Vries in bij -20° C om op een later tijdstip mechanische tests uit te voeren. Nadat de pees is ontdooid, fijn ontleed en voorbereid voor mechanische tests, voert u trekbelasting uit tot falen om de ultieme treksterkte (UTS) van de pees te verkrijgen (voorspanning tot 0,1 N, voorconditionering gedurende 10 cycli van 0,1 - 1 N, helling tot falen bij een constante verplaatsing van 0,1 mm/s). Gebruik 15% van de UTS als input voor het systeem om preconditioning uit te voeren voor een latere stap, zoals beschreven in stap 3.4.
- Euthanaseer een andere groep van vijf dieren met dezelfde procedure voor momentarm- en rekmetingen. Maak een röntgenfoto van het linkerbeen met de enkel in 90° dorsaalflexie naast een liniaal als referentie. Open de röntgenafbeelding in Fiji, gebruik de liniaal in de afbeelding als referentie, meet de peesmomentarm vanaf het rotatiecentrum van het enkelgewricht naar de achterkant van de enkel om te worden gebruikt als invoer in de MATLAB-code om de ingangskracht voor preconditionering beschreven in stap 2.1 om te zetten in de overeenkomstige koppelwaarde, evenals conversie tussen uitgevoerd koppel en kracht voor gegevensanalyse.
- Immobiliseer de linker achterpoot door twee spalken af te plakken om de knie volledig gestrekt te plaatsen. Buig de enkel lichtjes dorsaalbuigend door op de tenen te duwen om ervoor te zorgen dat de enkelrotatie optreedt als gevolg van de geïsoleerde pees in plaats van de omliggende zachte weefsels te betrekken en onder spanning staat. Als er geen spanning is of als er beweging in de knie is, plak de spalk dan opnieuw vast.
- Leg de pees bloot door de huid rond de achillespees te verwijderen. Plaats lijm op een aluminium kraal van 1/32 inch, plaats deze op de vrije pees die zich het dichtst bij de myotendineuze overgang van de achillespees bevindt en gebruik een wattenstaafje met zoutoplossing om overtollige lijm te verwijderen. Breng tijdens de resterende procedure herhaaldelijk zoutoplossing aan op de achillespees om de vochtigheid van het weefsel te garanderen.
- Meet de dwarsdoorsnede van de pees met behulp van een digitale schuifmaat voordat u belasting uitoefent. Stel dat de pees een ellips is en meet de breedte en dikte in drievouden.
- Plaats de rat op het platform voor het hele lichaam in buikligging. Zet de enkel vast aan de gewrichtsactuator met een ritssluiting rond de enkel en een andere rond de tenen, en zet de kniesplit vast met twee ritssluitingen. Draai de as zodat de enkel volledig plantairflexie heeft.
- Sluit de digitaliseringspen van het 3D-elektromagnetische positie- en oriëntatiesysteem aan op de computer en schakel de voeding in.
- Voer de systeemcode uit (in meer detail beschreven in stap 3) voor het opgegeven aantal cycli (in deze studie ontvingen zes geëuthanaseerde ratten 7.200 cycli).
- Bij cycli van 0, 500, 1.000, 2.000, 3.600 en 7.200 voor de ex vivo rekmetingen, pauzeer je het cyclische belastingsregime en meet je de lengte van de pees van de calcaneus tot de aluminium kraal in stappen van 5° van 0 tot 40° dorsaalflexie (de limiet van activering als gevolg van fysieke beperkingen van het systeem) met behulp van de 3D-digitaliseringspen in drievoud op afwisselende wijze.
- Bereken de peesspanning onder verschillende hoeken met behulp van de lengtes verkregen uit stap 2.9, waarbij de initiële lengte 0° dorsaalflexie is voor elk cyclusnummer. Voer een lineaire pasvorm uit om de relatie tussen dorsaalflexiehoek en rek bij elk cyclusnummer te verkrijgen. Gebruik deze relatie om ruwe hoekgegevens om te zetten in spanning voor gegevensanalyse.
- Bereken de doorsnede van de pees met behulp van een digitale schuifmaat bij 40° dorsaalflexie, uitgaande van onsamendrukbaarheid (constant volume) met de peeslengtemetingen bij 0° en 40° en de gemeten dwarsdoorsnede bij 0°. Gebruik deze dwarsdoorsnede bij elk aantal cycli om kracht om te zetten in spanning voor gegevensanalyse (spanning = kracht / dwarsdoorsnede).
3. Mechanisch laadprotocol
- Voor dit deel van de studie gebruikten we 25 vrouwelijke Sprague-Dawley-ratten van 11 weken oud, met 5 ratten die elk willekeurig werden toegewezen om 500, 1.000, 2.000, 3.600 of 7.200 cycli van vermoeidheidsbelasting te ontvangen.
NOTITIE: De preconditionering, initiële kalibratie en pre- en postmeting nemen ongeveer 15 minuten in beslag en het cyclische vermoeidheidsbelastingsregime duurt 1 seconde per cyclus. De langste tijd dat de rat onder narcose is, is dus ongeveer 2 uur, wat werd uitgevoerd volgens door IACUC goedgekeurde protocollen. - Sluit de microcontroller, koppelsensor, 3D elektromagnetische positionering en oriëntatiesysteem aan op een computer en de voeding. Bedien het op maat gemaakte systeem met behulp van de in eigen huis ontwikkelde MATLAB-code (Figuur 1).
- Zet de computer aan en open MATLAB met de codebestanden. Open de PDImfc-software om het 3D elektromagnetische positionerings- en oriëntatiesysteem aan te sluiten op het MATLAB-programma. Klik op Verbinden | Doorlopende P&O | StartSockExport(). Houd de applicatie op de achtergrond geopend.
- Induceer anesthesie met 5% isofluraan door inhalatie in een inductiekamer. Na inductie zet u het dier vast op het platform voor het hele lichaam met een verwarmingselement op waterbasis bevestigd om de temperatuur op peil te houden en de anesthesie te ondersteunen met 2,5% isofluraan via een neuskegelbevestiging. Gebruik een natte zalf op de ogen om uitdroging tijdens de anesthesie te voorkomen.
- Plaats de rat op het platform voor het hele lichaam in buikligging. Zet de enkel vast aan de gewrichtsactuator met een ritssluiting rond de enkel en een andere rond de tenen, en zet de kniesplit vast met twee ritssluitingen. Draai de as zodat de enkel volledig plantairflexie heeft.
NOTITIE: Zorg ervoor dat de kabelbinders geen vernauwing of laesies veroorzaken, wees voorzichtig bij het aanspannen en plaats indien nodig gaas tussen de kabelbinder en de huid voor een beschermingslaag. - Voor de volgende stappen met betrekking tot het uitvoeren van de systeemcode, klikt u op Uitvoeren op MATLAB voor elk gedeelte van de code dat overeenkomt met de specifieke belastingstest.
- Fiets de enkel 50 keer tot 15% van de ultieme trekspanning op basis van de waarde van de ultieme trekspanning van de achillespees van ex vivo trekkracht tot faaltests zoals gemeten op basis van stap 2.1.
- Voer een eerste kalibratie van de pees uit door deze drie keer te dorsaalbuigen tot 12°. Gebruik de helling van het lineaire gebied van het belastingsgebied van de hysteresecurve om het exponentiële gebied van de curve te berekenen.
- Beweeg de enkel stapsgewijs onder toenemende hoeken totdat het exponentiële gebied van de curve wordt verkregen door de helling van de piek van het belastingsgebied van de curve te berekenen (berekend met behulp van de in eigen huis ontwikkelde MATLAB-code) of totdat deze wordt gedraaid tot 40°, afhankelijk van wat zich het eerst voordoet.
- Voer bij de uiteindelijke verkregen hoek vijf cyclische mechanische metingen uit als basislijn voor het voorladen.
- Voer het cyclische vermoeidheidsbelastingsregime uit voor een bepaald aantal cycli (in dit onderzoek voor 500, 1.000, 2.000, 3.600 of 7.200 cycli).
- Bereken elke 50 cycli de helling van het belastingsgedeelte van de hysteresecurve (berekend met behulp van de in eigen huis ontwikkelde MATLAB-code) om er zeker van te zijn dat het zich nog steeds in het exponentiële gebied bevindt. Verhoog de dorsaalflexiehoek met 1°, tenzij deze al op 40° staat totdat dit exponentiële gebied is bereikt.
- Nadat het cyclische belastingsregime is voltooid, voert u vijf cyclische mechanische metingen uit als metingen na belasting onder de aanvankelijk gekozen hoek om de mechanische eigenschappen van de pezen te meten.
- Verwijder de kabelbinders en spalk. Breng het dier terug naar de verkoeverkamer. Het dier wordt niet onbeheerd achtergelaten totdat het weer voldoende bij bewustzijn is, waarna het wordt teruggebracht naar zijn kooi. Controleer de dieren dagelijks op eventuele nadelige klinische verschijnselen en dien, indien aanwezig, buprenorfine in een dosis van 1,2 mg/kg eenmaal per 72 uur subcutaan toe of voer vroege euthanasie uit. Euthanasie van de dieren na 7 dagen kooiactiviteit via CO2 -inhalatie en een secundair euthanasiemiddel via thoracotomie.
OPMERKING: De toepassing van cyclische belasting en mechanische metingen werden verkregen met een op maat gemaakte mal bestaande uit een koppelsensor, 3D-geprinte enkelgewrichtactuator en dierenbed, een 3D-elektromagnetisch positie- en oriëntatiesysteem en een stappenmotor die een as draait om dorsaalflexie te bereiken, zoals eerder gerapporteerd door onze groep17. Dit systeem wordt bestuurd door een MATLAB-script dat in stap 1.2 wordt genoemd. De koppelsensor en het positie- en oriëntatiesysteem registreren koppel- en positiegegevens in het hele laadprotocol van het systeem.
4. Data-analyse
- Laad de pre- en post-meetgegevens afzonderlijk in MATLAB.
- Converteer het koppel naar spanning op basis van de gemeten momentarm uit stap 2.2 en de dwarsdoorsnede gemeten bij het gespecificeerde aantal uitgeoefende belastingen verkregen uit stap 2.11 met behulp van vergelijkingen (1) en (2):
(1)
(2) - Converteer de hoek naar rek op basis van de conversie verkregen uit stap 2.10.
- Bereken de gemiddelde hysterese (gebied tussen de laad- en loscurves), piekspanning (maximale spanningswaarde van de cyclus) en laad- en losmoduli (lineaire fit van de laatste 50% van de laad- en de eerste 60% van de loscurves) voor de voor- en nameetcycli.
- Bereken de procentuele verandering in de mechanische eigenschappen van stap 4.4 tussen de voor- en nameetcycli.
(1)
(2)Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Met het toenemende aantal toegepaste cycli was er een grotere vermindering van de in vivo peesmechanische eigenschappen. Er was een significant lagere vermindering van de hysterese en de laad- en ontlaadmoduli voor de groep met 500 cycli in vergelijking met de groepen met 3.600 en 7.200 cycli (p < 0,05) (Figuur 2). Hoewel er een significante vermindering van de piekstress per cyclus was van de 500 cycli naar de 3.600 cycli groep, was er geen significante vermindering tussen de 500 en 7.200 cyclus groepen. Er was een consistente procentuele afname in hysterese, piekspanning en laad- en ontlaadmoduli voor de 3.600 en 7.200 cyclusgroepen. Hematoxyline en eosine- en Masson's Trichrome gekleurde beelden van peesmonsters verifieerden hogere niveaus van microstructurele schade met hogere cycli van dorsaalflexie met meer afgeronde cellen, hypercellulariteit, vezelverstoring en vezelkrimp (Figuur 3). De resultaten in dit artikel tonen aan dat hogere cycli van dorsaalflexie verhoogde niveaus van schade aan de achillespees veroorzaken.
Figuur 1: Passief testsysteem voor dorsaalflexie van de enkel. (A) Voeding, (B) microcontroller, (C) stappenmotor, (D) koppelsensor, (E) 3D elektromagnetische positionerings- en oriëntatiesensor, (F) 3D-geprinte enkelbevestiging, (G) 3D-geprint dierenbed, (H) 3D-geprinte neuskegelhouder. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 2: Representatieve cyclische belastingsspannings-rekcurves. Hysteresecurves bij cycli van 0, 500, 1.000, 2.000, 3.600 en 7.200. De pijl geeft aan dat de piekspanning afneemt bij een toenemend aantal cycli. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 3: Representatieve histologisch gekleurde beelden van peesmonsters. Hematoxyline en Eosine (links) en Masson's Trichrome (rechts) kleurden afbeeldingen van pezen voor groepen van 500, 1.000, 2.000, 3.600 en 7.200 cycli voor deze studie toonden aan dat het verhogen van het aantal toegepaste cycli resulteert in meer afgeronde cellen, hypercellulariteit (sterren), vezelverstoring en vezelkrimp (pijlen). Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Deze studie presenteert een methode om de achillespees van de rat cyclisch te belasten met een passief dorsaalflexiesysteem van de enkel voor een in-vivo overbelasting-geïnduceerd tendinopathiemodel. Het belang van het systeem ligt in het vermogen om de achillespees te isoleren, kwantificeerbare belastingen toe te passen zonder chirurgisch toegang te krijgen tot de pees en in-vivo peeseigenschappen te meten.
In 2010 presenteerden Fung et al. een model voor patellapeesvermoeidheid bij ratten met een op maat gemaakt testsysteem14. Hun studie presenteerde een methode om de patellapees direct te belasten door de pees bloot te leggen. Hoewel deze methode ook kwantificeerbare vermoeidheidsbelastingen op de pees toepaste, kan de directe toepassing van belastingen een extra inflammatoire wondgenezingsreactie op de huidincisie en daaropvolgende sluiting introduceren. Met onze methode zorgen de niet-invasief toegepaste belastingen ervoor dat elke gemeten biologische respons volledig te wijten is aan het belastingsprotocol in plaats van aan externe factoren.
Een cruciaal onderdeel van dit laadprotocol is de feedback-control loop. Door de helling van de hysteresebelastingscurve te controleren en indien nodig de dorsaalflexiehoek te vergroten, vermoeit het systeem de achillespees continu. Kniespalken is een cruciale stap omdat het ervoor zorgt dat de dorsaalflexie alleen de pees belast in plaats van de knie en ander omringend zacht weefsel te bewegen. Om te controleren of het spalken correct is uitgevoerd, bedient u de enkel na het spalken handmatig om te voelen of er een stijve pees is en controleert u de hysteresecurven die voorafgaand aan de cyclische belastingsstap worden geproduceerd.
Een van de beperkingen van dit onderzoek is dat de stamwaarden relatief hoog zijn. Ze zijn echter vergelijkbaar met passieve dorsaalflexie van menselijke achillespezen en kunnen worden veroorzaakt door de verlenging van de achillespees en de gastrocnemiusspier18. Een andere beperking is dat de omzettingen tussen koppel en spanning beperkt zijn tot ex vivo gemeten gemiddelde peesdwarsdoorsnede en momentarm rond het enkelgewricht, die per dier kunnen verschillen.
De pathologie en vroege stadia van chronische tendinopathie moeten nog worden opgehelderd. Samen met leeftijd en andere risicofactoren is overmatig gebruik een belangrijke factor die bijdraagt aan de ontwikkeling van chronische tendinopathie. Reproduceerbare overbelastingsblessures kunnen worden gesimuleerd met meerdere toepassingen van vermoeidheid cyclische belastingsaanvallen via ons systeem. Verder maakt de niet-invasieve werking van dit systeem het mogelijk om biologische en structurele veranderingen in peesbeschadiging en genezingsreacties gedurende lange perioden te beoordelen om kritieke biomarkers bij tendinopathie te begrijpen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
De auteurs hebben geen belangenconflicten te melden.
Acknowledgments
We willen graag onze financiële steun erkennen: het Joe Fallon Research Fund, het Dr. Louis Meeks BIDMC Sports Medicine Trainee Research Fund en een intramurale subsidie (AN), allemaal van BIDMC Orthopaedics, samen met steun van de National Institutes of Health (2T32AR055885 (PMW)).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 1/32'' Aluminum beads | |||
| 2.5% isoflurane | |||
| 3D digitizing pen | Polhemus, Vermont, NH, USA | ||
| 3D electromagnetic positioning and orientation sensor | Polhemus, Vermont, NH, USA | ||
| 5% isoflurane | |||
| Customized device: 1) Assembly, sensors, 3D printed animal bed and ankle mount actuator | Assembled as described in manuscript | ||
| MATLAB code | MATLAB, Natick, MA, USA | ||
| Microcontroller | Ivrea, Italy | Arduino UNO, Rev3 | |
| Nose cone | |||
| Scalpel and scalpel holder | No. 11 scalpel | ||
| Sprague-Dawley rats | Charles River Laboratories, Wilmington, MA, USA | 11-13 weeks old | |
| Stepper driver | SparkFun Electronics, Niwot, CO 80503 | DM542T | |
| Stepper motor | SparkFun Electronics, Niwot, CO 80503 | 23HE30-2804S | |
| Straight forceps | |||
| Torque sensor assembly | Futek Inc., Irvine, CA, USA | FSH03985, FSH04473, FSH03927 | |
| Water heating pad |
References
- Kaux, J. F., Forthomme, B., Goff, C. L., Crielaard, J. M., Croisier, J. L.
- Maffulli, N., Longo, U. G., Kadakia, A., Spiezia, F.
- Teunis, T., Lubberts, B., Reilly, B. T., Ring, D. A systematic review and pooled analysis of the prevalence of rotator cuff disease with increasing age. J Shoulder Elbow Surg. 23 (12), 1913-1921 (2014).
- von Rickenbach, K. J., Borgstrom, H., Tenforde, A., Borg-Stein, J., McInnis, K. C. Achilles tendinopathy: evaluation, rehabilitation, and prevention. Curr Sports Med Rep. 20 (6), 327-334 (2021).
- Aicale, R., Oliviero, A., Maffulli, N. Management of Achilles and patellar tendinopathy: what we know, what we can do. J Foot Ankle Res. 13 (1), 59 (2020).
- Jarvinen, T. A., et al.
- Silbernagel, K. G., Hanlon, S., Sprague, A. Current clinical concepts: conservative management of Achilles tendinopathy. J Athl Train. 55 (5), 438-447 (2020).
- Tayfur, A., et al. Are landing patterns in jumping athletes associated with patellar tendinopathy? A systematic review with evidence gap map and meta-analysis. Sports Med. 52 (1), 123-137 (2022).
- Malliaras, P., Cook, J. L., Kent, P. Reduced ankle dorsiflexion range may increase the risk of patellar tendon injury among volleyball players. J Sci Med Sport. 9 (4), 304-309 (2006).
- Backman, L. J., Danielson, P. Low range of ankle dorsiflexion predisposes for patellar tendinopathy in junior elite basketball players: a 1-year prospective study. Am J Sports Med. 39 (12), 2626-2633 (2011).
- Glazebrook, M. A., Wright, J. R. Jr, Langman, M., Stanish, W. D., Lee, J. M. Histological analysis of achilles tendons in an overuse rat model. J Orthop Res. 26 (6), 840-846 (2008).
- Carpenter, J. E., Flanagan, C. L., Thomopoulos, S., Yian, E. H., Soslowsky, L. J. The effects of overuse combined with intrinsic or extrinsic alterations in an animal model of rotator cuff tendinosis. Am J Sports Med. 26 (6), 801-807 (1998).
- Gao, H. G., et al. Increased serum and musculotendinous fibrogenic proteins following persistent low-grade inflammation in a rat model of long-term upper extremity overuse. PLoS One. 8 (8), e71875 (2013).
- Fung, D., et al. Early response to tendon fatigue damage accumulation in a novel in vivo model. J Biomech. 43 (2), 274-279 (2010).
- Ueda, Y., et al. Molecular changes to tendons after collagenase-induced acute tendon injury in a senescence-accelerated mouse model. BMC Musculoskelet Disord. 20 (1), 120 (2019).
- Bloom, E., et al. Overload in a rat in vivo model of synergist ablation induces tendon multi-scale structural and functional degeneration. J Biomech Eng. 145 (8), 081003 (2023).
- Williamson, P. M., et al. A passive ankle dorsiflexion testing system to assess mechanobiological and structural response to cyclic loading in rat Achilles tendon. J Biomech. 156, 111664 (2023).
- Oliveira, L. F., Peixinho, C. C., Silva, G. A., Menegaldo, L. L. In vivo passive mechanical properties estimation of Achilles tendon using ultrasound. J Biomech. 49 (4), 507-513 (2016).
