Summary
Detta protokoll presenterar ett testsystem som används för att inducera kvantifierbara och kontrollerade utmattningsskador i en akillessena hos råtta för en in vivo-modell av överbelastningsinducerad tendinopati. Ingreppet består i att fästa råttans fotled vid ett ledställdon som utför passiv fotledsdorsalflexion med ett specialskrivet MATLAB-skript.
Abstract
Tendinopati är ett kroniskt sentillstånd som resulterar i smärta och funktionsförlust och orsakas av upprepad överbelastning av senan och begränsad återhämtningstid. Detta protokoll beskriver ett testsystem som cykliskt applicerar mekaniska belastningar via passiv dorsalflexion på råttans akillessena. Den specialskrivna koden består av pre- och postcykliska belastningsmätningar för att bedöma effekterna av belastningsprotokollet tillsammans med den återkopplingskontrollbaserade cykliska utmattningsbelastningsregimen.
Vi använde 25 Sprague-Dawley-råttor för denna studie, med 5 råttor per grupp som fick antingen 500, 1 000, 2 000, 3 600 eller 7 200 cykler av utmattningsbelastningar. De procentuella skillnaderna mellan de pre- och postcykliska belastningsmätningarna av hysteres, toppspänning och belastnings- och avlastningsmoduler beräknades. Resultaten visar att systemet kan inducera olika grader av skador på hälsenan baserat på antalet belastningar som appliceras. Detta system erbjuder ett innovativt tillvägagångssätt för att tillämpa kvantifierade och fysiologiska varierande grader av cykliska belastningar på akillessenan för en in vivo-modell av trötthetsinducerad överbelastningsskada på senan.
Introduction
Eftersom senor förbinder muskler med ben och upplever dagliga repetitiva rörelser under hela sin livstid, är de mycket benägna att drabbas av överbelastningsskador som är smärtsamma och begränsande och resulterar i försämrad mekanisk funktion, vilket påverkar 30-50 % av befolkningen1. Tendinopatier är kroniska tillstånd som anses vara överbelastningsskador på grund av repetitiva trötthetsrörelser och otillräcklig läkning till nivåerna före skadan. Både övre och nedre extremiteter är vanligt drabbade, inklusive rotatorkuffen, armbågen, akillessenan och patellarsenan 2,3,4,5. Akillestendinopati är vanligt vid aktiviteter som involverar löpning och hoppning, särskilt idrottare som är involverade i friidrott, medel- och långdistanslöpning, tennis och andra bollsporter, och drabbar 7-9 % av löparna 6,7. Skador från löpning och hopp kan också orsaka begränsad dorsalflexion i fotleden, vilket är en riskfaktor för akilles och patellar tendinopatier 8,9,10. Således finns det ett behov av en bättre bedömning och karakterisering av tendinopati, vilket denna studie kan ge som en råttmodell av passiv fotledsdorsalflexion för överanvändning av akillessenskador.
Tidigare arbete med smådjursmodeller har syftat till att studera utveckling och markörer för tendinopati. Dessa inkluderar löpbandsträning, repetitiv sträckning, direkt senbelastning, kollagenasinjektioner, kirurgi och in vitro-studier 11,12,13,14,15,16. Även om litteraturen har gynnats av identifieringen av skademarkörer genom att använda dessa tendinopatimodeller, inkluderar begränsningarna att belasta senan i icke-fysiologiskt relevanta ledrörelser, som i fallet med direkt belastning av senan, att inte direkt mäta applicerade belastningar, såsom för löpbandsstudier, och att inte använda fysiologisk överanvändning, som i fallet med kollagenasinjektioner, bland annat. För detta ändamål syftade denna studie till att utveckla ett system som icke-invasivt applicerar kvantifierade belastningar på akillessenan med tillämpning för överanvändningsinducerade tendinopatistudier för att fylla luckorna i tidigare utvecklade smådjursmodeller för tendinopati. Vi utförde en pilotstudie för att visa att systemet inducerar reproducerbara förändringar i mekaniska egenskaper över en rad belastningscykler. Detta system gör det möjligt för fysiologiskt relevant rörelse och belastning att inducera överanvändning samtidigt som det kvantifierar och mäter de krafter som appliceras på och upplevs av senan under belastningsregimen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Denna studie genomfördes enligt godkännande från Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) vid Beth Israel Deaconess Medical Center. Djuren sövdes med 5 % isofluran för induktion och 2,5 % för underhåll, och försiktighet iakttogs för att undvika hypotermi.
1. Ställa in testsystemet
- Kontrollera passiv fotledsrotation med en stegmotor för att applicera konsekvent rotation och vridmoment. Styr stegmotorn med en mikrokontroller. Använd indata från 3D-positions- och orienteringssystemet för att markera rotationsgraderna. Använd utgångarna från vridmomentsensorn för att ge återkopplingskontroll för att öka dorsalflexionsvinkeln om gränsen för tröskeln inte nås.
- Börja med att ansluta mikrokontrollern, vridmomentsensorn, 3D-elektromagnetisk positionering och orienteringssystem till en dator och strömförsörjningen. Styr det specialbyggda systemet med hjälp av en egenutvecklad MATLAB-kod (figur 1). Ladda ned MATLAB-kodfilerna från GitHub och följ specifika instruktioner om hur du kör koden från GitHub-sidans instruktioner (https://github.com/Nazarian-Lab/PassiveAnkleDorsiflexionSystem).
- Öppna MATLAB med kodfilerna. Öppna PDImfc-programvaran för att ansluta det elektromagnetiska 3D-positionerings- och orienteringssystemet till MATLAB-programmet. Klicka på Anslut | Kontinuerlig P&O | StartSockExport(). Håll programmet öppet i bakgrunden.
2. Ex vivo och obduktion
- Avliva sex 13 veckor gamla Sprague-Dawley-råttor via CO 2-inhalation och en sekundär metod för avlivning via torakotomi. Dissekera den högra akillessenan med calcaneus och myotendinös korsning intakt. Frys vid -20°C för att utföra mekanisk testning vid ett senare tillfälle. Efter att senan har tinats, findissekerats och förberetts för mekanisk testning, utför dragbelastning till misslyckande för att erhålla den slutliga draghållfastheten (UTS) för vajern (förspänning till 0.1N, förkonditionering för 10 cykler från 0.1 - 1 N, ramp till brott vid en konstant förskjutning på 0.1 mm/s). Använd 15 % av UTS som indata för systemet för att utföra förkonditionering för ett senare steg, enligt beskrivningen i steg 3.4.
- Avliva en annan grupp om fem djur med samma procedur för moment-, arm- och töjningsmätningar. Utför en röntgen av vänster ben med fotleden i 90° dorsalflexion bredvid en linjal som referens. Öppna röntgenbilden i Fiji, med linjalen i bilden som referens, mät senmomentarmen från fotledens rotationscentrum till baksidan av fotleden för att användas som indata i MATLAB-koden för att omvandla ingångskraften för förkonditionering som beskrivs i steg 2.1 till motsvarande vridmomentvärde samt omvandling mellan utgående vridmoment och kraft för dataanalys.
- Immobilisera vänster bakben genom att tejpa två skenor för att placera knäet i full extension. Dorsalflexa fotleden lätt genom att trycka på tårna för att säkerställa att fotledsrotationen sker på grund av den isolerade senan snarare än att involvera omgivande mjukvävnader och är i spänning. Om du inte är spänd eller om det finns rörelse i knäet, tejpa om skenan.
- Exponera senan genom att ta bort huden runt hälsenan. Placera lim på en 1/32-tums aluminiumpärla, placera den på den fria senan närmast den myoendinösa korsningen av akillessenan och använd en bomullspinne med saltlösning för att ta bort överflödigt lim. Applicera upprepade gånger saltlösning på akillessenan under resten av proceduren för att säkerställa fukt i vävnaden.
- Mät senans tvärsnittsarea med ett digitalt skjutmått innan du applicerar någon belastning. Antag att senan är en ellips och mät bredden och tjockleken i trilikat.
- Placera råttan på helkroppsplattformen i bukläge. Fäst fotleden på ledställdonet med ett dragkedjeband runt fotleden och ett annat runt tårna, och fäst knädelningen med två dragkedjor. Vrid axeln så att fotleden är i full plantarflexion.
- Anslut digitaliseringspennan för det elektromagnetiska 3D-positions- och orienteringssystemet till datorn och slå på strömförsörjningen.
- Kör systemkoden (beskrivs mer detaljerat i steg 3) för det angivna antalet cykler (i denna studie fick sex avlivade råttor 7 200 cykler).
- Vid 0, 500, 1 000, 2 000, 3 600 och 7 200 cykler för ex vivo-töjningsmätningarna, pausa den cykliska belastningsregimen och mät längden på senan från calcaneus till aluminiumpärlan i steg om 5° från 0 till 40° dorsalflexion (aktiveringsgränsen på grund av systemets fysiska begränsningar) med hjälp av 3D-digitaliseringspennan i tre exemplar på alternerande sätt.
- Beräkna sentöjningen i olika vinklar med hjälp av längderna från steg 2.9, där den initiala längden är vid 0° dorsalflexion för varje cykelnummer. Utför en linjär anpassning för att få förhållandet mellan dorsalflexionsvinkel och töjning vid varje cykelnummer. Använd den här relationen för att konvertera råa vinkeldata till töjning för dataanalys.
- Beräkna senans tvärsnittsarea med hjälp av ett digitalt skjutmått vid 40° dorsalflexion med antagande om inkompressibilitet (konstant volym) med senlängdsmätningarna vid 0° och 40° och den uppmätta tvärsnittsarean vid 0°. Använd denna tvärsnittsarea vid varje antal cykler för att omvandla kraft till spänning för dataanalys (spänning = kraft / tvärsnittsarea).
3. Protokoll för mekanisk belastning
- För den här delen av studien använde vi 25 Sprague-Dawley-honor 11 veckor gamla råttor, med 5 råttor som var och en slumpmässigt fördelades för att få 500, 1 000, 2 000, 3 600 eller 7 200 cykler av utmattningsbelastning.
OBS: Förkonditioneringen, den initiala kalibreringen och för- och eftermätningen tar cirka 15 minuter att köra, och den cykliska utmattningsbelastningen tar 1 sekund per cykel. Den längsta tiden råttan är alltså under narkos cirka 2 timmar, vilket utfördes enligt IACUC-godkända protokoll. - Anslut mikrokontrollern, vridmomentsensorn, 3D-elektromagnetisk positionering och orienteringssystem till en dator och strömförsörjningen. Styr det specialbyggda systemet med hjälp av den egenutvecklade MATLAB-koden (figur 1).
- Slå på datorn och öppna MATLAB med kodfilerna. Öppna PDImfc-programvaran för att ansluta det elektromagnetiska 3D-positionerings- och orienteringssystemet till MATLAB-programmet. Klicka på Anslut | Kontinuerlig P&O | StartSockExport(). Håll programmet öppet i bakgrunden.
- Inducera anestesi med 5 % isofluran genom inandning i en induktionskammare. Efter induktionen, fäst djuret på helkroppsplattformen med ett vattenbaserat värmeelement fäst för att bibehålla temperaturen och upprätthålla anestesi med 2,5 % isofluran via en noskonfäste. Använd en våt salva på ögonen för att förhindra torrhet under narkos.
- Placera råttan på helkroppsplattformen i bukläge. Fäst fotleden på ledställdonet med ett dragkedjeband runt fotleden och ett annat runt tårna, och fäst knädelningen med två dragkedjor. Vrid axeln så att fotleden är i full plantarflexion.
OBS: Se till att dragkedjorna inte orsakar sammandragning eller skador, var noga med att dra åt och om det behövs, placera gasbinda mellan dragkedjan och huden för ett lager av skydd. - För följande steg som involverar att köra systemets kod, klicka på Kör på MATLAB för varje avsnitt i koden som motsvarar det specifika laddningstestet.
- Cykla fotleden 50 gånger till 15 % av den slutliga dragspänningen baserat på värdet på den slutliga dragspänningen för akillessenan från ex vivo-dragning till feltester mätt baserat på steg 2.1.
- Utför en första kalibrering av senan genom att dorsalflexa den tre gånger till 12°. Använd lutningen på det linjära området för laddningsområdet på hystereskurvan för att beräkna det exponentiella området på kurvan.
- Stegvis dorsalflexa fotleden i ökande vinklar tills antingen den exponentiella regionen av kurvan erhålls genom att beräkna lutningen på toppen av kurvans belastningsområde (beräknat med hjälp av den egenutvecklade MATLAB-koden) eller tills den roteras till 40°, beroende på vilket som inträffar först.
- Vid den slutliga erhållna vinkeln, utför fem cykliska mekaniska mätningar som en baslinje för förspänning.
- Utför den cykliska utmattningsbelastningsregimen för ett specificerat antal cykler (i denna studie för antingen 500, 1 000, 2 000, 3 600 eller 7 200 cykler).
- Var 50:e cykel, beräkna lutningen på belastningsdelen av hystereskurvan (beräknad genom den egenutvecklade MATLAB-koden) för att säkerställa att den fortfarande är i exponentialregionen. Öka dorsalflexionsvinkeln med 1° om den inte redan är vid 40° tills detta exponentiella område uppnås.
- Efter att den cykliska belastningsregimen är klar, utför fem cykliska mekaniska mätningar som mätningar efter belastning vid den ursprungligen valda vinkeln för att mäta senans mekaniska egenskaper.
- Ta bort buntbanden och skenan. Sätt tillbaka djuret i uppvakningskammaren. Djuret lämnas inte utan uppsikt förrän det har återfått tillräckligt medvetande, varefter det återförs till sin bur. Övervaka djuren dagligen med avseende på eventuella kliniska tecken och om de förekommer, administrera buprenorfin i en dos på 1,2 mg/kg subkutant en gång var 72:e timme eller avliva dem tidigt. Avliva djuren efter 7 dagars buraktivitet via CO2 -inandning och en sekundär metod för avlivning via torakotomi.
OBS: Den cykliska belastningsapplikationen och de mekaniska mätningarna erhölls med en specialtillverkad jigg bestående av en vridmomentsensor, 3D-printad fotledsställdon och djurbädd, ett 3D-elektromagnetiskt positions- och orienteringssystem och en stegmotor som roterar en axel för att uppnå dorsalflexion, som tidigare rapporterats av vår grupp17. Det här systemet styrs av ett MATLAB-skript som nämns i steg 1.2. Momentgivaren och positions- och orienteringssystemet registrerar vridmoment- och positionsdata genom hela systemets belastningsprotokoll.
4. Analys av data
- Ladda för- och eftermätningsdata separat i MATLAB.
- Omvandla vridmomentet till spänning baserat på den uppmätta momentarmen från steg 2.2 och den tvärsnittsarea som mäts vid det specificerade antalet anbringade belastningar erhållna från steg 2.11 med hjälp av ekvationerna (1) och (2):
Nej (1)
Nej (2) - Konvertera vinkeln till töjning baserat på omvandlingen från steg 2.10.
- Beräkna den genomsnittliga hysteresen (arean mellan belastnings- och lossningskurvorna), toppspänningen (cykelns maximala spänningsvärde) och belastnings- och lossningsmodulerna (den linjära anpassningen av de sista 50 % av belastningen och de första 60 % av lossningskurvorna) för för- och eftermätningscyklerna.
- Beräkna den procentuella förändringen av de mekaniska egenskaperna från steg 4.4 mellan för- och eftermätningscyklerna.
Nej (1)
Nej (2)Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Med det ökande antalet tillämpade cykler skedde en större minskning av senans mekaniska egenskaper in vivo . Det var en signifikant lägre minskning av hysteres och belastnings- och lossningsmoduler för 500-cykelgruppen jämfört med 3 600 och 7 200 cykelgrupper (p < 0,05) (figur 2). Medan det var en signifikant minskning av toppstress per cykel från 500-cykelgruppen till 3 600-cykelgruppen, fanns det ingen signifikant minskning mellan 500- och 7 200-cykelgrupperna. Det fanns en konsekvent procentuell minskning av hysteres, toppspänning och belastnings- och avlastningsmoduler för grupperna med 3 600 och 7 200 cykler. Hematoxylin- och eosin- och Masson's Trichrome-färgade bilder av senprover verifierade högre nivåer av mikrostrukturell skada med högre cykler av dorsalflexion med mer rundade celler, hypercellularitet, fiberstörningar och fiberkrympning (Figur 3). Resultaten i denna artikel visar att högre cykler av dorsalflexion orsakar ökade nivåer av skador på hälsenan.
Figur 1: Testsystem för passiv fotledsdorsalflexion. (A) Strömförsörjning, (B) mikrokontroller, (C) stegmotor, (D) vridmomentsensor, (E) 3D elektromagnetisk positionerings- och orienteringssensor, (F) 3D-tryckt fotledsfäste, (G) 3D-printad djurbädd, (H) 3D-printad noskonhållare. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 2: Representativa cykliska belastningsspännings-töjningskurvor. Hystereskurvor vid 0, 500, 1 000, 2 000, 3 600 och 7 200 cykler. Pilen indikerar minskande toppspänning med ett ökande antal cykler. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 3: Representativa histologiskt färgade bilder av senprover. Hematoxylin och Eosin (vänster) och Massons Trichrome (höger) färgade bilder av senor för 500, 1 000, 2 000, 3 600 och 7 200 cykelgrupper för denna studie visade att en ökning av antalet tillämpade cykler resulterar i mer rundade celler, hypercellularitet (stjärnor), fiberstörningar och fiberkrympning (pilar). Klicka här för att se en större version av denna figur.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Denna studie presenterar en metod för att cykliskt belasta råttans akillessena med ett passivt fotledsdorsalflexionssystem för en in-vivo överanvändningsinducerad tendinopatimodell. Systemets betydelse ligger i dess förmåga att isolera hälsenan, applicera kvantifierbara belastningar utan att kirurgiskt komma åt senan och mäta senans egenskaper in vivo .
År 2010 presenterade Fung et al. en modell för utmattning av patellarsenan hos råttor med ett specialbyggt testsystem14. I studien presenterades en metod för att direkt belasta knäskålssenan genom att exponera senan. Även om denna metod också applicerade kvantifierbara utmattningsbelastningar på senan, kan den direkta appliceringen av belastningar introducera ett ytterligare inflammatoriskt sårläkningssvar på hudsnittet och efterföljande stängning. Med vår metod säkerställer de icke-invasivt applicerade belastningarna att all uppmätt biologisk respons helt och hållet beror på belastningsprotokollet snarare än några externa faktorer.
En kritisk komponent i detta laddningsprotokoll är återkopplingskontrollslingan. Genom att kontrollera lutningen på hysteresbelastningskurvan och vid behov öka dorsalflexionsvinkeln tröttar systemet kontinuerligt ut akillessenan. Knäskena är ett kritiskt steg eftersom det säkerställer att dorsalflexionen endast belastar senan istället för att flytta knäet och annan omgivande mjukvävnad. För att kontrollera om skenan är korrekt utförd, aktivera fotleden manuellt efter skenan för att känna efter en stel sena och övervaka hystereskurvorna som produceras före det cykliska belastningssteget.
En av begränsningarna med denna studie är att töjningsvärdena är relativt stora. De är dock jämförbara med passiv dorsalflexion av mänskliga akillessenor och kan orsakas av förlängningen av akillessenan och gastrocnemiusmuskeln18. En annan begränsning är att omvandlingarna mellan vridmoment och spänning är begränsade till ex vivo-uppmätt genomsnittlig sentvärsnittsarea och momentarm runt fotleden, vilket kan variera mellan olika djur.
Patologin och de tidiga stadierna av kronisk tendinopati är ännu inte klarlagda. Tillsammans med ålder och andra riskfaktorer är överanvändning en viktig bidragande faktor till utvecklingen av kronisk tendinopati. Reproducerbara överbelastningsskador kan simuleras med flera appliceringar av utmattningscykliska belastningsanfall genom vårt system. Vidare möjliggör icke-invasiviteten hos detta system bedömning av biologiska och strukturella förändringar i senskador och läkningssvar under långa perioder för att förstå kritiska biomarkörer i tendinopati.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Författarna har inga intressekonflikter att redovisa.
Acknowledgments
Vi vill tacka för vårt finansieringsstöd: Joe Fallon Research Fund, Dr. Louis Meeks BIDMC Sports Medicine Trainee Research Fund och ett intramuralt bidrag (AN), alla från BIDMC Orthopaedics, tillsammans med stöd från National Institutes of Health (2T32AR055885 (PMW)).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 1/32'' Aluminum beads | |||
| 2.5% isoflurane | |||
| 3D digitizing pen | Polhemus, Vermont, NH, USA | ||
| 3D electromagnetic positioning and orientation sensor | Polhemus, Vermont, NH, USA | ||
| 5% isoflurane | |||
| Customized device: 1) Assembly, sensors, 3D printed animal bed and ankle mount actuator | Assembled as described in manuscript | ||
| MATLAB code | MATLAB, Natick, MA, USA | ||
| Microcontroller | Ivrea, Italy | Arduino UNO, Rev3 | |
| Nose cone | |||
| Scalpel and scalpel holder | No. 11 scalpel | ||
| Sprague-Dawley rats | Charles River Laboratories, Wilmington, MA, USA | 11-13 weeks old | |
| Stepper driver | SparkFun Electronics, Niwot, CO 80503 | DM542T | |
| Stepper motor | SparkFun Electronics, Niwot, CO 80503 | 23HE30-2804S | |
| Straight forceps | |||
| Torque sensor assembly | Futek Inc., Irvine, CA, USA | FSH03985, FSH04473, FSH03927 | |
| Water heating pad |
References
- Kaux, J. F., Forthomme, B., Goff, C. L., Crielaard, J. M., Croisier, J. L.
- Maffulli, N., Longo, U. G., Kadakia, A., Spiezia, F.
- Teunis, T., Lubberts, B., Reilly, B. T., Ring, D. A systematic review and pooled analysis of the prevalence of rotator cuff disease with increasing age. J Shoulder Elbow Surg. 23 (12), 1913-1921 (2014).
- von Rickenbach, K. J., Borgstrom, H., Tenforde, A., Borg-Stein, J., McInnis, K. C. Achilles tendinopathy: evaluation, rehabilitation, and prevention. Curr Sports Med Rep. 20 (6), 327-334 (2021).
- Aicale, R., Oliviero, A., Maffulli, N. Management of Achilles and patellar tendinopathy: what we know, what we can do. J Foot Ankle Res. 13 (1), 59 (2020).
- Jarvinen, T. A., et al.
- Silbernagel, K. G., Hanlon, S., Sprague, A. Current clinical concepts: conservative management of Achilles tendinopathy. J Athl Train. 55 (5), 438-447 (2020).
- Tayfur, A., et al. Are landing patterns in jumping athletes associated with patellar tendinopathy? A systematic review with evidence gap map and meta-analysis. Sports Med. 52 (1), 123-137 (2022).
- Malliaras, P., Cook, J. L., Kent, P. Reduced ankle dorsiflexion range may increase the risk of patellar tendon injury among volleyball players. J Sci Med Sport. 9 (4), 304-309 (2006).
- Backman, L. J., Danielson, P. Low range of ankle dorsiflexion predisposes for patellar tendinopathy in junior elite basketball players: a 1-year prospective study. Am J Sports Med. 39 (12), 2626-2633 (2011).
- Glazebrook, M. A., Wright, J. R. Jr, Langman, M., Stanish, W. D., Lee, J. M. Histological analysis of achilles tendons in an overuse rat model. J Orthop Res. 26 (6), 840-846 (2008).
- Carpenter, J. E., Flanagan, C. L., Thomopoulos, S., Yian, E. H., Soslowsky, L. J. The effects of overuse combined with intrinsic or extrinsic alterations in an animal model of rotator cuff tendinosis. Am J Sports Med. 26 (6), 801-807 (1998).
- Gao, H. G., et al. Increased serum and musculotendinous fibrogenic proteins following persistent low-grade inflammation in a rat model of long-term upper extremity overuse. PLoS One. 8 (8), e71875 (2013).
- Fung, D., et al. Early response to tendon fatigue damage accumulation in a novel in vivo model. J Biomech. 43 (2), 274-279 (2010).
- Ueda, Y., et al. Molecular changes to tendons after collagenase-induced acute tendon injury in a senescence-accelerated mouse model. BMC Musculoskelet Disord. 20 (1), 120 (2019).
- Bloom, E., et al. Overload in a rat in vivo model of synergist ablation induces tendon multi-scale structural and functional degeneration. J Biomech Eng. 145 (8), 081003 (2023).
- Williamson, P. M., et al. A passive ankle dorsiflexion testing system to assess mechanobiological and structural response to cyclic loading in rat Achilles tendon. J Biomech. 156, 111664 (2023).
- Oliveira, L. F., Peixinho, C. C., Silva, G. A., Menegaldo, L. L. In vivo passive mechanical properties estimation of Achilles tendon using ultrasound. J Biomech. 49 (4), 507-513 (2016).
