Overview
Artikkelen beskriver en analyse for å studere sebrafiskens aggresjon. Metoden bruker et enkelt speil og observerer sebrafiskens atferdsrespons mot sin egen refleksjon i speilet.
Protocol
1. Gjennomføring av aggresjonsanalysen
- Utfør aggresjonsanalysen i en 19 L rektangulær tank som måler 30 cm x 15 cm x 10 cm. Utstyr tanken i eksterne ugjennomsiktige partisjoner rundt tre sider av aggresjonstanken, slik at fronten blir utsatt for visning, for å redusere uønskede ytre stimuli. Del tanken med eksterne markeringer i fire like rektangulære kvadranter og fest et speil permanent (med silikon caulk) innenfor nedre venstre kvadrant, tilbøyelig til 22,5 ° og danner en høyre trekant mot den venstre venstre siden av tanken.
- Forsikre deg om at temperaturen på vannet i akklimatiseringstanken og aggresjonstanken er innenfor 2 °C fra husstativet. For å gjøre det, ha friskt, alderen vann forvarmet til 27,5-28,5 °C klar til å legge til aggresjonstanken. MERK: Det er viktig å endre vannet mellom hver analyse for å eliminere uberettigede olfaktoriske signaler.
- Overfør, ved cupping, en fokal fisk fra boligstativet til en separat akklimatiseringstank hvor den vil akklimatisere i 10 min.
MERK: Det er viktig å redusere stimulansen som introduseres for fisken gjennom feil håndtering. Overfør enkeltpersoner som tidligere beskrevet. Spesielt manuelt og forsiktig plasser en liten, gjennomsiktig plastkopp i tanken av interesse. Uten å forstyrre fisken så mye som å overføre ved hjelp av et nett, øs fisken sakte opp i koppen. - Forsikre deg om at videokameraet er klart til å ta opp ved å bekrefte at aggresjonsanalysetanken (se trinn 1.1) er i fokus og umiddelbart før du overfører individet til aggresjonstanken, trykk på posten på enheten. Overfør fokal fisk via cupping fra akklimatiseringstank til aggresjonstank.
MERK: Det er viktig å registrere før fisken kommer inn i aggresjonstanken for å spore den nøyaktige tidspunktet for oppføring. - Registrer aggresjonstanken i 10 min og 30 sek og kopp deretter fokalfisken fra aggresjonstanken tilbake i akklimatiseringstanken.
- Når du ser på opptaket, vent 30 sekunder etter at fisken er introdusert til tanken som en ekstra akklimatiseringsperiode før du scorer atferd.
- Ved hjelp av JWatcher-poengsystemet som er definert for aggressiv atferd, kvantifiserer du følgende oppførsel i 10 minutter: Tid brukt i nærheten av speil, antall speiltilnærminger, antall dart, antall forsøk på biter (åpningsmunn i retning av speil) og antall laterale skjermer (dorsal, pectoral, anal og caudal fin ereksjon).
- Score en enkelt aggresjon analyse minst to ganger, til analysen er scoret med høy enighet mellom iterasjoner.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
19 L rectangular tank | That Fish Place | 211932 | |
ArtMinds Square Mirror, Value Pack 3" x 3" | Michaels | 10334162 | |
Zebrafish Rack System | Aquaneering Inc | ZS550 | |
Nikon AF Nikkor 35-105 mm f/305~4.5s MACRO lens | Nikon Corporation | NA | |
Hitachi KP-D20A CCD Camera | Prescott's, Inc. | NA | |
Jwatcher | NA | NA |