Оптические перерезки нерва широко используется модель взрослого травмы ЦНС. Эта модель идеально подходит для проведения ряда экспериментальных манипуляций, нацеленных сетчатки глобально или непосредственно целевой ранения нейронов населения ганглиозных клеток сетчатки.
Ганглиозных клеток сетчатки (РГК) в ЦНС нейроны, которые выводят визуальную информацию от сетчатки в мозг через зрительный нерв. Зрительного нерва могут быть доступны в орбите глаза и полностью перерезана (axotomized), резки аксоны весь РГК населения. Оптические перерезки нерва воспроизводимые модели апоптоза нейронов гибель клеток во взрослом ЦНС 1-4. Эта модель особенно привлекательна тем, стекловидное камеры глаза действует как капсулы для доставки лекарств к сетчатке, что позволяет с помощью экспериментальных манипуляций внутриглазных инъекций. Диффузии химических веществ через стекловидное жидкости гарантирует, что они действуют на весь РГК населения. Вирусные векторы, плазмиды или короткий вмешательства РНК (siRNAs) также могут быть доставлены в стекловидной камере для того, чтобы заразить или трансфекции клеток сетчатки 5-12. Высокий тропизм адено-ассоциированные вирус (AAV) векторов выгодно для целевой РГК, с инфекцией ставка приближается к 90% клеток вблизи места инъекции 6, 7, 13-15. Более того, РГК могут быть выборочно трансфекции с применением siRNAs, плазмиды или вирусные векторы, чтобы сократить конце зрительного нерва 16-19 или инъекционные векторы в своей целевой верхний бугорок 10. Это позволяет исследователям изучать механизмы апоптоза в поврежденных нейронов населения, не смешивая воздействия на другие нейроны свидетеля или окружающей глии. RGC апоптоз имеет характерное время курс которой гибель клеток задерживается 3-4 postaxotomy дней, после чего клетки быстро вырождается. Это обеспечивает окно для экспериментальной манипуляции направлены против путей, участвующих в апоптозе. Манипуляции, которые нацелены непосредственно на РГК из перерезанного оптических культи нерва выполняются во время axotomy, сразу же после резки нерва. Напротив, когда вещества доставляются внутриглазного маршрута, они могут быть введены до операции или в течение первых 3 дней после операции, предшествующие началу апоптоза в axotomized РГК. В настоящей статье мы покажем несколько методов для экспериментальных манипуляций после перерезки оптический нерв.
Оптические перерезки нерва высокой воспроизводимостью модель взрослого апоптоза нейронов ЦНС. Экспериментальных манипуляций продемонстрировали в этой рукописи позволяют изучить механизмы апоптоза РГК после травмы.
Внутриглазное инъекции полезны для глобальной ори…
The authors have nothing to disclose.
PDK поддерживается операционной CIHR гранта (СС 86523)
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Stereotaxic Frame | Stoelting, Kopf, WPI | |||
Rat Gas Mask | Stoelting, Kopf, WPI | |||
Anesthesia System | VetEquip | 901806 | ||
Isoflurane (PrAErrane) | Baxter Corp | DIN 02225875 | ||
Surgical Microscope | WPI, Zeiss, Leica | |||
Alcaine Eye Drops | Alcon | |||
Tears Naturale P.M. | Alcon | |||
Fine tip Dumont forceps | Fine Science Tools | 11252-00 | ||
10 μl Hamilton Syringe (1701RN; 26s/2”/2) | Hamilton Syringe Co. | 80030 | ||
1/16 inch Compression Fittings | Hamilton Syringe Co. | 55751-01 | ||
1/16 inch OD, 0.010 inch ID, PEEK Tubing | Supelco, Bellefonte, PA | Z226661 | ||
Dual RN Glass Coupler | Hamilton Syringe Co. | 55752-01 | ||
Mineral Oil Priming Kit: includes syringe, needles, rubber septa | Hamilton Syringe Co. | PRMKIT |