نموذج فأرة<em> في الرحم</em> زرع أداة متعددة الاستعمالات التي يمكن استخدامها لدراسة التطبيقات المحتملة السريرية لزرع الخلايا الجذعية والعلاج الجيني في الجنين. في هذا البروتوكول ، نقدم مقاربة عامة لأداء هذه التقنية
زرع الخلايا الجذعية والفيروسات في الرحم لديها امكانات هائلة لعلاج الاضطرابات الخلقية في الجنين البشري. على سبيل المثال ، في زرع الرحم (IUT) من الخلايا الجذعية المكونة للدم قد استخدمت بنجاح لعلاج المرضى الذين يعانون من نقص المناعة الشديد مجتمعة 1،2 ، وفي ظروف أخرى عديدة ، ومع ذلك ، فقد حاولت دون نجاح الجامعة الإسلامية للتكنولوجيا. 3 ونظرا لهذه النتائج المختلطة ، وتوافر نموذج غير بشرية فعالة لدراسة العواقب البيولوجية لزرع الخلايا الجذعية والعلاج الجيني أمر بالغ الأهمية لدفع عجلة هذا المجال. وقد استخدمنا وغيرهم من طراز الماوس الجامعة الإسلامية للتكنولوجيا لدراسة العوامل التي تؤثر في نجاح engraftment في الرحم المزروع الخلايا الجذعية المكونة للدم في الفئران البرية على حد سواء من نوع 4-7 وأولئك الذين يعانون من الأمراض الوراثية. 8،9 البيئة الجنين كما يوفر مزايا كبيرة لل نجاح العلاج الجيني في الرحم. على سبيل المثال ، أدى تسليم 10 الفيروسة الغدانية ، الغدة المرتبطة الفيروسية 10 ، 11 فيروسات ، وناقلات lentiviral 12،13 في الجنين في تنبيغ الأجهزة متعددة بعيدة من موقع الحقن مع التعبير الجيني على المدى الطويل. في الرحم ولذا قد يكون العلاج الجيني تعتبر استراتيجية العلاج المحتمل للاضطرابات جين واحد مثل ضمور العضلات أو التليف الكيسي. ميزة أخرى محتملة من الجامعة الإسلامية للتكنولوجيا هي القدرة على تحفيز جهاز المناعة على التسامح مستضد معين. كما رأينا في الفئران مع الهيموفيليا ، وإدخال عامل التاسع في وقت مبكر من نتائج التنمية في التسامح لهذا البروتين (14).
بالإضافة إلى استخدامه في التحقيق العلاجات البشرية المحتملة ، يمكن للنموذج الفأر من الجامعة الإسلامية للتكنولوجيا أن تكون أداة قوية لدراسة المسائل الأساسية في بيولوجيا الخلايا الجذعية والتنموية. على سبيل المثال ، يمكن للمرء تقديم مختلف الجزيئات الصغيرة للحث أو منع محددة التعبير الجيني في مراحل الحمل ومعرفة التعامل مع المسارات التنموية. ويمكن تقييم أثر هذه التعديلات في timepoints المختلفة بعد الزرع الأولي. علاوة على ذلك ، يمكن للمرء أن زرع الخلايا المحفزة أو نسب محددة السلف في البيئة لدراسة الأجنة الجذعية تمايز الخلايا المضيفة في بيئة غير المشع وغير قلق.
قدمت نموذج الفأر من الجامعة الإسلامية للتكنولوجيا بالفعل أفكارا عديدة داخل مجالات علم المناعة ، والتنموية ، وبيولوجيا الخلايا الجذعية. في هذا البروتوكول القائم على الفيديو ، ونحن وصف نهج خطوة بخطوة لأداء الجامعة الإسلامية للتكنولوجيا في الأجنة الماوس والخطوط العريضة للخطوات حاسمة والمزالق المحتملة لهذه التقنية.
أكثر من 50 عاما مضت ، بيلينجهام ، برنت ، ومدور المستخدمة في زرع الرحم في الفئران للحث على التسامح في مأمن من البروتينات الخارجية (16). ومنذ ذلك الوقت ، وقد استخدمت عدة تنويعات من هذه التقنية لمعالجة مسائل في علم المناعة وبيولوجيا الخلايا الجذعية.
<p class="j…The authors have nothing to disclose.
نود أن نعترف مصادر تمويلنا : معهد كاليفورنيا للطب التجديدي السريرية زميل المنحة التدريب (AN) ، المؤسسة الوطنية للعلوم (MW) ، ايرين Perstein جائزة (TCM) ، الكلية الاميركية للجراحين (TCM) ، جمعية طب الأطفال الأمريكية الجراحية ( الطب الصيني التقليدي) ، ومارس من الدايمات (TCM).
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Pipettes | Kimble | 71900-100 | ||
Pipette puller | Sutter Instruments Company | Model P-30 | ||
Microinjector | Narishige | IM-300 | ||
Pipette sharpener | Sutter Instruments Company | Model BV-10 |