HIV / AIDSの包括的＆コスト効率に優れた研究室の監視：アフリカのロールモデル

Summary

HIV /エイズの治療に抗レトロウイルス療法は、大規模に南アフリカで監視されます。フローサイトメトリーは、血液（CD45）、免疫（CD4）とウイルス負荷リンクされているCD38アッセイのために結合されます。 NHLS - SA研究所、ヨハネスブルグで記録された、これらの近代的な方法は、リソースが限られた診断のためのロールモデルとして、高まる地元の内部品質管理とコスト面で効率的です。

Abstract

経済的な大規模な診断テストのための南 - アフリカの役割モデルを表す - 我々は、aptラボサービスによって抗レトロウイルス療法（ART）の支援に関するビデオを提示する。時病理サービスの質は全体的にまだできない状況でも - 安価なARTがHIV血清陽性患者の生存率の見通しを変えたが、ARTのとどのようなコストでの検査によるモニタリングの必要性があるかどうか疑問がある低所得国における非常に低いです。適切な答えは、より良い調整と欧米諸国に見られるよりも厳しい社内品質評価と経済的に健全なサービスを確立することです。ウィットウォータースランド大学、ヨハネスブルグ、南アフリカ、で国立衛生研究所サービス（NHLS - SA）の位置で撮影したこの映像は、オリジナルの2色CD4 - CD45 PanLeucoGating戦略（PLG）を拡大するような協調スキームを提供します。したがって、ビデオプレゼンテーションの6つのモジュールは、シングルチューブで、血液学的免疫学的およびウイルス学関連のテストを組み合わせて4色フローサイトメトリーアッセイのシンプルさを明らかにする。これらのビデオモジュールは、（i）セットアップの楽器のこと、（ii）サンプルの調製、（ⅲ）ビーズカウントレートで各サンプルの絶対数と監視の品質をテストすること、（iv）ホワイトセルのheamatological CD45テストカウントと格差、（v）のCD4数、および（vi）CD8の活性化+ CD38ディスプレイにより測定されたT細胞は、ウイルス量に関連するパラメータ。潜在的なコスト削減には目を見張るものがある。この配置では、西部の研究室では、ともNHLS - SAのネットワーク内の他の研究所への技術移転に適用されるよりも厳格な品質管理と一日あたりの> 800から1000のテストを行うの実現可能性のための典型的な例です。現代の医療技術を導入することについて決定を下す義務を運ぶ専門のアドバイザーが、実験室の管理者や政策立案者は、作業負荷の大きな負担を持つ大規模な地域の研究室で行わ最新の技術的な詳細を確認する立場に頻繁ではありません。したがって、このビデオでは、これらの新たな展開の詳細が表示されます。

Protocol

はじめ

生物医学の分野で近代的な科学的な努力は、感染症のための効率的な診断の導入を含めて実用的なメリットにつながる。グローバルな旅行と世界¹の貧困被災地でのウイルスや細菌感染症の現在の壊滅的な影響による広がる病気の危険性のため、高品質で高速な診断が必要である。

資源貧困国で抗レトロウイルス療法でHIV陽性患者（ART）の治療は、正常に^2,3を導入されています。 ARTのプロトコルは現在、HIV +個人のための血清学的検査（I）に基づいている、（ⅱ）遺伝的薬物療法の1日1回投与の組み合わせは、"最初の行の"ARTとして使用し、（iii）のCD4および/またはウイルス量アッセイARTを開始するタイミングを決定する。プロトコルは、しかし、ARTのスコープが現在、さらにより高いCD4で以前のARTを開始するために、よりリラックスしたガイドラインに沿って拡大することができるように変更すると^、2をカウントしている。重要なことは、より高いCD4 +血の細胞/μLでARTを受けるHIV陽性患者の数を増やすと、さらにHIVワクチン^4、5の現在の不足にもかかわらず、HIV感染の広がりを遅くなることがあります。

したがって、HIV感染は、これまで以上に組織的な医療を必要とする、生存者の数の増加で慢性的な病気になろうとしていますが、アフリカでの臨床検査医学の悪い状態は依然として効果的なヘルスケア⁶の障壁が残る場合があります。短期的な補助金の提供は、持続可能なソリューションの^7-9を提供していない、と現在の規模で欧米諸国から提供されたHIV関連の助成金は永遠に^8,9続行できないことを強調する声があります。 2008年には15.6億米ドルは、低中所得国でエイズプログラムに投じられた、とこれらの約50％が北米、ソースなど、外部からのものであった。計算された傾向は、この支出は2-3倍高いレベルまで上昇することを示している、と流行はまだ2031年私達となることをすると、現在の全体的なアプローチ⁹の変更がある場合は除きます。

したがって、アフリカ諸国は、より良いHIV予防と賢くコスト削減⁹で貢献しなければならない。ここでは、日常の仕事のための最も最近の発明"ロールモデル"が設立され、資源の乏しい国々（アフリカやインドなどで）で導入されることを示唆している。これらは、科学者たちは完全に現在の国際的な支援の恩恵を受けることを学ぶだろうし、さらなるグローバルな発展に貢献することによって、日常の技術を向上させるために自分のスキルを活用する世界の領域です。

西洋医学では大規模な学術センターや病院での診断活動が頻繁に"departmentalized"されている、すなわち独立した"関心のゾーンは"中にhaemato -、ウイルスの、retroviro -、バクテリオ-、血清の断片化につながるさまざまな分野のために存在している可能性があります代わりに伝染病研究所の学際的な診断アッセイの最小セットを使って統一的アプローチを行うことを、免疫、および細胞学研究室。さらに、診断テストではまた、あまりにも複雑でコストがかかります。明らかに、このようなサービスは、より良い調整する必要があるだろうが、これらを統一する努力は西部の方向から完全に来ることはほとんどありません。したがって、このようなヨハネスブルグのウィットウォーターズランド大学と共同で国立衛生研究所サービス（NHLS - SA）、南アフリカ、などの大手の研究所や研究機関は、再度集中し、それらを改善、変更、さらに開発するために余分なタスクに直面している現代の技術に基づいて費用対効果の高い診断。

現在のビデオでは、HIV感染患者における抗レトロウイルス療法（ART）を監視するためのフローサイトメトリーの方法を説明します。この技術は、の組み合わせのために6つのモジュールで段階的な提示される関連haemato -、免疫、および^10のテストの再現性を確保するために不可欠な内部品質管理（QC）と組み合わせて、単一のチューブ内でウイルス学的ア ​​ッセイ、。ここで採用さモノクローナル抗体の使用は、すべて科学的に完全に確立されています。 CD45試薬は、HIV ^12月14日の主なターゲットとなっている"ヘルパー"T -リンパ球を列挙するCD4との組み合わせ^11月13日白血球数、です。それは、同じチューブ内でCD38活性化マーカーはHIVウイルス負荷（VL）に関連するアッセイ^15〜17とCD8 + T細胞上で検出されていることを"建設的なトリック"です。南アフリカの貢献を強調するために、我々はこれらの概念とその費用対効果に優れた実用的な組み合わせはすべての主要な西洋の技術を^{10,12,13,16,17}に基づいてNHLS -ウィッツコラボレーションで解決されていると指摘。

これらのアッセイは、組み合わせで実施、長期のARTを受けている患者の適切な監視のために必要としている。するときにコストefficieNCYが精査され、この協調フローサイトメトリー技術は^、16,18,19経済的であることが証明されつつ。これらのシングルチューブアッセイは、西部亜種以上と、別の楽器で行う同様のテストよりコスト削減を表し、および/または他の方法を使用して別の代理の試験として実施。これらの貯蓄は、議論に分けて表示されます。

シングルチューブで4色フローサイトメトリーを利用してこの基本的には単に技術の受け入れのために、それは、ビデオ形式で、技術的手順を示すことが不可欠です。現代の医療技術を導入することについて決定を下す義務を運ぶ専門のアドバイザーが、実験室の管理者や政策立案者は、作業負荷の大きな負担を持つ大規模な地域の研究室で行わ最新の技術的な詳細を確認する立場に頻繁ではありません。したがって、このビデオでは、各営業日^10,13,16,17> 1000臨床サンプルをテストするためのワークフローを最適化するために南アフリカに導入した新開発の詳細を示しています。

プロトコル

フローサイトメトリー

テストは4色のフローサイトメトリーによって行われたが、アッセイは、2つの平行管（下記参照）で、2色を用いて行うことができる。ベックマンコールターXL - MCL、安定した流体²¹のフローサイトメーターは、使用されていますが、同じ技術はまた、他のメーターにも適用可能である。記載された技術は、〜800から1100サンプル/日^10,13の大規模な毎日のワークロードを処理します。

モジュール1：楽器のセットアップ

起動時に、最後の患者のサンプルの完了時：毎日社内のメンテナンスは毎日二度実行して清掃しています。これは、真空ラインのフラッシングを含み、Clenz（5％次亜塩素酸ナトリウム、BC、マイ​​アミ、フロリダ州）を買収。また、各30チューブカルーセルClenzと蒸留水の最後にタンパク質の蓄積を最小限にするためにシステムを介して実行されます。

毎日起動真空と圧力の測定値がチェックされます。それは、バックグラウンドのカウントは（100秒で<100イベント）許容残ることが確認された。最初の血液サンプルを実行した後で、それは、シース液のアリコートにキャリーオーバーが<1％であることが確立されている。その後、レーザーのアライメントと蛍光感度がFlowCheck ²¹のサンプルを使用して、毎日監視されています。それは、平均チャネル番号が低い変動（半ピークCV値<2％）で（500 ± 50）一貫性があることが観察される。報酬は毎週チェックされ、フローセットビーズは、平均チャンネル値が予め設定された目標値²²の1％以内かどうかを確認するためにプロットされます。視覚的にリービー-ジェニングスプロット、平均チャネル番号と変動の半分ピーク係数（HPCV）で精度を確認する4つの蛍光チャネル（FL1 - FL4）の値が毎日表示されます。次に、CD4数の精度は、2つのCD4のレベルで確認されている。 PLG - CD4のテスト中に（IMMUNOTROL）血液のプロセスコントロールを安定化（100〜200 CD4細胞/μL、バッチに応じて、文献23）、通常の低い（450〜700 CD4細胞/μl）と低レベルを使用している。これらImmunotrol値は、国際的なBC - IQAPプログラム^24、英国NEQAS ²⁵とAFREQAS ²⁶によって要求されたとして、<5％の％のCVで、平均0.5 SD内であることが要求されます。それは、堅牢なフローサイトメータービデオに示すように、これらの単純な組織的な対策でこのようなCD4検査としておよび活性化マーカーCD38のために使用される蛍光強度の測定のための計数両方絶対セルに必要な安定性を維持できることが重要です。この安定性は、最近、他のメーターの^15,27を使用して、先行研究を確認詳細¹⁷に記載されています。

毎週のメンテナンス時にはリストモードデータ（LMD）ファイルは、将来の参照用にアーカイブされ、このアーカイブされた資料は、サイトメーターのハードドライブから削除されます。

毎月のメンテナンスは、試薬容器、シース、clenzと廃液タンクの清掃などを実施しています。すべてのフィルタも削除し、洗浄している間カルーセルモードのサンプルヘッドを洗浄する。このクリーニングはまた準備ステーションTQPrepとPrepPlus2（BC、フロリダ州）に拡張されます。手動の準備のために使用されるピペットは、少なくとも3ヶ月毎に社内で検証されていますが、ピペッティング誤差が疑われる場合はピペットは、直ちに是正処置のためにサービスから取得されます。六毎月のメンテナンスはベックマンコールター、SAで予定されている。

モジュール2：準備のサンプル

CD45/CD4二色PanLeucogatedプロトコル⁵のためベックマンコールターFlowCAREキット^28は、溶解-無洗浄の手順（IMMUNOPREP、ベックマンコールター、フロリダ州）で使用されています。とCD4 -フィコエリスリン（PE、オレンジ）、このキットには、CD45 -フルオレセインイソチオシアネート（FITC緑）が含まれています。フローカウントのビーズ^29がバルクで購入して、既知のnumbeなどの特別な演算子フレンドリーな役割を果たすために追加される知られているボリュームのビーズのRSは、サンプル³⁰にその場でピペッティングしている。これは、血液の量を提供するために使用したのと同じピペッティングで行われます。このように予想される範囲内のビーズ計数率（BCR）は、以下のモジュール3に記載されて、与えられたサンプルのピペッティングが正確に行われていることを示しています。重要なことは、ここに"前方にピペッティング"と呼ばれる簡単なピペッティングの方法は、、提供し、最も適しているビーズと血のボリュームが同じピペット、チップとし、同一の処理30と配信されます。我々は前方にピペッティングことがわかったの研究室の共同効率的変動^{（％CV）10,31,32}によって測定される調剤繰り返さ許容範囲の限度との再現性の中でピペッティングの目標を達成するための演算子に関して双方の間で最適な全体的な均一性が得られた。 ³²地元の会議で発表されたこの方法は、、南アフリカ国家認定制度（SANAS、www.SANAS.co.za）ガイドラインの下での使用が承認されています。ビーズのこのBCRの使用は、最も頻繁にそのようなBDS Trucountの準備として、凍結乾燥ビーズ製品はビーズの知られている数字が含まれている使用されるメソッドを数え、他のメスとは異なります。これらの製剤は、フローの計数率（FCR）法^20,31により流器の流路の安定性を文書化するために優れています。ここにそれが最高の絶対的な精度でこれらの試験管に血液量を提供するために不可欠であるため、それにもかかわらず、既製品のビーズを含むチューブの使用は、技術がより複雑なレンダリング。それは一般的にその目的のためにのみ"逆ペッティング"技術が適用されるトレーニングは、次の許容可能であることが合意された。私たちのBCRの方法は、したがって、安価な、より有益な、シンプルで、学習-のようにビデオに示すように簡単です- 。代替同様の方法で^10,31,32に比較して我々はまた見つける前方にピペッティングを使用して、オペレータがする可能性が低いことリバースピペッ​​ティングで内部機構の損傷や遠隔地では困難であり、再校正の必要性の両方につながることができるピペットにサンプルを吸引除去する。私たちのBCR法はまた、小規模から中規模のラボ（リスト1）で自動化されたピペッティングシステムの必要性がなくなります。

血液サンプルは、常にクラスIIバイオハザードキャビネットで処理されます。撮影中に大規模なノイズを避けるために、示されるビデオは、これらのキャビネットの外部の安全な材料で再現です。メーター上でPLG - CD4収集プロトコルは、時間が与えられた制限時間で停止または低CD4カウントのサンプルで精度を向上させるために5000リンパ球イベントを取得するために続けることができます。

モジュール3：ビーズカウントレート（BCR）

私たちのシステムまたは各コントロールのサンプルで監視してビーズのカウントレート（BCR）は、イベント/秒^{10,13,30,32,33}ビーズ式を使用して計算されます。平均は、SD及び％CV値は、BCRの外れ値^30を識別するためのシーケンスのプロットを生成するためにスプレッドシートで使用されています。これらは、サンプルを手動またはPrepPlus2自動化されたピペッティング器具^10を使用^して、ピペッティングの両方に適用される試料調製の検証（SPV）と呼ばれるピペット操作、処理及び分析の三つのシステムの最適な動作を確認してください。

買収時のBCRの結果は、直接モニターにリアルタイムで表示されています。 BCサイトメーターでの平均BCRの値は80 ± 5イベント/秒です。我々は、患者の結果がリリースされる前に異常なBCR - sが識別され、再実行していることを示している。決定木のアルゴリズムは（もref.10を参照）図1に図示されています。

計器の誤動作は、ピペッティングの傾向を検出するために長手方向の精度の検証（LPV）中に監視BCRの変動、パターンや突然の変化¹⁰によって示されている。流体の精密検証（FPV）は、ビーズの単一の希釈が潜在的に不適切に動作する器具¹⁰に流体不安定の兆候を確認するためにシリアル取得のための10本に等分され、社内の手順はオプションです。

モジュール4：CD45

我々の研究におけるルーチン絶対数のために毎月の校正済みの完全な血球数のアナライザLH - 750（ベックマンコールター）は、フローサイトメーターが比較される白血球の計数（WCC）のためのリファレンスとして毎日使用されています。フローサイトメーターでCD45によって生成されたWCC - sはまた安定ベックマンコールター5C全血細胞のコントロールの3つのレベルと比較して日々検証されます。フローCD45カウントと完全な血球数のアナライザ間WCC合意の許容限度は^、<5％10です。これは、リソースの制約がこのようなフローサイトメーターのような一つの楽器、より私たちのサービスで、より厳しいときことを示してCD4数を含めて臨床的に適切なWCCを提供するために十分であると思われる。

ホワイトCELL差動数は、特に単球数を評価する上で、異なる様々な血液学分析装置上で実行されます。差動CD45発現のパターンは、差動WCC ^11,12、34のフロー技術の古典的な使用です。フローサイトメーター由来CD45 WCCとの​​差分カウントは、正確で精密かつ堅牢であることが証明されているとして、これらは日常的にPLG - CD4の試験法に組み込まれ、また、追加料金なしで臨床医に利用できるようにすることができます。

異常なCD45パターンはPLG - CD4のプロトコルのCD45/side散布図に留意し、さらに臨床試験を要求するように染色された血液のフィルムで、フォローされています。このメソッドは、感染症（細菌やウイルス）、HIV陰性とHIV +患者の^34、35の両方で、白血病やリンパ腫を検出します。定期検査中にHIV陽性患者では完全な血球数が頻繁に血液学の研究室から要求されていないフォローアップ。率直にCD4数のために送られたサンプルで観測されたときにそのため異常なCD45のパターンが診断です。追加の利点は、正確な絶対的なCD4数がまだであっても、血液³⁵の白血病やリンパ腫の所見を有する患者では、作ることができることです。

フローCD45はよく血液を標準化するために適しています。血液学的楽器は大きく異なっている。我々は、血液分析装置^10,36を比較して標準化するためにWBCの格差のためのCD45ベースのフローサイトメトリーの品質管理を導入することを示唆している。

モジュール5：CD4

ベックマンコールターXLソフトウェアに導入さPLG - CD4のプロトコルは、8つのドットプロットで構成されています。これらの4のCD4数と4品質監視^12,13用ですを決定するために使用されています。このうち、図2に示すように、2つのドットプロットは重要です。破片、赤血球/幽霊と血小板は無視されている間、すべての白色細胞はCD45と側方散乱（領域のドットプロット2）を使用して識別されます。 CD45 +のイベントは、CD4 +リンパ球は、その明るいCD4の発現と低側方散乱（領域C）で識別される、ドットプロット3に転送されます。絶対的なCD4 +リンパ球数は、C領域とWCC（フローカウントのキャリブレーション領域でのF）でのイベントの数から計算されます。リンパ球のCD4の％の値は、領域Bのドットプロット2から取得されます。強くCD4 + Tリンパ球と弱くCD4 +単球は、試薬のカクテル（ref.13のレビュー）で余分なCD3 T細胞特異的抗体を使用することなくCD4 -蛍光強度と散乱の特徴によって区別されています。

モジュール6：CD8/CD38

CD8 - CD38染色はCD45-FITC/CD4-PE/CD8-ECD/CD38-PC5を使用して4色の染色の一部です。 CD4/CD45（フローケアPLG - CD4）上記と同じであり、追加した2つの余分な試薬がCD8-ECD/CD38-PC5 ¹⁷です。サイトメーターは、2色のみを実行している場合は、余分なチューブは再び溶解 - 無洗浄の手順を（IMMUNOPREP、ベックマンコールター、FL）を使用して、CD8-FITC/CD38-PE二色の染色を行うために追加されます。 CD4と同様のゲーティング戦略は、CD8 - ECD対側方散乱光（図3）とCD8 + T細胞を識別するために使用されます。 CD8 +リンパ球上のCD38発現は、蛍光強度（MFI）対細胞数^16,17を意味するCD38 - PC5の単一パラメータのヒストグラムとしてプロットされます。 CD38 MFIの値は、同じ患者のそれぞれの訪問のために順番にプロットされます。最初の訪問は、（治療前）と同じ人のCD38 MFIの他のすべての訪問は^16を比較するために"ベースライン"MFI値です。

モジュール1で説明したように、コントロールと機器の安定性は、レーザーのアライメントと電圧の安定性を監視するためのチェックフローの毎日の買収に基づいています。フローセットは、すべての4つの蛍光チャネル（上記参照）のための色補正を設定します。 Immunotrolは"負"プロセス制御のサンプルです。 "肯定的"のコントロールは、セルあたりの9 × 10 ³ CD38分子を発現する正常な血液中の単球であり、既知のHIV +のサンプルは、未処理^17。

南アフリカ国立衛生研究所サービス（SA - NHLS）のネットワークは研究室では採用しています

標準的な操作手順とトレーニングの材料を含む集中型のデータベースで70の研究室^13、33間で標準化品質管理方法。ネットワーク内の研究所は、技術^32,33をピペッティングの精査を含めての議論、さらにトレーニングと定期的なオーディションによって助けられています。品質評価プログラムは、毎月監視されます。この方法では、品質管理が地域的に委譲されていますが、高い基準がSA - NHLS QA部^13、26の貢献により維持されます。

リスト1 HIV疾患における協調メトリーで保存する潜在的なコスト。：

1. 代わりに、APの親しみやすさとサービス契約を結んでいる単一の楽器の使用、複数の血液学的、免疫学的およびウイルス学的楽器を撚る
2. 余分なコストがかからないとARTへの応答を予測するためとWCC、WBCの差分カウントのCD4検査とCD38MFI監視の両方を含むさまざまな場所からサンプルを送付することなく、単一のチューブ内でアッセイの性能、
3. CD38 MFIの報告とARTへの応答の即時報告、かなり伝統的なHIV VLレポート（リアルタイム）に相対的なターンアラウンドタイムを向上
4. 同じレポートのフォームの結果を合わせた評価の透明性と臨床使用
5. 自動分注機器の必要性は、"将来のピペッティング"BCRによって使用されており、サンプルが監視されているの簡単な方法として否定されることがあります
6. 動作中に、試料の不正確な処理が識別され、結果が認可される前に問題のあるテスト結果は整流されています
7. 激しいクラッシュする前に早期にサービスの予約につながる機器の誤動作のための積極的な予防管理
8. ルーチンサービスの活動中に白血病/リンパ腫の疑われていないケースを診断する
9. 白血病表現型とモニタリングのための同じような流れの技術の延長
10. そのように臨床またはCD38兆候がある場合にのみ、評価用のDBSを送信することによって、すべての患者と保存コストのHIV VLのテストのための乾燥血液スポットのストレージ（DBS）とCD38試験のコーディネーション
11. 結核アッセイでインターフェロン-γELISPOT法を置き換えるために同じような流れの技術
12. "ポイントオブケア"CD4テストを実行する周辺機器研究室用の品質管理
13. CD3に抗体などの"不要な"試薬のコストを節約し、サブセットマーカー（その代わりにCD38を購入）
14. BCRのテストのための安価なビーズの一括購入（代わりに高価なプリ注さカウント-チューブを購入する）
15. ネットワークで、営利企業との有利なバルク価格共同交渉

図1：サンプルは、テスト時に使用される決定木/アルゴリズムでは、ビーズカウントレート（BCR）の範囲外の結果を示しています。主なタスクは、断続的な体積の障害対ピペッティングエラーを除外することです。図は、エラーの推定原因を示しています。また、プロトコルのヒストグラムと統計が^10に影響されていることが示されている。

図2 CD45 - FITC（緑、x軸）が組み込まPLG CD4のプロトコルの例。対側方散乱（複雑さ、y軸）とCD4 - PEを、（オレンジ、X -軸）対側方散乱（複雑さ、y軸）。ゲート'にはリンパ球'B'の選択されたゲートと、総白細胞集団です。ゲート'は、CD4 +リンパ球ゲート'C'のを識別するためには、右上2番目の図に転送されます。

図3 CD45/CD4 panleucogatingアッセイの組み合わせ。。CD8/CD38アッセイ（図'4'と'6で）で（図'2'と'3'にも、図2を参照してください）。総白血球は（ゲート'）'（x'軸）と側方散乱（'y' -軸CD8 +リンパ球はCD8 - ECDの基礎上にゲートがここで、"図'4に転送されると、図のようにゲートは"D"）。その後、CD8 +細胞は、単一パラメータのダイアグラムでCD38 - PC5染色強度を視覚化するための図'6'に転送されます。これは、図'6'のパラメータ'G'として示されています。平均蛍光CD38 - PC5強度（MFI）が記録されます。 ARTでこの値は徐々に^16,17を減少させる。

Discussion

近年、慈善団体主導と助成金に割り当てられたプログラムは、高いHIV負担と地球の資源限られた地域で、いくつかの優れた臨床実践の確立を支援してきました。 ARTプログラムは死亡率を減らすことに成功していると、今より高いCD4で開始されているが^2,3をカウントします。これらの新たな対策は、HIV -特異的なワクチンが不足しているにもかかわらず、HIV感染^4,5の広がりを減少することを示す兆候はすでにあります。 ARTの患者を監視する際に、これらのテクニックが良く集中し、より費用対効果の高い西洋研究所（リスト1）で実行ルーチン実際に観察されたものよりなることができること私たちのビデオでは、文書。

このようなアフリカ主導のアプローチは、当技術分野で治療されたHIV感染は、慢性疾患になってきている時に検査サービスのアップグレードをサポートするために不可欠な場合があります。 ARTのようなモニタリングは、カウント正確なCD4とウイルス量、負荷に関連する技術、より要求の厳しいタスクは、単にART ¹⁶開始についての決定を支援するために任意のグループに患者を配置するためのCD4カウントを実行する必要があります。これらの診断の助けを借りて、すなわちCD8/CD38テストを使用して、それがART ^16,19の患者の> 60％で、VL -関連の監視コストを低減することができる。それは薬を服用でVLリバウンドおよび/ ​​または患者のコンプライアンスの欠如の初期兆候を拾う可能性が高いCD4数^{37、CD8/CD38}テスト^16,17であり、ないことを強調することも重要です。

協調費用対効果の高い中央のサービスの本質的な要素は、操作の技術的および医学的側面に精通している専門家や学術アドバイザーがサポートしている大規模な国や地域のネットワークの可用性です。これは、小規模なセンターのために励まし、教育と質の評価を提供し、これらはまた、"ポイントオブケア"サービスも含む南アフリカNHLSのネットワークの活動とCD4 - PLG.netの訓練スキーム^33、36で示されている。

重要なのは、中央およびポイントオブケア研究所の業務は相補的である。前者は費用対効果の高い大規模サービスの操作だけでなく、周辺の研究室^33,38のための基本的な/高度な訓練を提供する二重の役割を持っている、後者は、HIVを募集してARTの広がりを確認するために貢献しながら、+の対象となる患者を農村部の診療所など、大規模拠点からのART。ポイントオブケア診断がはるかに高価なことができると、自動的に精度が^38を保証するものではありませんので、ここではいくつかの注意が必要です。それは、2層システムを維持するために、どちらかのアームが細るできるようにすることなく、2つの層の間の連携を促進することが賢明です。

結論として、感染症の臨床管理の診断モニタリングの分野で必要なコスト削減が大幅に改善品質^13,39で安価、よりうまく調整近代的な技術を使用してAPTサービスによって達成することができます。実質的にすべての助成金はすぐにこれらの入念な事前にせずに豊かな国々から輸入されるとして、高価および/ ​​または未経験の方法で無駄になっているときによく組織国家（および地域）診断サービスの規定は、より良いシナリオを回避することによって^6-8をサポートする必要がありますプリエンプティブ建設的な精査。同様に、地元の医師や医療従事者の完全な関与と臨床治療試験のより柔軟な設計は不必要に頻繁におよび/ ​​または実験室試験³ -野心以上の削減につながるはずだ。このポリシーは、ARTを受けている患者のコーディネート臨床/臨床検査による評価で利用可能な正確な診断結果をより深く利用するために多くのチャンスを与えるだろう。これらのスマートな診断には、資源の乏しい国のために結核と既存の馴染みのフローサイトメトリー、プラットフォーム^40を使用して白血病の分野で^8を開拓することができます。