L'occlusion filamenteux de l'artère cérébrale moyenne est un modèle commun pour l'étude de l'AVC ischémique chez la souris.
L'AVC est une des causes les plus fréquentes de décès et d'invalidité chez les adultes, en particulier dans les pays hautement développés. Cependant, les options de traitement à ce jour sont très limitées. Pour répondre au besoin de nouvelles approches thérapeutiques, de recherche expérimentale course emploie fréquemment des modèles de rongeurs d'ischémie cérébrale focale. La plupart des chercheurs utilisent une occlusion permanente ou transitoire de l'artère cérébrale moyenne (ACM) à des souris ou des rats.
Occlusion proximale de l'artère cérébrale moyenne (MCA) via la technique de suture intraluminale (dits de filaments ou d'un modèle de suture) est probablement le modèle le plus fréquemment utilisé dans la recherche expérimentale course. Le modèle intraluminale MCAO offre l'avantage d'induire une ischémie transitoire ou reproductibles permanents du territoire MCA d'une manière relativement non invasive. Des approches intraluminale interrompre le flux sanguin de l'ensemble du territoire de cette artère. Filament d'occlusion proximale de débit ainsi arrestations pour les artères lenticulo-striées, qui fournissent les noyaux gris centraux. Filament l'occlusion de la MCA résultats dans les lésions reproductibles dans le cortex et le striatum et peut être soit permanent ou transitoire. En revanche, les modèles induisant distale (à l'embranchement des artères lenticulo-striée) MCA occlusion généralement épargner le striatum et concernent principalement le néocortex. En outre, ces modèles ne nécessitent craniectomie. Dans le modèle montré dans cet article, un fil enduit de silicone est introduit dans l'artère carotide commune et avancé le long de la carotide interne dans le cercle de Willis, où il bloque l'origine de l'artère cérébrale moyenne. Chez les patients, les occlusions de l'artère cérébrale moyenne sont parmi les causes les plus fréquentes d'accident vasculaire cérébral ischémique. Depuis des intervalles variables ischémique peut être choisi librement dans ce modèle selon le point de temps de reperfusion, des lésions ischémiques avec des degrés de gravité peut être produite. Reperfusion par l'enlèvement du filament occultant au moins partiellement les modèles de la restauration du flux sanguin après spontanés ou thérapeutiques (tPA) lyse d'un caillot de thrombo-emboliques chez les humains.
Dans cette vidéo, nous allons présenter la technique de base ainsi que les écueils majeurs et les facteurs de confusion qui peut limiter la valeur prédictive de ce modèle.
Le modèle de transitoire, occlusion proximale MCA 18,19 présenté imite ici l'un des types les plus communs de l'AVC ischémique chez les patients. Basé sur 20 heures de reperfusion variable, le modèle propose différentes qualités de dommages allant de l'attaque ischémique transitoire (AIT) à grande infarctus, y compris de grandes parties de l'hémisphère ischémique. Cela permet au chercheur d'étudier différents mécanismes physiopathologiques après un AVC. 20,21
La chirurgie peut être réalisée dans un court laps de temps et produit des lésions hautement reproductibles. Néanmoins, cela nécessite un contrôle approfondi des facteurs confondants. 22 petites différences dans la technique de l'exploitation peut tenir compte des effets différents sur l'infarctus. 23,24 De plus, en raison de variations dans l'anatomie vasculaire cérébral, différentes souches de souris montrent un résultat différent. 25,26 Body température affecte dommages neurologiques, avec une hypothermie menant à des lésions plus petites 27 et hyperthermie à plus de graves déficits. 28 En conséquence de contrôle de température, et l'entretien est très pertinente dans ce modèle. 29 En outre, la pression sanguine et les gaz du sang sont les facteurs de confusion importants du résultat et la nécessité de être surveillés. 30,31 L'utilisation de méthodes rapides et peu invasive (mesure non invasive de la pression artérielle, adapté et facilement accessible des sites de collecte du sang) est recommandé. Le choix de l'anesthésique est également très important, car certains peuvent avoir des effets neuroprotecteurs et / ou être vasodilatateurs, comme par exemple l'isoflurane. 32 Par conséquent, l'exposition à l'anesthésie doit être aussi courte que possible et standardisés. Nous excluons les animaux qui ont subi une intervention chirurgicale pendant plus de 15 min.
Rasage du site opératoire produit microabrasions et l'inflammation et des communiqués de fragments de cheveux. Cela peut encore augmenter l'inflammation et de favoriser une infection locale, qui peuvent avoir une incidence sur la physiopathologie course. Les conditions de logement, en particulier l'utilisation de l'enrichissement, pourrait affecter les résultats de l'AVC et devrait être standardisé et décrits dans les rapports de recherche. 6,33,34 L'utilisation de l'enrichissement de l'environnement et ses effets sur la reproductibilité est un sujet de discussion. 35 Un autre facteur de confusion important est le course des risques induits par l'infection en particulier après des durées plus longues de l'ischémie 36, ce qui conduit à une morbidité et une mortalité accrue supplémentaires. 37,38 Comme les infections deviennent symptomatiques à environ 3 à 5 jours, cela a des conséquences importantes pour le long terme le suivi de ces modèles.
Pour produire des résultats pertinents pour le développement de nouvelles stratégies de traitement de l'AVC, la normalisation et de contrôle de qualité est très importante dans la recherche préclinique course de translation 39 "Bonnes Pratiques de Laboratoire" 40,41 mandats.:
The authors have nothing to disclose.
Ce travail a été financé par le Programme de la Communauté européenne septième programme-cadre (FP7/2007-2013) sous convention de subvention n ° 201024 et n ° 202213 (Réseau European Stroke). Un financement supplémentaire a été donnée par le Bundesministerium für Bildung und Forschung (Centre for Stroke Research à Berlin), et la Deutsche Forschungsgemeinschaft (Exzellenzcluster NEUROCURE).
Les auteurs tiennent à remercier Mareike Thielke (Dép. des Experimental Neurology, Charité de Berlin) pour le soutien lors de l'opération et Elke Ludwig (services vidéo de la Charité) pour la production de l'animation.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Surgical scissors (skin cut) | FST | 14028-10 | ||
2 Dumont forceps (Medical #5 straight tip) | FST | 11253-20 | ||
Spring scissors (according to Vannas) | FST | 15000-00 | ||
Applying forceps for micro clamps | FST | 00072-14 | ||
Micro vascular clamp (e.g. S&G B1-V) | FST | 00396-01 | Also Serrefine possible | |
2 Hemostats according to Hartmann | FST | 13002-10 | ||
Needle holder (according Olsen-Hegar or other) | FST | 12002-14 | ||
Standard anatomical forceps (for wound closure) | FST | 11000-12 | ||
5/0 sutures | Suprama | for vascular ligatures | ||
6/0 sutures | Suprama | for skin suture, 5/0 also possible | ||
Lidocaine (e.g. Xylocain Gel 2%) | Astra Zeneca | or other local pain relief | ||
Dissecting microscope (stereo microscope), magnification 6x to max. 40x | Leica Zeiss | MZ6 Stemi2000C | ||
Cold light source | Leica | KL1500 | ||
Temperature feedback controlled heating pad system | FST | 21052-00 | With mouse pad and small probe | |
Anaethesia system for isoflurane | ||||
Isoflurane | Abott | |||
Veterinary Recovery Chamber | Peco Services | V1200 | Heated cage | |
8.0 nylon filament | Suprama | TEL181005 | for coating | |
Scalpel | For cutting filament in pieces | |||
Ruler | To cut correct length of filament | |||
Xantopren M Mucosa | Heraeus Kulzer | |||
Activator Universal Plus | Heraeus Kulzer | Optosil – Xantopren | ||
2 Dumont forceps (Medical #5 straight tip) | FST | 11253-20 | ||
A soft underlay for storing and grasping the uncoated filaments | e.g. swabs, foam, … | |||
Receptacle for new build filaments | e.g. petri dish, flexible foam,… |