Metoder för Kapacitans Patch Clamp inspelningar från Calyx
Summary
Abstract
Vi visar de grundläggande teknikerna för presynaptiska patch clamp inspelningen vid blomfoder av Held, ett däggdjur centrala nervsystemet nervändsluten. Elektriska inspelningar från presynaptiska terminalen möjliggöra mätningen av aktionspotentialer, kalcium strömmar kanal vesikelfusion (exocytos) och senare membran upptag (endocytos). Sammansmältningen av blåsor som innehåller signalsubstansen gör att vesikler membran som ska läggas till cellmembranet på blomfoder. Denna ökning av mängden cellmembranet mäts som en ökning i kapacitans. Den efterföljande minskning av kapacitansen indikerar endocytos, processen för membran upptag eller avskiljande från blomfoder membranet. Endocytos är nödvändigt för att upprätthålla struktur blomfoder och det är också nödvändigt att bilda blåsor som kommer att fyllas med signalsubstansen för framtida exocytos händelser. Kapacitans inspelningar på blomfoder av Held har gjort det möjligt att direkt och snabbt mäta vesikulär release och därefter endocytos i ett däggdjurs CNS nervändsluten. Dessutom kan motsvarande postsynaptiska aktiviteten mätas samtidigt med hjälp av parade inspelningar. Alltså en fullständig bild av presynaptiska och postsynaptiska elektriska aktiviteten i en centrala nervsystemet synapsen är möjligt med hjälp av denna beredning. Här är metoderna för bit beredning, morfologiska egenskaper för identifiering av calyces av Held, grundläggande patch fastspänning tekniker, och exempel på kapacitans inspelningar för att mäta exocytos och endocytos presenteras.
