טרנספורמציה של DNA פלסמיד לתוך החיידק שימוש בשיטה הלם חום
Abstract
טרנספורמציה של DNA פלסמיד לתוך החיידק בשיטה הלם חום היא טכניקה בסיסית של ביולוגיה מולקולרית. זה מורכב של החדרת מוצר פלסמיד או קשירת זרים לתוך חיידקים. זה פרוטוקול וידאו המתאר את השיטה המסורתית של שינוי באמצעות זמינים מסחרית חיידקים המוסמכת כימית Genlantis. לאחר דגירה קצרה קרח, תערובת של חיידקים כימית המוסמכת ו-DNA ממוקם ב 42 מעלות צלזיוס למשך 45 שניות (הלם חום) והניח ואז חזרה בקרח. SOC התקשורת מתווסף ותאי שינה מודגרת על 37 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות עם תסיסה. כדי להיות סמוך ובטוח של בידוד מושבות ללא תלות יעילות טרנספורמציה, שתי כמויות של חיידקים הם הפכו מצופים. פרוטוקול זה המסורתי יכול לשמש בהצלחה להפוך חיידקים המוסמכת ביותר זמינים מסחרית. Turbocells מ Genlantis יכול לשמש גם בפרוטוקול 3 דקות רומן שינוי, המתוארות במדריך ההוראה.
Cite This Article
Froger, A., Hall, J. E. Transformation of Plasmid DNA into E. coli Using the Heat Shock Method. J. Vis. Exp. (6), e253, doi:10.3791/253 (2007).