Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

Enfarktüsü bir murin Model Koroner Arter ligasyon ve intramiyokardiyal Enjeksiyon

Published: June 7, 2011 doi: 10.3791/2581
Automatic Translation
1, 1
1Department of Physiology, Brody School of Medicine, East Carolina University

Summary

Çok sayıda genetik manipülasyonlar ve / veya genler, proteinler, hücre ve / veya biyomalzemeler intramiyokardiyal enjeksiyonu, akut iskemi / reperfüzyon hasarı ve farelerde kronik remodeling çalışmaları zaman boyutu üzerine bindirilmiş. Bu video iskemi / reperfüzyon için mikrocerrahi prosedürleri, kalıcı koroner arter ligasyonu ve intramiyokardiyal enjeksiyon çalışmaları göstermektedir.

Protocol

  1. Steril cerrahi aletler (Tablo 1) ve 3 "pamuk uçlu aplikatörler steril bir underpad yerleştirilir. Boncuk sterilizatör (Germinator 500) açık.
  2. Fare (yaş:> 6 hafta ağırlık: 18g) bir ip tribromoethanol 20μl / g BW (süresi yaklaşık 40 dakika 250mg/kg) enjeksiyonu ile anestezi vardır.
  3. Farelerin ayak tutam steril bir yağ (Tears Yenilendi) yanıt vermeyen gözlerde kuruma ve göğsünün sol tarafında onları korumak için uygulanan deri kürk kaldırmak için tüy dökücü (örneğin Nair) ile kaplanmıştır.
  4. Tüy dökücü, ılık akan su ve betadin / alkol sürüntü cerrahi alanı dezenfekte etmek için kullanılır ile yıkanıp.
  5. Fare bir pleksiglas tablo sabit bir sıcak deltaphase izotermal ped üzerine yerleştirilir. Her bacak bandı kullanılarak hareketsiz ve üst çene tutmak için kalın bir iplik üst dişlerin altında yatay olarak yerleştirilir.
  6. Tablo dikey olarak yerleştirilmiş ve bir fiberoptik ışık transözofageal aydınlatma için boyun bölgesi üzerine doğrudan parlıyordu. Böylece trakea PE boru ekleme kolaylaştırmak için görüntülenebilmekte sağlayan, boğaz açma, iyi aydınlatılmış bir orifis olarak görülüyor böyle hassas bir şekilde yerleştirilmesi gerekir.
  7. Hızı 125 solunum / dakika;; pik inspiratuar basınç 10-12 cmH2O * not tüp daha sonra sürekli pozitif basınçlı ventilasyon (TOPO ventilatör yönetmek için ventilatör (% 95 O 2 /% 5 CO 2 bağlı) bağlı olduğu ayarları) zorlanma ve cinsiyet 1-3 ile değişir. Havalandırma senkron göğüs hareketleri tarafından onaylandıktan sonra, bağlantı, ameliyat sırasında ekstübasyon önlemek için ped bant ile sabitlenir.
  8. # 3 neşter kolu bağlı bir # 10 steril neşter bıçağı, göğüs cildi yukarı çekin dişli forseps kullanma ve uzak 1.5cm sternum için cilde paralel bir kesi yapmak için kullanılır.
  9. Kavisli Vanna microscissors pektoralis kasları kesmek ve küçük bir delik interkostal kas yapmak için kullanılır.
  10. Düz, künt microscissors 3 kaburga üzerinden kesmek için kullanılır.
  11. 9mm pediatrik oftalmik spekulum göğüs kafesi geri çekmek için kullanılır.
  12. Kavisli bir forseps kullanarak, kalp uzak perikard çekin ve hafifçe açık gözyaşı dişli forseps kullanabilir.
  13. Castroviejo iğne tutucu, 6mm konik noktası 3 / 8 iğne konuları kullanarak, sol ön inen koroner arter (kalbin uzun ekseni boyunca) altında 8-0 polietilen dikiş dik.
    1. Zamanlı reperfüzyon için çıkarılabilir geçici bir ligatür için, PE90, steril bir 0.5-1cm adet paralel olarak koroner arter kalp üzerine yerleştirilir. Ilk koroner arter altında döngüye olmuştur dikiş, sonra boru bağlıdır. Serbest bırakılmasını zamanda ligatür gevşetti. Istenen ve oklüzyon / reocclusion süresi 4 değiştirilebilir tekrar edilebilir. Protokol ve kullanılan anestezi türü uzunluğuna bağlı olarak, takviyesi gerekli olabilir.
    2. Kalıcı bir oklüzyon için, koroner arter altında bağcıklı ligatür sadece bağlıdır. Beyazlaşma ve diskinezi belirgin ve uzun dikiş sonunda 5-10 kesilir.
    3. Için intramiyokardiyal enjeksiyon (ler), Hamilton 30 gauge eğimli steril iğne ile steril bir şırınga ligatür sağ tarafında yaralanma alanının üstünde kalp üssü haline getirilmiştir. Iğne sonra yaralanma alana, gelişmiş ve biraz bu yüzden konik yaklaşık sınır bölgesi görülebilir içine kapanık. Bazı çözüm şırınga (2-3μl) kalp içine enjekte edilir ve iğne yerinde tutulur. Şırınga, başka bir 1-3mm geri çekilir ve çözüm geri kalanı enjekte edilir. Çözümü ile oluşan bleb çözülene kadar şırınga yerinde tutulur. İğne sonra kaldırılır. Herhangi bir kanama varsa kanama 5-7 durana kadar, bir pamuk uçlu bir aplikatör yavaşça iğne ekleme sitesi üzerine basıldığında.
  14. Miyokard manipülasyonlar tamamlandıktan sonra, kaburga retraktörlere kaldırılır ve göğüs boşluğu 6-0 surgipro sütür kullanarak 2-3 yatak dikişlerle kapatılır.
  15. İki-üç yatak dikişlerle sonra 1-3 damla steril serum fizyolojik içinde% 0.25 marcaine 01:10 (0.1ml/25g fare), pektoral kaslar kapatmak için yapılır kas uygulanır ve daha sonra 2-3 yatak sütür yapılır cilt kapatın.
  16. Fare ventilatör kaldırılır. Sığ, hızlı, bir kez ritmik nefes doğrulanır, fare ekstübe edilebilir.
  17. 0.5 ml ılık steril serum fizyolojik dorsal subkutan alanı içine enjekte edilir ve bu hareketlilik (1 saat minimum) yeniden kazanıncaya kadar fareyi bir kafes içinde bir ısıtıcı yerleştirilir.
  18. Hayatta kalma deneyler, farelerin kafesleri içine geri yerleştirilir ve kurban zamanına kadar vivaryum döndü. Ilk 2 gün boyunca, nemlendirilmiş bir besindir(bu yüzden, ağrıya neden olabilir ulaşmak zorunda değilsiniz) besleme kolaylaştırmak için kafes katta yerleştirilmiş ve buprenorfin her 6-12saat uygulanmalıdır. Post-operatif bakım yeterli hareketlilik, bakım ve beslenme alışkanlıkları da doğrulamak için ilk hafta için günlük izleme içerir.
  19. Cerrahi aletler, etanol ile temiz sildi ve sonraki ameliyat öncesi boncuk sterilizatör içine eklenir.
  20. Kurban zamanda, fare pentobarbital sodyum ile anestezi (55-65 mg / kg 65mg/ml). Anestezi yeterli bir düzlem elde edilir, göğüs boşluğu açıldı.
  21. Kalp hala atıyor iken, 23 gauge soğuk potasyum klorür içeren iğne (KCl, 30mm) veya 2,3-butanedione ile bir şırınga monoxime (DGM; 10mM) ponksiyon ventrikül posterior bazal bölge ve çözüm için kullanılır. kalp diyastol tutuklandı kadar yavaşça odasına enjekte edildi.
  22. Kalp kaldırıldıktan sonra, PBS içeren bir şırınga retrograd kalan kan kaldırmak için kalp durulama serpmek için kullanılır. Akut çalışmalar için, reperfüzyon dönemi sonunda, LAD oklüzyonu orijinal noktada yeniden bağlandı. % 1 Evan mavi içeren bir çözüm aort içine enjekte edilir. Kalp ayıklanır sonra, 2,3,5-triphenyltetrazolium klorür% 1 inkübe 3 bölüme eşit kalınlıkta enine kesilmiş ve morfometrik analizler 11 için görüntülü. Kronik çalışmalar için, kalp daha sonra daha sonra rutin prosedürlere göre işleme ve gömülü fikse. Slaytlar histolojik sonra lekeli ve 9,10,12 (filiz, NIH Image J veya Image Pro Plus kullanarak) morfometrik analizler için görüntülü olabilir.

Temsilcisi Sonuçlar:

doğru bir şekilde yapılırsa, farelerde sağkalım oranları (erkek yaşı 8-10 hafta, 22-28g; kadın: yaşı 10-12 hafta, 20-26g):% 90 üzerinde akut iskemi / reperfüzyon ve iskemik ön deneyler, üzerinde % 85, kalıcı arter ligasyonu çalışmaları ve intramiyokardiyal enjeksiyonlar için yaklaşık% 80. Erken yaralanma olduğundan daha kolay görünür metabolik değişiklikler, iskemi / reperfüzyon ziyade yapısal, infarkt büyüklüğü ve iskemik ön deneyler LAD tarafından sağlanan kalp serpmek aort içine% 1 Evan mavi boya beslerken tarafından yapılır ( Şekil 1A). Kalp yarısında kaldırılır ve enine kesilmiş sonra, doku infarkt (Şekil 1B) ölçmek için 2,3,5-triphenyltetrazolium klorür% 1 çözüm inkübe edilir. Alanları filiz veya aynı büyütme görüntülü bir mikrometre kullanarak kalibre edilebilir NIH görüntüleme yazılımı kullanılarak ölçülür. Bu numaralar, risk / sol ventrikül ve infarkt riski 11 / alan boyutu alanı hesaplamak için kullanılır . Gerilme farklılıklar, kalp ağırlığı, vücut ağırlığı ya da karşılaştırma amaçlı tibia uzunluğu bu önlemleri normalleştirmek için bakım alınmalıdır vücut ağırlığı ve kalp boyutu ve bu nedenle varyasyonlar neden olabilir.

Böyle bir nekroz olarak brüt yapısal değişiklikler kalıcı arter ligasyonu, duvar incelmesi ve oda dilatasyon. Infarkt ve kalıcı oklüzyon modeli (Şekil 2A) sol ventrikül, oda alanı, septal duvar ve sol ventrikül serbest duvar kalınlığı göre nekroz tedavi ve / veya zaman etkilerinin karşılaştırılması da filiz veya NIH görüntüleme kullanılarak ölçülebilir yazılım. Picrosirius, kırmızı / hızlı yeşil (Şekil 2B) Kollajen boyama duvar sertleşme 8-10 fonksiyonel indeksleri ilişkilidir insterstitial fibrozis ölçmek için kullanılabilir . Şekil 3'te görüntü dağıtım kalıcı arter ligasyonu sonrası kalp sınır bölgesine enjekte 6ul çözüm (Evan mavi) temsil eder. Yanı sıra temel doğru olarak ve aynı zamanda transmurally yaralanma yönde ilerler dikkat edin.

Şekil 1
Şekil 1. A. Evan 'in Blue önce eksizyon aort enjekte Bu görüntü kalp (lekeli) ve tıkalı alanı (lekesiz) perfüze bölgeleri gösterir. B. Evan' akut iskemi / reperfüzyon hasarı Mavi ve TTC boyama. Bu unoccluded bölgelerinde metabolik canlı doku TTC boyama (kırmızı) gibi boyanmış mavi boya dağılımını gösteren temsili resim (20x). Nekrotik alanlar leke yoktur ve bu yüzden (ana hatları) soluk kalır.

Şekil 2
Şekil 2. A. Hematoksilen ve eosin boyası Bu post-MI (20x), 4 gün infarkt bölgenin boyunca enine kesilmiş bir fare kalp H & E boyama temsil eden bir görüntü (20x) . * Doku nekrozu gösterir, oklar granülasyon dokusu, RV = sağ ventrikül ve LV = sol ventrikül B. Picrosirius kırmızı ve yeşil hızlı leke Bu birpicrosirius kırmızı / 4 hafta post-MI fare kalp bir kesit hızlı yeşil boyama temsilcisi görüntü (20x). Sitoplazma lekeler yeşil ve kollajen lifleri kırmızı.

Şekil 3
6ul intramiyokardiyal enjeksiyon aşağıdaki Şekil 3. Evan Mavi boya leke dağılımı. Bu kalp koroner arter ligasyonu (12x) hemen ardından sınır bölgesi 6ul intramiyokardiyal enjeksiyon boyunca küresel ve transmural Evan Mavi boya dağılımını gösteren temsili bir resim.

Discussion

Koroner kalp hastalığı, epidemiyolojik ve mali açıdan önemli bir halk sağlığı problemi olmaya devam etmektedir. Halen önemli bir temel araştırma, yaralanma ve yeniden yapılanma devam hangi mekanizmalar ve klinik kullanım için geliştirilen isteniyorsa potansiyel terapötikler bu süreçleri modüle anlamak için gerekli. Kemirgenler en sık kullanılan ve genetik olarak değiştirilmiş fareler geniş bu türün daha cazip bir model kılar.

Fare ve diğer türler arasında farklılıklar olmasına rağmen, bir fare modeli pek çok avantajı vardır. Basit bir diseksiyon kapsamı veya büyüteç kullanın ve iyi aydınlatılmış koşullarda damar kolayca görülebilir (damarsal detaylı brüt anatomisi, Salto-Tellez ve ark., 2004 13). 25g bir fare toplam kan hacminin 2ml 14 daha az olduğundan post-operatif mortalite riski azaltmak için, büyük damarların kesilmesinin önlemek için çok önemlidir. , Aşırı kanama oluşur durumunda, basınç veya belirlemekte koterizasyon nazik uygulama, kanamayı durdurmak için kullanılabilir.

Bu işlem aynı zamanda çeşitli şekillerde değiştirilebilir. Örneğin, fare, izofluran, ketamin / xylazine veya sodyum pentobarbital ve uygun seçimi protokol 15-18 süresi tarafından belirlenir kullanarak narkoz olabilir . Toe-tutam refleks anestezi derinliği en yaygın olarak kullanılan bir endeks. Ayrıca, uzun vadede hayatta kalma olasılığını artırmak için, bazı araştırmacılar, öldürücü aritmi 19,20 ancak, bu son zamanlarda akut antiapoptotik özellikleri olduğu gösterilmiştir edildiğini dikkate alınması gerekir insidansını azaltmak için, lidokain gibi antiaritmik ilaçlar modeli 21. Ayrıca, ameliyat sonrası ağrıyı azaltmak için analjezikler, buprenorfin gibi cerrahi 3,16,17,22,23 sonra ilk 48 saat boyunca uygulanmalıdır. Ameliyat sırasında vücut ısısı (özellikle uzun protokoller için) korumak için, bir ısıtma yastığı ile seri bir rektal prob izotermal ped yerine sık sık kullanılır. Kalıcı oklüzyon, infarkt boyutunu ligatür yerini ayarlayarak değişiklik olabilir; tıkanıklığı (ler) ve reperfüzyon (ler) süresi değişmiş olabilir: iskemi / reperfüzyon ve / veya iskemik ön veya postconditioning intramiyokardiyal enjeksiyonları (örn. hücreleri, proteinler), 1-3 enjeksiyon yerlerde olması ve enjeksiyon başına hacmi 15 ul 24 kadar olabilir. Hücreleri enjekte ediliyor, iğne gauge iğnenin iç çapı Sheering önlemek için yeterince büyük 5,25,26 hücrelerin büyüklüğüne göre seçilmelidir (genellikle 26-30). Cerrahi ile tetiklenen inflamatuvar süreçler nedeniyle boşa önlemek için, bazı araştırmacılar, 27-29 ameliyat sonrası herhangi bir noktada kapalı göğüs fare kalpleri kapamak ve reperfuse ex vivo manipüle bir tuzak kullanılarak bildirdin . Daha yakın zamanlarda, Gao ve ark. 30 geçici ve kalıcı oklüzyon havalandırma için gerek kalmadan yapılabilir ve bir kaç laboratuarları, kapalı göğüs intramiyokardiyal enjeksiyonları 25,31 gerçekleştirmek için ultrason kullanmaya başlamışlardır olduğunu göstermiştir .

Farelerde koroner arter ligating fizibilite gösteren ilk çalışma 1954 32 Johns ve Olson tarafından yayımlanan bu yana, diğerleri bu model kabul edilen ve miyokard hasarı ve remodeling 3,33-45 çeşitli yönlerini incelemek amacıyla bir değişiklik. Büyüklüğü, üreme kapasitesi, satın alma ve bakım için nispeten daha az harcama açısından fareler doğası bu türün geniş bir yelpazede fizyolojik ve patofizyolojik çalışmalar için cazip bir araç haline getirmektedir. In vivo gelişmeler 46-49 görüntüleme teknolojisinin yanı sıra minyatür, gerçekleştirmek ve büyük ölçekli genomik ve proteomik, uyuşturucu taraması, hücre-bazlı ve / veya protein tedavilerin etkinliği yanı sıra kombine biyomalzemeler 50-64, analiz etmek anlamına gelir. giderek daha geniş, her yerde veya doku özel transgenik veya mutant / nakavt fareler tarafından sağlanan genetik manipülasyon, miyokard infarktüsü fare modeli şüphesiz, akut kardiyak yaralanma ve uzun vadeli remodeling değerlendirilmesinde çok değerli bir araç olmaya devam edecektir. Bu nedenle, bu deneyler gerçekleştirmek için güvenilir ve tekrarlanabilir olması tartışılmaz bir değeri yoktur.

Disclosures

Bu hayvan protokolü tarafından onaylanmış ve East Carolina Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından belirlenen kurallara ve yönetmeliklere uygun olarak.

Acknowledgments

Araştırma ve Lisansüstü Eğitimi Anabilim Dalı, uyanıklık ve yardım için benim araştırma ve Karşılaştırmalı Tıp Bölümü destek için fon sağlamak için kabul etmek istiyorum. Ben de onların yardım için verdikleri destek ve rehberlik için Fizyoloji Anabilim Dalı yanı sıra benim laboratuvarı öğrencilerin ve teknisyenler tanımak istiyorum. Son olarak, ben fare mikrocerrahi öğrendim bu süre zarfında eğitim fırsatı için post-doktora hocası Dr Charles E. Murry, teşekkür etmek istiyorum.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Long Vanna Scissors George Tiemann & Co. 160-159
Micro Dissecting Scissors George Tiemann & Co. 160-161
Forceps – straight, 1x2 teeth George Tiemann & Co. 105-205
Scalpel handle #3 George Tiemann & Co. 105-64 #10 sterile blade
Forceps – half curved serrated George Tiemann & Co. 160-19
Tissue Scissors George Tiemann & Co. 105-410
Castroviejo Needle Holder Miltex Inc. 18-1828
Cook Eye Speculum Miltex Inc. 18-63
Surgipro II 8-0 Suture Express VP-900-X
Prolene 6-0 Suture Express 8776
Germinator 500 Bead Sterilizer Cellpoint Scientific 65369-1
Deltaphase isothermal pad Braintree Scientific, Inc. 39DP
Hamilton syringe - 25μl Hamilton Co 80430
30 gauge beveled needle Hamilton Co 7803-07
Ventilator Kent Scientific TOPO

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Reinhard, C. Inbred strain variation in lung function. Mamm Genome. 13, 429-437 (2002).
  2. Schulz, H. Respiratory mechanics in mice: strain and sex specific differences. Acta Physiol Scand. 174, 367-375 (2002).
  3. Tarnavski, O. Mouse cardiac surgery: comprehensive techniques for the generation of mouse models of human diseases and their application for genomic studies. Physiol Genomics. 16, 349-360 (2004).
  4. Klocke, R., Tian, W., Kuhlmann, M. T., Nikol, S. Surgical animal models of heart failure related to coronary heart disease. Cardiovasc Res. 74, 29-38 (2007).
  5. Murry, C. E. Haematopoietic stem cells do not transdifferentiate into cardiac myocytes in myocardial infarcts. Nature. 428, 664-668 (2004).
  6. Nussbaum, J. Transplantation of undifferentiated murine embryonic stem cells in the heart: teratoma formation and immune response. Faseb J. 21, 1345-1357 (2007).
  7. Reinecke, H., Minami, E., Virag, J. I., Murry, C. E. Gene transfer of connexin43 into skeletal muscle. Hum Gene Ther. 15, 627-636 (2004).
  8. Virag, J. A. Attenuation of Myocardial Injury in Mice with Functional Deletion of the Circadian Rhythm Gene mPer2. Am J Physiol Heart Circ Physiol. , (2008).
  9. Virag, J. A. Fibroblast growth factor-2 regulates myocardial infarct repair: effects on cell proliferation, scar contraction, and ventricular function. Am J Pathol. 171, 1431-1440 (2007).
  10. Virag, J. I., Murry, C. E. Myofibroblast and endothelial cell proliferation during murine myocardial infarct repair. Am J Pathol. 163, 2433-2440 (2003).
  11. Cozzi, E. Ultrafine particulate matter exposure augments ischemia-reperfusion injury in mice. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 291, 894-903 (2006).
  12. Virag, J. A. Attenuation of myocardial injury in mice with functional deletion of the circadian rhythm gene mPer2. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 298, 1088-1095 (2010).
  13. Salto-Tellez, M. Myocardial infarction in the C57BL/6J mouse: a quantifiable and highly reproducible experimental model. Cardiovasc Pathol. 13, 91-97 (2004).
  14. Diehl, K. H. A good practice guide to the administration of substances and removal of blood, including routes and volumes. J Appl Toxicol. 21, 15-23 (2001).
  15. Lichtenberger, M., Ko, J. Anesthesia and analgesia for small mammals and birds. Vet Clin North Am Exot Anim Pract. 10, 293-315 (2007).
  16. Davis, J. A. Mouse and rat anesthesia and analgesia. Curr Protoc Neurosci. Appendix 4, Appendix 4B-Appendix 4B (2008).
  17. Flecknell, P. A. Anaesthesia of animals for biomedical research. Br J Anaesth. 71, 885-894 (1993).
  18. Kolk, M. V. LAD-ligation: a murine model of myocardial infarction. J Vis Exp. , (2009).
  19. Kinoshita, H. T-type Ca2+ channel blockade prevents sudden death in mice with heart failure. Circulation. 120, 743-752 (2009).
  20. Mulder, P. Increased survival after long-term treatment with mibefradil, a selective T-channel calcium antagonist, in heart failure. J Am Coll Cardiol. 29, 416-421 (1997).
  21. Kaczmarek, D. J. Lidocaine protects from myocardial damage due to ischemia and reperfusion in mice by its antiapoptotic effects. Anesthesiology. 110, 1041-1049 (2009).
  22. Blaha, M. D., Leon, L. R. Effects of indomethacin and buprenorphine analgesia on the postoperative recovery of mice. J Am Assoc Lab Anim Sci. 47, 8-19 (2008).
  23. Flecknell, P. A. Analgesia of small mammals. Vet Clin North Am Exot Anim Pract. 4, 47-56 (2001).
  24. Dries, J. L., Kent, S. D., Virag, J. A. Intramyocardial administration of chimeric ephrinA1-Fc promotes tissue salvage following myocardial infarction in mice. J Physiol. 589, 1725-1740 (2011).
  25. Springer, M. L. Closed-chest cell injections into mouse myocardium guided by high-resolution echocardiography. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 289, 1307-1314 (2005).
  26. Wang, C. C. Direct intramyocardial injection of mesenchymal stem cell sheet fragments improves cardiac functions after infarction. Cardiovasc Res. 77, 515-524 (2008).
  27. Nossuli, T. O. A chronic mouse model of myocardial ischemia-reperfusion: essential in cytokine studies. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 278, 1049-1055 (2000).
  28. Kim, S. C. Toll-like receptor 4 deficiency: smaller infarcts, but no gain in function. BMC Physiol. 7, 1472-6793 (2007).
  29. Fazel, S. S. Activation of c-kit is necessary for mobilization of reparative bone marrow progenitor cells in response to cardiac injury. Faseb J. 22, 930-940 (2008).
  30. Gao, E. A novel and efficient model of coronary artery ligation and myocardial infarction in the mouse. Circ Res. 107, 1445-1453 (2010).
  31. Fujii, H. Ultrasound-targeted gene delivery induces angiogenesis after a myocardial infarction in mice. JACC Cardiovasc Imaging. 2, 869-879 (2009).
  32. Johns, T. N., Olson, B. J. Experimental myocardial infarction. I. A method of coronary occlusion in small animals. Ann Surg. 140, 675-682 (1954).
  33. Frangogiannis, N. G. The immune system and cardiac repair. Pharmacol Res. 58, 88-111 (2008).
  34. Dobaczewski, M., Frangogiannis, N. G. Chemokines and cardiac fibrosis. Front Biosci (Schol Ed). 1, 391-405 (2009).
  35. Willis, M. S., Townley-Tilson, W. H., Kang, E. Y., Homeister, J. W., Patterson, C. Sent to destroy: the ubiquitin proteasome system regulates cell signaling and protein quality control in cardiovascular development and disease. Circ Res. 106, 463-478 (2010).
  36. Nithipatikom, K., Gross, G. J. Review article: epoxyeicosatrienoic acids: novel mediators of cardioprotection. J Cardiovasc Pharmacol Ther. 15, 112-119 (2010).
  37. Palaniyandi, S. S., Sun, L., Ferreira, J. C., Mochly-Rosen, D. Protein kinase C in heart failure: a therapeutic target. Cardiovasc Res. 82, 229-239 (2009).
  38. Michael, L. H. Myocardial ischemia and reperfusion: a murine model. Am J Physiol. 269, 2147-2154 (1995).
  39. Patten, R. D. Ventricular remodeling in a mouse model of myocardial infarction. Am J Physiol. 274, 1812-1820 (1998).
  40. Paigen, K. A miracle enough: the power of mice. Nat Med. 1, 215-220 (1995).
  41. Kogan, M. E., Belov, L. N., Leont'eva, T. A., Zolotareva, A. G. Modeling of myocardial pathology in mice with the surgical methods. Kardiologiia. 17, 125-128 (1977).
  42. Tarnavski, O. Mouse surgical models in cardiovascular research. Methods Mol Biol. 573, 115-137 (2009).
  43. Wong, R., Aponte, A. M., Steenbergen, C., Murphy, E. Cardioprotection leads to novel changes in the mitochondrial proteome. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 298, 75-91 (2010).
  44. Dobaczewski, M., Gonzalez-Quesada, C., Frangogiannis, N. G. The extracellular matrix as a modulator of the inflammatory and reparative response following myocardial infarction. J Mol Cell Cardiol. 48, 504-511 (2010).
  45. Zhao, Z. Q. Inhibition of myocardial injury by ischemic postconditioning during reperfusion: comparison with ischemic preconditioning. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 285, 579-588 (2003).
  46. Thibault, H. Acute myocardial infarction in mice: assessment of transmurality by strain rate imaging. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 293, 496-502 (2007).
  47. Scherrer-Crosbie, M. Three-dimensional echocardiographic assessment of left ventricular wall motion abnormalities in mouse myocardial infarction. J Am Soc Echocardiogr. 12, 834-840 (1999).
  48. Stypmann, J. Echocardiographic assessment of global left ventricular function in mice. Lab Anim. 43, 127-137 (2009).
  49. Pistner, A., Belmonte, S., Coulthard, T., Blaxall, B. Murine echocardiography and ultrasound imaging. J Vis Exp. , (2010).
  50. Zimmermann, W. H. Heart muscle engineering: an update on cardiac muscle replacement therapy. Cardiovasc Res. 71, 419-429 (2006).
  51. Mangi, A. A. Mesenchymal stem cells modified with Akt prevent remodeling and restore performance of infarcted hearts. Nat Med. 9, 1195-1201 (2003).
  52. Chavakis, E., Koyanagi, M., Dimmeler, S. Enhancing the outcome of cell therapy for cardiac repair: progress from bench to bedside and back. Circulation. 121, 325-335 (2010).
  53. Mirotsou, M., Jayawardena, T. M., Schmeckpeper, J., Gnecchi, M., Dzau, V. J. Paracrine mechanisms of stem cell reparative and regenerative actions in the heart. J Mol Cell Cardiol. , (2010).
  54. Fromstein, J. D. Seeding bioreactor-produced embryonic stem cell-derived cardiomyocytes on different porous, degradable, polyurethane scaffolds reveals the effect of scaffold architecture on cell morphology. Tissue Eng Part A. 14, 369-378 (1089).
  55. Lee, R. J. Stem cells for myocardial repair and regeneration: where are we today. Methods Mol Biol. 660, 1-6 (2010).
  56. Segers, V. F., Lee, R. T. Protein Therapeutics for Cardiac Regeneration after Myocardial Infarction. J Cardiovasc Transl Res. , (2010).
  57. Webber, M. J. Capturing the stem cell paracrine effect using heparin-presenting nanofibres to treat cardiovascular diseases. J Tissue Eng Regen Med. 10, (2010).
  58. Kofidis, T. Novel injectable bioartificial tissue facilitates targeted, less invasive, large-scale tissue restoration on the beating heart after myocardial injury. Circulation. 112, I173-1177 (2005).
  59. Vunjak-Novakovic, G. Challenges in cardiac tissue engineering. Tissue Eng Part B Rev. 16, 169-187 (2010).
  60. Guyette, J. P., Cohen, I. S., Gaudette, G. R. Strategies for regeneration of heart muscle. Crit Rev Eukaryot Gene Expr. 20, 35-50 (2010).
  61. Menasche, P. Cardiac cell therapy: Lessons from clinical trials. J Mol Cell Cardiol. , (2010).
  62. Ott, H. C., McCue, J., Taylor, D. A. Cell-based cardiovascular repair--the hurdles and the opportunities. Basic Res Cardiol. 100, 504-517 (2005).
  63. Terrovitis, J. V., Smith, R. R., Marban, E. Assessment and optimization of cell engraftment after transplantation into the heart. Circ Res. 106, 479-494 (2010).
  64. Nelson, T. J. Repair of acute myocardial infarction by human stemness factors induced pluripotent stem cells. Circulation. 120, 408-416 (2009).

Tags

Aşılama Tıp Sayı 52 infarkt iskemi / reperfüzyon fare intramiyokardiyal enjeksiyon koroner arter kalp,
Enfarktüsü bir murin Model Koroner Arter ligasyon ve intramiyokardiyal Enjeksiyon
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Virag, J. A., Lust, R. M. Coronary… More

Virag, J. A., Lust, R. M. Coronary Artery Ligation and Intramyocardial Injection in a Murine Model of Infarction. J. Vis. Exp. (52), e2581, doi:10.3791/2581 (2011).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter