Summary
ركود صفراوي هو شرط السريرية شيوعا التي تواجهها من قبل كل من الجراحين وأخصائي أمراض الباطنة. ويمكن خلق نموذج الركودي الفئران عكسها تكون صعبة نظرا لصغر حجمها والتشريح hepatopancreatobiliary فريدة من نوعها في الفئران. هذه المقالة فيديو يوضح إنشاء نموذج الركودي عكسها.
Abstract
ركود صفراوي هو شرط السريرية شيوعا التي تواجهها من قبل كل من الجراحين وأخصائي أمراض الباطنة. يمكن أن يسبب ركود صفراوي التغيرات الفسيولوجية المختلفة ويؤثر على الحالة التغذوية ونتائج العمليات الجراحية. دراسة التغيرات الفيزيولوجية المرضية التي تحدث في الكبد والأجهزة الأخرى ذات الأهمية. وقد أجريت دراسات عديدة في نماذج الفئران الركودي.
استخدمنا فأر الركودي عكس النموذج في دراستنا الاخيرة تبحث في دور ميثيل في الإسكيمية الاصابة ضخه. وقد وصفت تقنيات مختلفة لخلق نموذج الركودي عكسها. ويمكن خلق نموذج الركودي الفئران عكسها تكون صعبة نظرا لصغر حجمها والتشريح hepatopancreatobiliary فريدة من نوعها في الفئران. هذه المقالة فيديو يوضح إنشاء نموذج الركودي عكسها.
ويمكن استخدام هذا النموذج في مختلف الدراسات ، مثل النظر في التغييرات في والفيزيولوجية التغذوية والتغييرات والمرضية النسيجية والمناعية في الجهاز الهضمي. ويمكن أيضا أن يستخدم هذا النموذج لمعرفة آثار ركود صفراوي ، والتدخلات العلاجية المختلفة على جراحات الكبد الكبرى.
Protocol
1. تشريح الفئران الصفراوي
وكان قطر القناة الصفراوية ومتوسط طول 1 ملم و 29 ملم على التوالي. وكان متوسط المسافة بين بوابة المعدة والاثني عشر حليمة 28 ملم. هناك نوعان من القنوات البنكرياسية الرئيسية التي تفتح في القناة الصفراوية -- القناة الأمامي يفتح على الجانب الأيسر والقناة الخلفية يفتح على الجانب الأيمن. بالإضافة إلى هذه القنوات الرئيسية ، وعدد من القنوات الثانوية التي تستنزف جميع الأجزاء الثلاثة من البنكرياس مفتوحة مباشرة على القناة الصفراوية. 6
2. تقنية
وأجريت التجارب على الحيوانات في كل اتفاق مع المعاهد الوطنية للصحة المبادئ التوجيهية الأخلاقية للبحوث وتمت الموافقة من قبل لجنة البحوث في المؤسسة ورعاية الحيوان اللجنة. واستخدمت ذكر سبراغ داولي الفئران الذين تتراوح أعمارهم بين 8 أسابيع لهذه المظاهرة. تم الحصول على الفئران من مختبرات نهر تشارلز في ويلمينغتون ، MA وكانوا جميعا أكثر من 300 غراما. وكان الوصول إلى الفئران المختبرية حمية قياسية وكان يضم معا في ظروف المختبر القياسية.
في البداية كانت الفئران مع تخدير isofluorane وأبقى تحت التخدير أثناء الجراحة مع isofluorane من خلال قناع. وقدم شق خط الوسط من 2 سم بدءا من الرهابة. بمجرد فتح اللفافة ، وتراجع عن فصوص الكبد cranially مع مبعاد a سين ، وكان تراجع في الاثني عشر باستخدام caudally Q - النصائح. تم التعرف على القناة الصفراوية وهيكل أنبوبي دخول الاثني عشر. وضعت القناة الصفراوية تحت التوتر وخفض جزئيا مفتوحة. تم استخدام معقم 5 سم أنبوب من البولي إثيلين طويل مع القطر الداخلي من 0.6 ملم وقطرها الخارجي من 0.9 مم. وكان واحدة من نهاية هذا الأنبوب الحرارة مختومة وكان مشطوف بلطف على الطرف الآخر. ثم صدر في نهاية مشطوف في القناة الصفراوية. وكان هذا المضمون في مكان باستخدام خيوط النايلون 8-0 على حد سواء القريبة والبعيدة على فتح في القناة الصفراوية. تم وضع أنبوب المتبقية مع نهاية مختومة في التجويف البريتوني. وكان موقع المروية المنطوق مع المالحة العادي. تم إغلاق البطن ثم في 2 طبقات ، مع خياطة Polyglactin 4-0. تم إغلاق الخط الأبيض مع خيوط المستمر ووضعت قطع الغرز الجلدية. ثم طبق الغراء الجلد على الجلد. سمح للفئران لاسترداد تحت ظروف المختبر القياسية مع هيئة الرصد اليومي لضمان ترطيب الوزن المناسب.
لركود عملية انعكاس ، كانت الفئران باستخدام isofluorane مخدرة كما هو موضح سابقا. تم فتح البطن اكثر من موقع شق السابقة. تم التعرف على أنبوب وأخرجت من التجويف البريتوني. يتم الافراج عن التصاقات الثربي حول أنبوب به تشريح حادة وحادة. ثم تم تحديد موقع في العفج لتحديد المواقع مريحة للأنبوب duodenostomy. وضعت بعد ذلك سلسلة خياطة المحفظه ، 2-3 مم في القطر ، وذلك باستخدام النايلون 8-0. ثم افتتح الاثني عشر داخل هذه المحفظه خياطة السلسلة. ثم انقطع نهاية مختومة من الأنبوب لمدة مناسبة. وقد كفلت حرية تدفق الصفراء. ثم وضعت لهذه الغاية من الأنبوب في الاثني عشر ، وكان تشديد خياطة سلسلة محفظتك. وكان المروية البطن والمغلقة في طبقات.
كانت دراسة سابقة ، أجريت فيه choledochoduodenostomy باستخدام تقنية مختلفة ، ونجا من الفئران لمدة 12 أسبوعا ، وكانت الفئران صحية خلال تلك الفترة. كما أكدت هذه الدراسة على عكس التغيرات البيوكيميائية والنسيجية في الفئران بعد choledochoduodenostomy تعرض لعرقلة من القناة الصفراوية لمدة 2 اسابيع. 7
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
ركود صفراوي يؤدي إلى عدد لا يحصى من التغيرات في الجهاز الهضمي. وقد أجريت دراسات تبحث في التغييرات الحاصلة في نظام المناعة ، والحالة التغذوية. صفراوي 1-3 يمكن أن تؤثر على نتائج جراحات الكبد. وقد أجريت دراسات لتحسين نتائج العمليات الجراحية في الكبد وجود ركود صفراوي. 4-5 بفضل التحسينات في مجال الطب والبحوث ، وسوف يتم إجراء المزيد من الدراسات بشأن ركود صفراوي. وبالتالي فمن الضروري أن يكون نموذجا جيدا الركودي. ويفضل الفأر باعتبارها حيوانات التجارب لأنها متاحة بسهولة ، والتعامل معها بسهولة وغير مكلفة ونموذج قوي لدراسة نظام hepatopancreatobiliary 6 الفيديو من خلال هذا المقال أن نبرهن على خلق نموذج الركودي عكسها والتي يمكن استخدامها في الدراسات المستقبلية.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
الإعلان عن أي تضارب في المصالح.
References
- Gouma, D. J., Roughneen, P. T., Kumar, S., Moody, F. G., Rowlands, B. J. Changes in nutritional status associated with obstructive jaundice and biliary drainage in rats. Am J Clin Nutr. 44, 362-369 (1986).
- Ohtsuka, M., Miyazaki, M., Kondo, Y., Nakajima, N. Neutrophil-mediated sinusoidal endothelial cell injury after extensive hepatectomy in cholestatic rats. Hepatology. 25, 636-641 (1997).
- Abe, T. Kupffer cell-derived interleukin 10 is responsible for impaired bacterial clearance in bile duct-ligated mice. Hepatology. 40, 414-423 (2004).
- Saiki, S. Preoperative internal biliary drainage is superior to external biliary drainage in liver regeneration and function after hepatectomy in obstructive jaundiced rats. Ann Surg. 230, 655-662 (1999).
- Subhas, G. Protective effect of methylprednisolone on warm ischemia-reperfusion injury in a cholestatic rat liver. Am J Surg. 199, 377-380 (2010).
- Kara, M. E. The anatomical study on the rat pancreas and its ducts with emphasis on the surgical approach. Ann Anat. 187, 105-112 (2005).
- Ryan, C. J., Than, T., Blumgart, L. H. Choledochoduodenostomy in the rat with obstructive jaundice. J Surg Res. 23, 321-331 (1977).
