प्रतिवर्ती पित्तरुद्ध चूहा मॉडल का निर्माण

Summary

पित्तस्थिरता सामान्यतः दोनों सर्जन और gastroenterologists द्वारा सामना एक नैदानिक ​​शर्त है. एक पलटवाँ पित्तरुद्ध चूहे मॉडल का निर्माण छोटे और चूहों में अद्वितीय hepatopancreatobiliary शरीर रचना आकार के दृश्य में चुनौतीपूर्ण हो सकता है. यह वीडियो लेख एक पलटवाँ पित्तरुद्ध मॉडल के निर्माण को दर्शाता है.

Abstract

पित्तस्थिरता सामान्यतः दोनों सर्जन और gastroenterologists द्वारा सामना एक नैदानिक ​​शर्त है. पित्तस्थिरता विभिन्न शारीरिक परिवर्तन के कारण और पोषण की स्थिति और शल्य चिकित्सा परिणामों को प्रभावित कर सकते हैं. Pathophysiological यकृत और अन्य अंगों में होने वाली परिवर्तन के अध्ययन के महत्व का है. विभिन्न अध्ययनों पित्तरुद्ध चूहे मॉडल में किया गया है.

हम हमारे हाल ही के अध्ययन में एक पलटवाँ पित्तरुद्ध चूहे मॉडल इस्तेमाल किया ischemia reperfusion चोट में methylprednisolone की भूमिका में देख रहे हैं. एक पलटवाँ पित्तरुद्ध मॉडल के सृजन के लिए विभिन्न तकनीकों का वर्णन किया गया है. एक पलटवाँ पित्तरुद्ध चूहे मॉडल का निर्माण छोटे और चूहों में अद्वितीय hepatopancreatobiliary शरीर रचना आकार के दृश्य में चुनौतीपूर्ण हो सकता है. यह वीडियो लेख एक पलटवाँ पित्तरुद्ध मॉडल के निर्माण को दर्शाता है.

इस मॉडल पोषण, शारीरिक, जठरांत्र संबंधी मार्ग में रोग, histological और प्रतिरक्षाविज्ञानी परिवर्तन में परिवर्तन को देख के रूप में विभिन्न अध्ययनों में इस्तेमाल किया जा सकता है. यह मॉडल भी पित्तस्थिरता और प्रमुख यकृत सर्जरी पर विभिन्न उपचारात्मक उपायों के प्रभाव को देखने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.

Protocol

1. चूहा पित्त शरीर रचना विज्ञान

औसत पित्त नली व्यास और लंबाई में 1 मिमी और 29 मिमी, क्रमशः था. जठरनिर्गम और ग्रहणी papilla के बीच औसत दूरी 28 मिमी था. वहाँ दो मुख्य अग्नाशय नलिकाएं जो पित्त नली में खुला रहे हैं - पूर्वकाल वाहिनी बाईं ओर खुलता है और पीछे वाहिनी सही पक्ष पर खुलता है. इन प्रमुख नलिकाओं के अलावा, छोटी नलिकाओं का एक नंबर है कि अग्न्याशय के सभी तीन भागों नाली पित्त नली सीधे खोलने ^के 6 .

2. तकनीक

सभी पशु प्रयोगों नैतिक अनुसंधान के लिए स्वास्थ्य के दिशा निर्देशों के राष्ट्रीय संस्थानों के साथ समझौते में प्रदर्शन किया गया और संस्था के अनुसंधान समिति और जानवर की देखभाल समिति द्वारा अनुमोदित थे. पुरुष Sprague-Dawley 8 सप्ताह आयु वर्ग के चूहों को इस प्रदर्शन के लिए इस्तेमाल किया गया. चूहों Wilmington में चार्ल्स नदी प्रयोगशालाओं, एमए और सभी 300 ग्राम से अधिक थे से प्राप्त किया गया. चूहे मानक प्रयोगशाला आहार के लिए उपयोग किया था और मानक प्रयोगशाला परिस्थितियों में एक साथ रखे.

चूहे शुरू isofluorane साथ anesthetized थे और एक मुखौटा के माध्यम से isofluorane साथ सर्जरी के दौरान संज्ञाहरण के तहत रखा है. 2 सेमी की एक midline चीरा xiphisternum से शुरू किया गया था. एक बार खोला प्रावरणी, जिगर lobes cranially सेन retractor के साथ मुकर गया था, और ग्रहणी caudally क्यू युक्तियों का उपयोग मुकर गया था. पित्त नली एक ट्यूबलर संरचना ग्रहणी में प्रवेश के रूप में पहचान की थी. पित्त नली तनाव के तहत रखा गया था और आंशिक रूप से खुले में कटौती. 0.6 मिमी और 0.9 मिमी की बाहरी व्यास के एक आंतरिक व्यास के साथ एक बाँझ 5 सेमी लंबे पॉलीथीन ट्यूब इस्तेमाल किया गया था. इस ट्यूब के एक सिरे गर्मी सील किया गया और धीरे से दूसरे छोर beveled था. beveled अंत तो पित्त नली में पारित किया गया था. यह 8-0 नायलॉन दोनों प्रॉक्सिमल और पित्त नली में खोलने के लिए बाहर का sutures का उपयोग जगह में सुरक्षित किया गया था. सील अंत के साथ शेष ट्यूब peritoneal गुहा में रखा गया था. ऑपरेटिव साइट सामान्य नमक के साथ सिंचित किया गया था. पेट तो 2 परतों में बंद कर दिया गया था 4-0 Polyglactin सीवन के साथ,. linea अल्बा निरंतर sutures के साथ बंद किया गया था और चमड़े sutures बाधित रखा गया. त्वचा गोंद फिर त्वचा पर लागू किया गया था. चूहों दैनिक शरीर के वजन की निगरानी के साथ मानक प्रयोगशाला परिस्थितियों में ठीक करने के लिए उचित जलयोजन सुनिश्चित करने के लिए अनुमति दी गई.

पित्तस्थिरता उत्क्रमण आपरेशन के लिए, चूहों isofluorane का उपयोग कर के रूप में पहले वर्णित anaesthetized थे. पेट पिछले चीरा साइट पर खोला गया था. ट्यूब की पहचान गया था और peritoneal गुहा से बाहर ले जाया गया. ट्यूब आसपास Omental adhesions कुंद और तेज विच्छेदन का उपयोग कर मुक्त हैं. ग्रहणी में एक साइट तो duodenostomy ट्यूब की आरामदायक स्थिति के लिए पहचान की थी. एक बटुआ स्ट्रिंग सीवन, व्यास में 2-3 मिमी, तो 8-0 नायलॉन का उपयोग कर रखा गया था. ग्रहणी तो इस पर्स स्ट्रिंग सीवन के अंदर खोला गया था. ट्यूब के अंत सील तो उचित लंबाई करने के लिए काट दिया गया. पित्त का प्रवाह सुनिश्चित किया गया है. ट्यूब का यह अंत तो ग्रहणी में रखा गया था और पर्स स्ट्रिंग सीवन कड़ा था. पेट सिंचित और परतों में बंद किया गया था.

पिछले एक अध्ययन में, जिसमें choledochoduodenostomy एक अलग तकनीक का उपयोग किया गया था, चूहों 12 हफ्तों के लिए बच गया और चूहों उस अवधि के दौरान स्वस्थ थे. इसके अलावा इस अध्ययन चूहों में choledochoduodenostomy बाद 2 सप्ताह की अवधि के लिए पित्त नली की रुकावट के अधीन जैव रासायनिक और histological परिवर्तन ^के उत्क्रमण की पुष्टि 7.

Discussion

पित्तस्थिरता गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल प्रणाली में परिवर्तन की एक असंख्य की ओर जाता है है. अध्ययन प्रतिरक्षा प्रणाली और पोषण की स्थिति में परिवर्तन को देख ^किया 1-3 पित्तस्थिरता यकृत सर्जरी के परिणामों को प्रभावित कर सकते हैं. अध्ययन पित्तस्थिरता की उपस्थिति में यकृत सर्जरी के परिणामों में सुधार के लिए प्रदर्शन किया गया है दवा और अनुसंधान में ^{सुधार} के साथ 4-5. आगे के अध्ययन पित्तस्थिरता पर किया जाएगा. इसलिए यह एक अच्छा पित्तरुद्ध मॉडल के लिए आवश्यक है. चूहे एक प्रयोगात्मक पशु के रूप में पसंद है क्योंकि यह आसानी से उपलब्ध है, को आसानी से संभाला है, सस्ती, और hepatopancreatobiliary प्रणाली का अध्ययन करने के ^लिए इस वीडियो लेख के माध्यम से एक तगड़ा मॉडल 6 हम जो भविष्य के अध्ययनों में इस्तेमाल किया जा सकता है एक पलटवाँ पित्तरुद्ध मॉडल के निर्माण का प्रदर्शन.