Summary
Kolestaz hem cerrahlar ve gastroenterolog tarafından yaygın olarak karşılaşılan bir klinik tablodur. Sıçanlarda küçük boyutu ve benzersiz hepatopancreatobiliary anatomi görünümünde bir reversibl kolestatik sıçan modeli oluşturulması zor olabilir. Bu video makale reversibl kolestatik modeli oluşturulması göstermektedir.
Abstract
Kolestaz hem cerrahlar ve gastroenterolog tarafından yaygın olarak karşılaşılan bir klinik tablodur. Kolestaz, çeşitli fizyolojik değişikliklere neden ve beslenme durumu ve cerrahi sonuçlarını etkileyebilir. Karaciğer ve diğer organlarda meydana gelen patofizyolojik değişikliklerin incelenmesi önem taşımaktadır. Kolestatik sıçan modellerinde çeşitli çalışmalar yapılmıştır.
Iskemi reperfüzyon hasarı metilprednizolon rolü bakarak bizim son çalışmada bir reversibl kolestatik sıçan modelinde kullanıldı. Reversibl kolestatik bir model oluşturulması için çeşitli teknikler tarif edilmiştir. Sıçanlarda küçük boyutu ve benzersiz hepatopancreatobiliary anatomi görünümünde bir reversibl kolestatik sıçan modeli oluşturulması zor olabilir. Bu video makale reversibl kolestatik modeli oluşturulması göstermektedir.
Bu model, gastrointestinal sistem beslenme, fizyolojik, patolojik, histolojik ve immünolojik değişikliklere bakarak gibi çeşitli çalışmalarda kullanılabilir. Bu model aynı zamanda, kolestaz ve büyük karaciğer ameliyatları çeşitli terapötik müdahalelerin etkilerini görmek için kullanılabilir.
Protocol
1. Sıçan safra anatomisi
Ortalama safra kanalı çapı ve uzunluğu sırasıyla 1 mm ve 29 mm idi. Pilorus ve duodenal papilla arasındaki ortalama mesafe 28 mm idi. Safra kanalı içine açılan iki ana pankreatik kanal vardır - ön sol tarafta kanal açılır ve sağ tarafta posterior kanal açılır. Bu büyük kanallarına ek olarak, pankreas üç porsiyon drenaj küçük kanalların sayısı, safra kanalı doğrudan açın. 6
2. Teknik
Tüm hayvan deneyleri etik araştırma için sağlık kuralları ve Ulusal Sağlık Enstitüleri ile anlaşma yapıldı ve kurumun Araştırma Komitesi ve Hayvan Bakım Komitesi tarafından kabul edildi. Bu gösteri için 8 hafta arası erkek Sprague-Dawley rat kullanılmıştır. Sıçanlarda Charles Nehri Wilmington Laboratuvarları, MA ve her 300 gram üzerinden elde edilmiştir. Sıçanlar standart laboratuvar diyeti ve standart laboratuar koşullarında birlikte ev sahipliği.
Sıçanlar başlangıçta isofluorane ile anestezi ve bir maske yoluyla isofluorane ameliyat sırasında anestezi altında tutulur. Xiphisternum itibaren 2 cm orta hat kesi yapıldı. Fasya karaciğer loblar Sen retraktörü ile cranially retrakte açıldı ve onikiparmak bağırsağı kaudal Q-ipuçlarını kullanarak geri alındı. Safra yolları duodenuma giren bir boru şeklinde bir yapı olarak tespit edilmiştir. Safra kanalı gerilim altına yerleştirilen ve kısmen açık kesilmiş oldu. 0.6 mm ve dış çapı 0.9 mm iç çapa sahip steril 5 cm uzunluğunda polietilen tüp kullanılmıştır. Bu tüpün bir ucu ısı imzalandı ve diğer ucunu hafifçe eğimli. Eğimli sonuna sonra safra kanalı içine geçti. Bu proksimal ve distal safra kanalı açılması hem de 8-0 naylon sütür kullanılarak yerinde güvence altına alınmıştır. Mühürlü sonu ile birlikte kalan tüpe, periton boşluğuna yerleştirildi. Ameliyat yerinde normal tuzlu su ile sulandı. Karın ardından 4-0 poliglaktin sütür ile, 2 kat kapatıldı. Linea alba sürekli dikişlerle kapatılır ve kesintiye dermal sütürler konuldu. Cilt tutkal sonra cilt üzerinde uygulanmıştır. Sıçan, uygun hidrasyon sağlamak için günlük vücut ağırlığı izleme ile standart laboratuvar koşullarında kurtarmak için izin verildi.
Kolestaz ters işlem için, fareler, daha önce açıklandığı gibi isofluorane kullanarak anestezi edildi. Karın önceki kesi sitesi üzerinden açıldı. Tüp tespit ve periton boşluğundan çıkarıldı. Omentum yapışıklıklar tüp etrafında künt ve keskin diseksiyon kullanılarak serbest bırakılır. Duodenuma bir site sonra duodenostomy tüp rahat bir konumlandırma için tespit edilmiştir. Bir çanta dize dikiş, 2-3 mm çapında, 8-0 naylon kullanılarak yerleştirildi. Duodenum sonra bu çanta dikişi içinde açıldı. Tüpün kapalı ucunda sonra uygun uzunlukta kesilir. Ücretsiz safra akışı sağlanmıştır. Bu son tüp daha sonra duodenum yerleştirilir ve çanta dize dikiş sıkılır. Katmanlar halinde karın sulu ve kapatıldı.
Önceki bir çalışmada, neyin choledochoduodenostomy farklı bir tekniği kullanılarak yapıldı, sıçan, 12 hafta boyunca hayatta ve fareler, bu dönemde sağlıklı. Ayrıca bu çalışmada, 2 haftalık bir süre için safra yolları tıkanıklığı maruz sıçanlarda choledochoduodenostomy sonra ters biyokimyasal ve histolojik değişiklikleri doğruladı. 7
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Kolestazis gastrointestinal sistem değişiklikleri sayısız yol açar. Çalışmalar, bağışıklık sistemi ve beslenme durumu değişiklikleri görünümlü 1-3 Kolestazis karaciğer ameliyatları sonuçlarını etkileyebilir . Kolestaz varlığında karaciğer ameliyatları sonuçlarını geliştirmek için çalışmalar yapılmıştır. Tıp ve araştırma alanındaki gelişmeler ile 4-5, kolestaz üzerinde ileri çalışmalar yapılacaktır. Bu nedenle iyi bir kolestatik modeli olması gereklidir. Sıçan hazır olması nedeniyle, bir deney hayvanı olarak tercih edilen, kolay kullanım, ucuz ve hepatopancreatobiliary sistemi çalışmak için sağlam bir model 6 Bu video makale sayesinde, gelecekteki çalışmalarda kullanılabilecek bir reversibl kolestatik modeli oluşturulması göstermektedir .
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Çıkar çatışması ilan etti.
References
- Gouma, D. J., Roughneen, P. T., Kumar, S., Moody, F. G., Rowlands, B. J. Changes in nutritional status associated with obstructive jaundice and biliary drainage in rats. Am J Clin Nutr. 44, 362-369 (1986).
- Ohtsuka, M., Miyazaki, M., Kondo, Y., Nakajima, N. Neutrophil-mediated sinusoidal endothelial cell injury after extensive hepatectomy in cholestatic rats. Hepatology. 25, 636-641 (1997).
- Abe, T. Kupffer cell-derived interleukin 10 is responsible for impaired bacterial clearance in bile duct-ligated mice. Hepatology. 40, 414-423 (2004).
- Saiki, S. Preoperative internal biliary drainage is superior to external biliary drainage in liver regeneration and function after hepatectomy in obstructive jaundiced rats. Ann Surg. 230, 655-662 (1999).
- Subhas, G. Protective effect of methylprednisolone on warm ischemia-reperfusion injury in a cholestatic rat liver. Am J Surg. 199, 377-380 (2010).
- Kara, M. E. The anatomical study on the rat pancreas and its ducts with emphasis on the surgical approach. Ann Anat. 187, 105-112 (2005).
- Ryan, C. J., Than, T., Blumgart, L. H. Choledochoduodenostomy in the rat with obstructive jaundice. J Surg Res. 23, 321-331 (1977).