Creazione del Modello reversibile Rat colestatico

Summary

Colestasi è una condizione clinica comunemente incontrate dai chirurghi e gastroenterologi. Creazione di un modello reversibile ratto colestatico può essere difficile in vista della taglia più piccola e unica anatomia hepatopancreatobiliary nei ratti. In questo articolo il video dimostra la creazione di un modello colestatico reversibile.

Abstract

Colestasi è una condizione clinica comunemente incontrate dai chirurghi e gastroenterologi. Colestasi può causare diversi cambiamenti fisiologici e influenzano lo stato nutrizionale e risultati chirurgici. Studio delle alterazioni fisiopatologiche che si verificano nel fegato e altri organi è di importanza. Vari studi sono stati condotti in modelli di ratto colestatico.

Abbiamo usato un modello reversibile ratto colestatico nel nostro recente studio guardando il ruolo di metilprednisolone nel danno da riperfusione ischemia. Varie tecniche per la creazione di un modello reversibile colestatico sono stati descritti. Creazione di un modello reversibile ratto colestatico può essere difficile in vista della taglia più piccola e unica anatomia hepatopancreatobiliary nei ratti. In questo articolo il video dimostra la creazione di un modello colestatico reversibile.

Questo modello può essere utilizzato in vari studi, come ad esempio guardando i cambiamenti nutrizionali, fisiologici, patologici, alterazioni istologiche e immunologiche nel tratto gastrointestinale. Questo modello può essere utilizzato anche per vedere gli effetti di colestasi e vari interventi terapeutici sui principali interventi di chirurgia epatica.

Protocol

1. Rat anatomia biliare

Il diametro del condotto biliare e la lunghezza media è stato di 1 mm e 29 mm, rispettivamente. La distanza media tra il piloro e la papilla duodenale era di 28 mm. Ci sono due dotti pancreatici principali che si aprono nel dotto biliare - il condotto anteriore si apre sul lato sinistro e il condotto posteriore si apre sul lato destro. Oltre a questi canali principali, una serie di canali minori che drenano tutte e tre le parti del pancreas aperta direttamente al dotto biliare ^6.

2. Tecnica

Tutti gli esperimenti sugli animali sono stati eseguiti in accordo con il National Institutes of linee guida Salute per la ricerca etica e sono stati approvati dal comitato di ricerca dell'istituzione e Cura Comitato degli animali. Maschi Sprague-Dawley di 8 settimane sono stati utilizzati per questa dimostrazione. I ratti sono stati ottenuti da Charles River Laboratories a Wilmington, MA e tutti sono stati oltre 300 grammi. Ratti ha avuto accesso alla dieta standard di laboratorio e sono stati alloggiati insieme in condizioni standard di laboratorio.

I ratti sono stati anestetizzati con isofluorane inizialmente e tenute sotto anestesia durante l'intervento chirurgico con isofluorane attraverso una maschera. Una linea mediana incisione di 2 cm è stata fatta a partire dal xiphisternum. Una volta che la fascia è stata aperta, i lobi del fegato sono stati retratto cranialmente con arrotolatore uno Sen, e il duodeno era ritirato caudalmente con Q-Tips. Il dotto biliare è stato identificato come una struttura tubolare entrare nel duodeno. Il dotto biliare è stato messo sotto tensione e in parte a cielo aperto. Un tubo in polietilene sterile 5 cm di lunghezza con un diametro interno di 0,6 mm e un diametro esterno di 0,9 mm è stata utilizzata. Una fine di questo tubo è stato termosaldato e l'altra estremità era dolcemente smussati. La fine smussato è stato poi passato nel dotto biliare. Questo è stato fissato in posizione con 8-0 punti di sutura in nylon sia prossimale e distale per l'apertura del dotto biliare. Il tubo rimanenti insieme con l'estremità sigillata è stata posta nella cavità peritoneale. La sede operativa è stata irrigata con soluzione fisiologica. L'addome è stato poi chiuso in 2 strati, con sutura poliglactina 4-0. La linea alba si è chiusa con sutura continua e le suture interrotte cutanea sono stati collocati. Colla pelle è stata poi applicata sulla pelle. I ratti sono stati autorizzati a recuperare in condizioni di laboratorio standard con il monitoraggio quotidiano del peso corporeo per assicurare una corretta idratazione.

Per l'operazione di inversione colestasi, i ratti sono stati anestetizzati con isofluorane come descritto in precedenza. L'addome è stato aperto il sito di incisione precedente. Il tubo è stato identificato e portato fuori dalla cavità peritoneale. Aderenze omento attorno al tubo vengono liberati mediante dissezione smussa e taglienti. Un sito nel duodeno è stato poi identificato per un posizionamento confortevole del tubo duodenostomia. Una sutura stringa borsa, 2-3 mm di diametro, è stato poi messo in nylon con 8-0. Il duodeno è stato poi inaugurato all'interno di questa sutura stringa borsa. La fine sigillata del tubo è stato poi tagliato a misura appropriata. Libero flusso della bile è stata assicurata. Questa estremità del tubo è stato poi messo nel duodeno e la sutura stringa di borsa è stato serrato. L'addome era irrigata e chiuso a strati.

In uno studio precedente, in cui choledochoduodenostomy è stata effettuata utilizzando una tecnica diversa, i topi erano sopravvissuti per 12 settimane, i topi erano sani durante quel periodo. Anche questo studio ha confermato l'inversione di cambiamenti biochimici e istologici dopo choledochoduodenostomy nei ratti sottoposti ad occlusione del dotto biliare per un periodo di 2 settimane ^7.

Discussion

Colestasi porta ad una miriade di cambiamenti nel sistema gastrointestinale. Gli studi sono stati fatti guardando i cambiamenti nel sistema immunitario e lo stato nutrizionale. Colestasi ^1-3 possono influenzare gli esiti di interventi di chirurgia epatica. Sono stati condotti studi per migliorare gli esiti di interventi chirurgici epatica in presenza di colestasi. ^4-5 Con il miglioramento della medicina e della ricerca, ulteriori studi saranno fatto su colestasi. Quindi è necessario avere un buon modello colestatico. Il ratto è preferito come un animale da esperimento, perché è prontamente disponibile, maneggevole, economico e un modello robusto per studiare il sistema hepatopancreatobiliary ^6. Article Attraverso questo video che dimostrano la creazione di un modello colestatico reversibile che può essere usato in studi futuri.