三维光学分辨率的光声显微镜
Summary
光学分辨率的光声显微镜（或PAM），是一种新兴技术，成像光吸收能力对比<em>在体内</em>细胞的分辨率和灵敏度。在这里，我们提供了一个典型的可视化指令OR – PAM的实验方案，包括系统配置，系统校准，<em>在体内</em>实验程序和功能成像计划。
Abstract
光学显微镜，在细胞和细胞器水平提供有价值的见解，已被广泛认可，作为一个有利的生物医学技术。由于三维（3 – D） 在体内的光学显微镜，single-/multi-photon荧光显微镜和光学相干断层扫描（OCT）已证明其非凡的灵敏度荧光和光散射对比，分别支柱。然而，生物组织，其中重要的生理/病理信息进行编码，的光吸收对比尚未被课税。
生物医学photoacoustics的出现，导致了光学显微镜的光学分辨率的光声显微镜（或- PAM），1光的照射下，其中的重点是实现蜂窝1或2级甚至亚细胞横向分辨率的衍射极限的一个新的分支。作为一个有价值的补充，现有的光学显微镜技术，OR – PAM的带来了至少两个新奇。首先和最重要的是，OR – PAM的检测光吸收对比，具有非凡的灵敏度（即100％）。 3荧光显微镜或光散射基于10月4日 （或同时）或- PAM的结合，提供全面的生物组织的光学性质。第二，OR – PAM编码成声波的光吸收，相反，在荧光显微镜和华侨城纯光学过程，并提供背景，免费检测。或PAM的声波探测减轻光散射信号衰减的影响和自然消除可能干扰之间的激发和检测，这是由于激发光谱和荧光光谱之间的重叠，在荧光显微镜常见的问题（即串扰）。
OR – PAM的独特的光吸收成像，已经证明其发明以来广泛的生物医学应用，包括但不限于，神经病学5，6，7眼科，8，9血管生物学和皮肤病10。在这段视频中，我们教系统的OR - PAM的配置和调整，以及在体内功能微血管成像实验程序。
Protocol
Discussion
在这段视频中，我们提供了一个OR – PAM的实验方案，包括系统配置，系统校准，典型的实验程序的详细说明。无标签，无创或PAM，使微血管功能和单一的毛细血管基础代谢的研究，从而有潜力，扩大我们的微循环相关的生理和病理的认识。 Microphotoacoustics是目前制造这样或PAM系统。
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
作者欣赏Lynnea Brumbaugh博士的仔细阅读的手稿。这项工作是由国家卫生赠款R01 EB000712，R01 EB008085，R01 CA134539，U54 CA136398和5P60 DK02057933研究院赞助。丽红五，王教授已在Microphotoacoustics，公司和恩德拉号，公司，金融利益，但不支持这项工作。
Materials
Home-made acoustic-optical beam combiner:
- right-angle prism (NT32-545, Edmund Optics)
- rhomboid prism (NT49-419, Edmund Optics)
- silicone oil (1000cSt, Clearco Products)
- OR-PAM system (Microphotoacoustics)
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