الخلايا العصبية الحسية تشجر شجيري من<em> ذبابة الفاكهة</em> اليرقات النظام العصبي الطرفي ونماذج مفيدة لتوضيح عامة والطبقة العصبية آليات محددة للتمايز الخلايا العصبية. نقدم دليلا عمليا لتوليد وتحليل الخلايا العصبية شجيري تشجر الفسيفساء الجينية.
تطوير النظام العصبي يتطلب مواصفات الصحيح للموقف الخلايا العصبية والهوية ، وتلتها دقيقة عصبون التنمية شجيري فئة محددة والأسلاك محواري. مؤخرا أصبحت شجيري تشجر (DA) الخلايا العصبية الحسية لنظام ذبابة الفاكهة اليرقات العصبي الطرفي (المحيطي) نماذج الوراثية القوية التي لتوضيح الآليات العامة على حد سواء ، وفئة محددة من تمايز الخلايا العصبية. هناك أربع فئات رئيسية DA الخلايا العصبية (I – IV) 1. أنها تتم تسمية من أجل زيادة تعقيد تغصن الشجرة ، ولها فئة محددة الاختلافات في التحكم الجيني للتمايز من 2-10. نظام DA الحسي هو نموذج عملي لتحقيق في الآليات الجزيئية وراء السيطرة على التشكل شجيري 11-13 للأسباب التالية : 1) أنه يمكن الاستفادة من الأدوات الجينية القوية المتاحة في ذبابة الفاكهة ، 2) الخلايا العصبية DA تغصن جذع ينتشر سوى 2 في أبعاد اسفل كلي بصرياع اليرقات بشرة مما يجعل من السهل تصور مع دقة عالية في الجسم الحي ، 3) التنوع في فئة محددة مورفولوجيا شجيري يسهل إجراء تحليل مقارن للعثور على السيطرة على العناصر الرئيسية في تشكيل الأشجار التغصنية بسيطة مقابل تشعبت للغاية ، و 4) شجيري جذع النمطية أشكال مختلفة من الخلايا العصبية DA تسهيل التحليلات الإحصائية morphometric.
DA نشاط الخلايا العصبية تعديل الناتج من مولد تنقل نمط المركزية اليرقات 14-16. DA الطبقات المختلفة والخلايا العصبية الحسية طرائق مختلفة ، وتفعيلها تثير استجابات سلوكية مختلفة 14،16-20. وعلاوة على فئات مختلفة ارسال التوقعات محواري نمطيا في النظام العصبي اليرقات ذبابة الفاكهة المركزي في الحبل البطني العصب (VNC) 21. إنهاء هذه التوقعات مع كل من تمثيل الطبوغرافية طريقة الخلايا العصبية الحسية وDA موقف في جدار الجسم من الحقل 7،22 شجيري، 23 عاما. ويمكن استخدام فحص بالتالي من الإسقاطات DA محواري لتوضيح الآليات الأساسية رسم الخرائط الطوبوغرافية 7،22،23 ، فضلا عن الأسلاك من الدوائر تنقل اليرقات تحوير بسيط 14-17.
نقدم هنا دليلا عمليا لتوليد وتحليل الفسيفساء الجينية 24 وسم الخلايا العصبية عبر MARCM DA (تحليل الفسيفساء مع خلية Repressible ماركر) 1،10،25 وFLP التدريجي 22،26،27 تقنيات (ملخصة في الشكل 1).
ويرقات ذبابة الفاكهة نموذجا عصبون DA يوفر نظام واحد وراثية ممتازة للتحقيق في الآليات التي تحكم مورفولوجيا الخلايا العصبية وتشكيل الدائرة. يستخدم عادة لوضع العلامات وMARCM لتوليد متحولة DA استنساخ الخلايا العصبية. لMARCM نستخدمها إما لعموم العصبية (مثل Gal4 …
The authors have nothing to disclose.
الكتاب أشكر بتبريد للتمويل. ونحن نشكر أيضا Cagri Yalgin ، Delandre كارولين باريش وجاي لاجراء مناقشات حول بروتوكولات الوراثية والمناعية.
Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
---|---|---|---|
SZX16 fluorescence dissection microscope (with GFPHQ filter) | Olympus | SZX16 | |
Live Insect Forceps | FST | 26030-10 | |
26mm x 76mm depression slide glass | Toshinriko Co. | T8-R004 | |
Sylgard 184 (or Silpot 184) | Dow Corning | 3097358-1004 | |
Poly-L-lysine | Sigma | P-1524 | This product has proven most effective |
DPX mounting medium | Sigma | 44581 | |
Rabbit anti-GFP | Invitrogen | A-11122 | Dilution 1:500 |
Rat anti-CD8 | Caltag | 5H10 | Dilution 1:200 |
Mouse anti-CD2 | AbD serotec | MCA443R | Dilution 1:700 |
Mouse anti-Fasciclin2 | DSHB | 1D4 | Dilution 1:10 |