の樹状分枝感覚ニューロン<em>ショウジョウバエ</em>幼虫の末梢神経系は、一般とニューロンの分化のニューロンクラス特有のメカニズムの両方を解明するために有用なモデルです。我々は樹状突起分枝の神経細胞遺伝学的モザイクを生成して解析するための実用的なガイドを提示する。
神経系の発達には、正確なニューロンのクラス特有の樹状突起の発達と軸索の配線が続くニューロンの位置と同一の正確な仕様が必要です。最近ショウジョウバエの幼虫の末梢神経系(PNS)の樹状分枝(DA)の感覚ニューロンは、ニューロンの分化の両方の一般とクラス固有のメカニズムを解明するための強力な遺伝的モデルとなっている。 4つの主要なDAニューロンのクラス(I – IV)1があります。彼らは、増加する樹状突起の複雑さの順に名前が付けられ、それらの分化2-10の遺伝的制御のクラス固有の相違点を持っています。 1)それが2)、DAニューロン樹状突起が広がる、ショウジョウバエで利用できる強力な遺伝学的ツールを活用することができますので、DA感覚システムは、樹枝状形態の制御11から13の背後にある分子メカニズムを調べるために実用的なモデルです。光学的にCLEの下にだけ2次元のそれは容易にin vivoでの高分解能で可視化することAR幼虫のクチクラ、3)樹枝状形態におけるクラス固有の多様性は、単純な比較高度に分岐した樹枝状の木の形成を制御する重要な要素を見つけるために比較分析を容易に、そして4)樹状あずまや固定観念別のDAニューロンの形状は、形態学的統計分析を促進する。
DAニューロンの活動は、幼虫の運動中枢パターン発生器14から16の出力を変更します。別のDAニューロンのクラスは、異なる感覚モダリティを持っており、それらの活性化は、14,16-20異なる行動反応を誘発する。さらに別のクラスには、腹側神経索のショウジョウバエ幼虫の中枢神経系(VNC)21に型通りに軸索投射を送る。これらの予測は、樹状フィールド7,22の体壁のDAニューロンの感覚モダリティと位置の両方の地形表現で終了、23。 DA軸索突起のよって検査は、地形図7,22,23、だけでなく、簡単な回路を変調幼虫の運動14から17までの配線の基礎となるメカニズムを解明するために使用することができます。
ここではMARCM(抑制性細胞マーカーを持つモザイク解析)1,10,25とFLPアウト22,26,27技術(図1に要約)を介して24マーキングDAニューロンを生成し、遺伝的モザイクを分析する実用的なガイドを提示する。
ショウジョウバエ幼虫のDAニューロンモデルは、制御のニューロンの形態と回路形成そのメカニズムを調べる一つの優れた遺伝システムを提供します。 MARCMは、一般的に標識のためにと体DAニューロンのクローンを生成するために使用されます。 MARCMのために私達はどちらか汎神経(例えば、Gal4の C155)またはDAニューロン固有のドライバを使用してください。汎?…
The authors have nothing to disclose.
著者らは、資金調達のために理研に感謝。我々はまた、遺伝的および免疫組織化学プロトコルに関する議論のためにCagri Yalgin、キャロラインDelandre、とジェイパリッシュに感謝。
Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
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SZX16 fluorescence dissection microscope (with GFPHQ filter) | Olympus | SZX16 | |
Live Insect Forceps | FST | 26030-10 | |
26mm x 76mm depression slide glass | Toshinriko Co. | T8-R004 | |
Sylgard 184 (or Silpot 184) | Dow Corning | 3097358-1004 | |
Poly-L-lysine | Sigma | P-1524 | This product has proven most effective |
DPX mounting medium | Sigma | 44581 | |
Rabbit anti-GFP | Invitrogen | A-11122 | Dilution 1:500 |
Rat anti-CD8 | Caltag | 5H10 | Dilution 1:200 |
Mouse anti-CD2 | AbD serotec | MCA443R | Dilution 1:700 |
Mouse anti-Fasciclin2 | DSHB | 1D4 | Dilution 1:10 |