Inyección intravítrea para el establecimiento de modelos Enfermedades Oculares

Summary

Inyección intravítrea es una técnica ampliamente utilizada en la investigación de las ciencias visuales de enfermedades oculares o en la aplicación directa del tratamiento local. Este vídeo demuestra un protocolo de inyección intravítrea con una jeringa de 1 ml con una pipeta de vidrio. Consejos útiles acerca de cómo evitar una hemorragia masiva y daños en el objetivo se les da.

Abstract

Inyección intravítrea es una técnica ampliamente utilizada en la investigación de las ciencias visuales. Se puede utilizar para establecer modelos animales con enfermedades oculares o en la aplicación directa del tratamiento local. Este video presenta el uso de herramientas sencillas y de bajo costo para finalizar el procedimiento de inyección intravítrea. El uso de una jeringa de 1 ml, en lugar de una jeringa hemilton, se utiliza. Consejos prácticos sobre cómo hacer que las agujas de inyección apropiada utilizando pipetas de vidrio con la punta perfecta, y cómo conectar fácilmente la aguja de la jeringa con la pipeta de vidrio bien juntos, se les da.

Para llevar a cabo una inyección intravítrea bien, hay tres aspectos a tener en cuenta: 1) el lugar de inyección no debe alterar la estructura de la retina, 2) hemorragia se debe evitar para reducir el riesgo de infección, 3) las lentes deben ser virgen para evitar la catarata traumática. En resumen, el punto más importante es reducir la interrupción de la estructura ocular normal. Para evitar la interrupción de la retina, la región nasal superior de los ojos de rata fue elegido. Además, el punto de punción de la aguja estaba en el par plana, que era de 1,5 mm de la región del limbo del ojo de la rata. Una pequeña cantidad de vítreo se empuja suavemente a través del orificio de punción para reducir la presión intraocular antes de la inyección. Con el ángulo de 45 ° de la inyección, es menos probable que cause catarata traumática en el ojo de rata, lo que evita las complicaciones relacionadas con la influencia de factores y lenticular. En esta operación, no hubo corte de la conjuntiva y el músculo ocular, sin sangrado. Con una lesión rápida y de menor importancia, una inyección intravítrea de éxito se puede hacer en cuestión de minutos.

La inyección de conjunto descritos en este protocolo en particular es específico para inyección intravítrea. Sin embargo, los métodos y materiales presentados aquí también se puede utilizar para los procedimientos de inyección en la administración de fármacos en el cerebro, la médula espinal y otros órganos en mamíferos pequeños.

Protocol

Prepare las pipetas de vidrio con extractor de pipetas, se conecta a una jeringa de 1 ml, y sellar la conexión con parafilm. Retirar 2 ml de solución en la punta de las pipetas y prepararse para la inyección. Anestesiar la rata por vía intra-peritoneal de ketamina (80mg/kg) y xilazina (8mg/kg) (relación de volumen de 2:1). Aplique una gota de 0,5% Alcaine a los ojos de rata como anestésicos tópicos antes de la inyección intravítrea. Posición de la rata y exponer la región nasal superior del ojo….

Discussion

Inyección intravítrea bien es útil para establecer un modelo animal, así como el tratamiento intraocular directa. En primer lugar, sitio de la inyección no debe alterar la estructura de la retina. Sangrado en segundo lugar, se debe evitar para reducir el riesgo de infección. Tercera lente, debe ser virgen para evitar la catarata traumática. Lo más importante es reducir la interrupción de la estructura ocular normal.

Materials

Material Name	Type	Company	Catalogue Number	Comment
Operating Microscope		Olympus	OME
Glass Pipettes		World Precision Instruments, Inc.
Pipette Puller		David Kopf Instruments
1ml syringes				single use
30G needles				single use
Ketamine		Aldasan		anesthetic
Xylazine		Aldasan		anesthetic
Alcaine		Alcon-Couvreur		0.5% proparacaine hydrochloride
Tobrex		Alcon-Couvreur		ointment, 3% tobramyxin.