생쥐의 중간 forebrain 번들의 일방적 6-OHDA의 병변을 수행하기위한 프로토콜이 설명되어 있습니다. 이 방법은 striatal 도파민과 90.63의> 95 %의 손실을 보여주는 살아남은 동물의 89 %를 낮은 사망률 (13.3 %) ± -4.02 % 병변의 측면을 향해 ipsiversive 회전 편견을 가지고 있습니다.
그것이 recapitulates 기저 신경 회로의 변화와 약리학가 관찰한 이후 일방적으로 lesioned 6 hyroxydopamine (6-OHDA) lesioned 파킨슨병의 쥐 모델 (PD)는 parkinsonian 증상의 기초 메커니즘에 대한 우리의 이해를 발전에 귀중한 것으로 판명되었습니다 parkinsonian 환자 1-4. 다만, 기저 신경의 주요 입력 영역입니다 striatum, 내의 출력 경로의 cortico-striatal 시냅스에서 발생하는 정확한 세포와 분자 변화는 애매 남아 있으며 이것은 parkinsonian 증상을 밑에있는 병적인 이상이 3 발생할 사이트로 여겨지고 5.
경찰서에서 nigro-striatal 경로의 기저 신경 회로를 다음과 변성 변화의 기본 메커니즘을 이해하는 것은 크게 촉진에 의한 지나친 표현 녹색 형광 단백질은 세균 인공 염색체의 개발 (BAC) 생쥐하여 고급되었습니다그들은 고립에서 공부 수 있도록 8, :; : 두 striatal 출력 경로 (eGFP-D2와 eGFP-A2a 간접 경로 eGFP-D1 직접 경로)에 대한 구체적인 RS. 예를 들어, 최근의 연구 parkinsonian 마우스 9,10의 시냅스 소성의 병리 학적 변화가있다는 것을 제안했습니다. 그러나 이러한 연구는 청소년 생쥐와 parkinsonism의 급성 모델을 활용. 그것은 안정적인 6-OHDA의 병변과 성인 쥐에 설명된 변경 사항은 또한 이러한 모델에서 발생하는지 불분명하다. 다른 그룹은 중간 forebrain 번들 (MFB)을 lesioning하여 경찰의 안정 일방적-lesioned 6-OHDA 성인 마우스 모델을 생성하기 위해 시도했습니다 .. 안타깝게도,이 연구에서 사망률이 겨우 14 %가 21 수술을 이겨낸과 함께 매우 높은였다 일 이상 11. 더 많은 최근 연구에서 낮은 사망률 모두 함께 내부 nigral 병변을 올렸습니다 dopaminergic 뉴런의> 80 % 감소, L-DOPA 유도 운동 이상증 11,12,13,14 중 단 표현이 변수였다이러한 연구 인치 경찰의 또 다른 잘 확립 마우스 모델은 MPTP-lesioned 마우스 15입니다. 이 모델은 잠재 neuroprotective 요원 16 평가에서 유용하게 입증되었습니다하는 동안, 그것은이 모델은 종종 모터 적자를 유도하는 데 실패로 경찰의 메카니즘 밑에 증상을 이해하는 데 덜 적합하고, 병변 17 정도, 18의 넓은 다양성을 보여줍니다 .
여기에서 우리는 지속> 95 % striatal 도파민의 손실 (등 HPLC로 측정)뿐만 아니라 행동을 생산의 원인이 MFB,에 6-OHDA를 직접 관리하여 경찰의 안정 일방적 6-OHDA-lesioned 마우스 모델을 개발 불균형은 경찰의 잘 특성화 일방적 6-OHDA-lesioned 쥐 모델에서 관찰했다. 경찰이 새롭게 개발한 마우스 모델 parkinsonian 증상 세대의 기본 메커니즘을 이해하는 데 유용한 도구를 새삼 느끼게 될 것이다.
이 프로토콜은 높은 병변 성공률과 낮은 사망률로, 극단적으로 재현할 수있다 파킨슨병의 안정 일방적 6-OHDA-lesioned 마우스 모델의 생성을위한 방법을 설명합니다. 6-OHDA 병변 수술의 성공은 쉽게 lesioned striatum 27> 95 %의 도파민 고갈 지표> 70 % ipsiversive의 회전과 함께 자발적인 회전 동작의 측정에 의해 추정 할 수 있습니다. 그것이 striatal 도파민 레벨 28 직접 측정을 제공으로 str…
The authors have nothing to disclose.
이 작품은 외교 계열과 국제 무역 (캐나다 정부), 토론토 Connaught 펀드, 혁신, NSERC, Krembil 재단과 치료 파킨슨병 Trust와 캐나다 재단의 대학에 의해 지원되었다.
Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
desipramine HCl | Sigma-Aldrich, Oakville, ON, Canada | D125 | 25mg/kg |
pargyline HCl | Sigma-Aldrich, Oakville, ON, Canada | P8013 | 5mg/kg |
6-OHDA HBr | Sigma-Aldrich, Oakville, ON, Canada | H116 | 3mg / mouse |
stereotaxic Frame | Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA | Model 900 | |
mouse ear cups | Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA | Model 921 Zygoma Ear Cups | |
mouse incisor bar | Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA | Model 923B | |
mouse anaesthesia mask | Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA | Model 923B | |
priming kit (containing 250ml syringe) | Hamilton Company, Reno, NV, USA | PRMKIT 81120 | |
RN compression fitting kit (1 mm) | Hamilton Company, Reno, NV, USA | 55750-01 | |
PEEK tubing from RN compression fitting kit< (1/16th inch) | Hamilton Company, Reno, NV, USA | 55751-01 | |
dual small hub RN Coupler | Hamilton Company, Reno, NV, USA | 55752-01 | |
luer to small hub RN adaptor | Hamilton Company, Reno, NV, USA | 55753-01 | |
1ml 25S syringe model 7001KH | Hamilton Company, Reno, NV, USA | 80100 | |
*33G removable needle (RN) pack of 6. . Custom 1 inch with 45<° bevel | Hamilton Company, Reno, NV, USA | 7803-05 | |
Scissors | Fine Science Tools, Vancouver, BC, Canada. | 14084-08 | |
Scalpel | Fine Science Tools, Vancouver, BC, Canada | 10003-12 | |
Scalpel blades | Fine Science Tools, Vancouver, BC, Canada | 10035-20 | |
Forcep | Fine Science Tools, Vancouver, BC, Canada | 11608-15 | |
Hemostats | Fine Science Tools, Vancouver, BC, Canada. | 13004-14 | |
Isoflurane | Abbot | 02241315 | 2-3% |
Suters (Vicryl 4.0) | Syneture | SS-683 | |
Steriliser | Fine Science Tools, Vancouver, BC, Canada | 18000-45 | |
Infusion Pump | Harvard Apparatus | PhD 22/2000 | |
Needles (27G) | Becton Dickinson | 305109 | |
Needles (25G) | Becton Dickinson | 305127 | |
Syringes (1ml) | BD syringe | 309692 | |
Anaesthesia trolley | LEI medical | M2000 | |
Baytril | CDMV, St. hyacinthe, QC | 102207 | |
Lidocaine | CDMV, St. hyacinthe, QC | 3914 | |
Betadine solution | CDMV, St. hyacinthe, QC | 19955 |