Obliterativ bronchiolitis er nøglen hindring for den langsigtede overlevelse af lunge transplanterede patienter og manglen på en robust præklinisk model til hinder for, at undersøge obliterativ bronchiolitis immunopatogenese. I modsætning til andre organtransplanterede, har vaskulariserede mus lungetransplantation først for nylig blevet udviklet. Her viser vi vores uafhængigt udviklet obliterativ bronchiolitis model efter murine ortotopisk enkelt lungetransplantation.
Orthotopisk lungetransplantation i rotter blev første gang rapporteret af Asimacopoulos og kolleger i 1971 1. Dag, denne metode er godt accepteret og standardiseret ikke kun til undersøgelse af allo-afstødning, men også mellem syngene stammer til at undersøge mekanismerne af iskæmi-reperfusionsskade efter lungetransplantation. Selv om anvendelsen af rotter og andre store dyr model 2 bidraget væsentligt til opklaringen af disse undersøgelser, er omfanget af disse undersøgelser begrænses af mangel på knockout og transgene rotter. På grund af ingen effektive behandlinger til obliterativ bronchiolitis, den hyppigste årsag til dødsfald i lunge transplanterede patienter, har der været en intensiv søgen efter præ-kliniske modeller, der kopierer obliterativ bronchiolitis. Den tracheale allograft model er den mest udbredte og kan reproducere nogle af de histopatologiske træk obliterativ bronchiolitis 3. Imidlertid manglen på en intakt vasculature uden forbindelse til modtagerens ledende luftveje, og ufuldstændige patologiske funktioner i obliterativ bronchiolitis begrænser nytten af denne model 4. I modsætning til transplantation af andre faste organer, har vaskulariserede muselunge transplantationer først for nylig blevet rapporteret af Okazaki og kolleger for første gang i 2007 5. Anvendelse af de grundlæggende principper i rotte lungetransplantation, vores laboratorium indledte obliterativ bronchiolitis model ved hjælp af mindre histoinkompatible antigen murine ortotopisk single-venstre lunge transplantationer som giver mulighed for yderligere undersøgelse af obliterativ bronchiolitis immunopatogenese 6.
Orthotopisk lunge transplantation i mus er udfordrende på grund af mikrokirurgiske krav og ekstreme skrøbelighed væv. Indførelse af manchetten teknik har gjort det muligt for den udbredte brug af ortotopisk lungetransplantation i rotter 8. Dette blev grundlaget for udviklingen af orthotopisk lungetransplantation model i mus i vores laboratorium. Hos mus og rotter, i modsætning til mennesker venstre lunge kun indeholder en lap og udgør kun 25% af den samlede lungekapacitet masse. Dette gør venstre enkelt lungetransplantation muligt i den murine model uden behov for en cirkulationen system.
Vores indledende kirurgi viste, at ventilation og perfusion af transplanterede lungen var meget afhængig af størrelsen af PV anastomose. Specifik PV anastomotisk manchet størrelse blev anvendt til at matche donor og modtager som rapporteret 9. Uhensigtsmæssig manchet dimensionering resulterede i enten atelektase af det transplanterede lunge eller opspringning af PV anastomosis. Okazaki et al rapporterede brug af kombineret skib ligeringen og klipning af bronkier 5. I den aktuelle undersøgelse bruger vi en aneurisme clips for alle hilar strukturer, som vi foreslår kan forkorte varme iskæmisk tid. En begrænsning af orthotopisk venstre lungetransplantation i den murine model er, at recipientdyr kan overleve efter alloimmun-medieret nekrose af deres allotransplantater 5. Derfor overlevelsesundersøgelser ikke er mulig og graft vurdering afhænger histologisk undersøgelse af det transplanterede lungen 10.
Ved hjælp af denne teknik, har vi udviklet en præklinisk obliterativ bronchiolitis model i mus. Konkret donor musen er C57BL/10, og modtageren er C57BL / 6. Dette tyder rolle mindre, og ikke store, histokompatibilitetsantigener i obliterativ bronchiolitis patogenese 6. Desuden har vi rapporteret at neutralisere IL-17 forhindrer obliterativ bronchiolitis i den murine model. Denne tilstandl repræsenterer en ny forskning værktøj til undersøgelse af lunge transplantation og fremme af kliniske lungetransplantationer.
The authors have nothing to disclose.
Finansieringskilder: dette arbejde, som støttes af National Institutes of Health tilskud HL067177 og HL096845 og P01AI084853 at DSW
Name of the equipment | Company | Catalogue number |
Zeiss Opmi 6SFC-1880 | Prescott’s Inc | PMZ014 |
Harvard Rodent Ventilator | Harvard Apparatus | 55-7058 |
20-gauge I.V. catheter | Terumo Medical Corporation | 100510D |
22-gauge I.V. catheter | Terumo Medical Corporation | 081015S |
24-gauge I.V. catheter | Terumo Medical Corporation | 100522A |
9/0 Meth Blue Virgin Silk | Ashaway Line & Twine Mfg. CO | MBVS-90 |
10-0 Alcon Surgical Suture | Alcon Laboratories, Inc | 8065-192101 |
Black Braided Silk 5-0/18inches | Henry Schein | M652630 |
Heparin Sodium 1000 units/ml | APP Pharmaceuticals | 407156 |
Betadine Solution | Purdue Product | 67618-150 |
Lactated Ringer’s injection | Hospira | NDC 0409-7953-03 |
Strain of the mice | Vendor | Age, Weight | Gender, Comments |
C57BL/10 | Harlan Sprague-Dawley | 8-12 weeks, 25-30g | Male, Donor |
C57BL/6 | Harlan Sprague-Dawley | 8-12 weeks, 25-30g | Male, Donor or recipient |
Table 2. Table of mice, specific reagents and equipment.