Obliterativ bronkiolit är nyckeln hinder för den långsiktiga överlevnaden av mottagare lungtransplanterade och avsaknaden av en robust preklinisk modell utesluter att undersöka obliterativ bronkiolit immunpatogenes. Till skillnad från andra fasta organtransplantationer har vaskulariserad musen lungtransplantation först nyligen har utvecklats. Här visar vi vårt egenutvecklade obliterativ bronkiolit modellen efter mus ortotopisk enda lungtransplantation.
Ortotopisk lungtransplantation i råttor först rapporterades av Asimacopoulos och kollegor i 1971 1. För närvarande är denna metod väl accepterad och standardiserad inte bara för studier av allo-avvisande, men också mellan syngena stammar för att undersöka mekanismerna för ischemi-reperfusionsskada efter lungtransplantation. Även om tillämpningen av råtta och andra stora djurmodell 2 bidrog avsevärt till att klarlägga dessa studier, är omfattningen av dessa undersökningar begränsas av bristen på knockout och transgena råttor. På grund av att inga effektiva behandlingar för obliterativ bronkiolit, den ledande dödsorsaken bland patienter lungtransplanterade har det varit en intensiv sökning för prekliniska modeller som replikerar obliterativ bronkiolit. Den trakeal allograft modellen är den mest använda och kan reproducera en del av de histopatologiska egenskaper obliterativ bronkiolit 3. Emellertid avsaknaden av en intakt vasculature utan koppling till mottagarens luftvägarna och ofullständiga patologiska funktioner i obliterativ bronkiolit begränsar nyttan av denna modell 4. Till skillnad från transplantation av andra fasta organ, har vaskulariserade mus lungtransplantationer först nyligen rapporterats av Okazaki och kollegor för första gången i 2007 5. Tillämpa de grundläggande principerna för råtta lungtransplantation inledde vårt labb för obliterativ bronkiolit modellen med mindre histoinkompatibla antigen murina ortotopisk enda vänster lungtransplantationer som tillåter ytterligare studier av obliterativ bronkiolit immunpatogenes 6.
Ortotopisk lungtransplantation hos möss är en utmaning på grund av mikrokirurgisk krav och extrema känslighet av vävnader. Införande av manschetten tekniken har gjort det möjligt för den omfattande användningen av ortotopisk lungtransplantation hos råttor 8. Detta blev grunden för utvecklingen av ortotopisk lungtransplantation modell i möss i vårt labb. Hos möss och råttor, till skillnad från människor, innehåller den vänstra lungan enda lob och utgör endast 25% av den totala lungan massan. Detta gör vänstra inre lungtransplantation genomförbara inom den murina modellen utan behovet av ett cirkulationssystem stödsystem.
Våra preliminära operationer visade att ventilationen och perfusion av transplanterad lunga var starkt beroende på storleken av PV anastomos. Specifik PV anastomotic manschettstorlek utnyttjades för att matcha donator och mottagare som rapporterats 9. Olämplig manschett dimensionering resulterade i antingen atelektas av transplanterade lungorna eller sårruptur av PV anastomosis. Okazaki et al rapporterade användning av kombinerade fartygets ligering och klippa luftrör 5. I den aktuella studien använder vi ett aneurysm klämma för alla hilar strukturer, som vi föreslår kan förkorta varm ischemisk tid. En begränsning av ortotopisk vänstra lungtransplantation i murina modellen är att mottagande djur kan överleva efter alloimmuna-medierad nekros av sina allografter 5. Därför överlevnad studier inte genomförbara och transplantat bedömning beror på histologisk undersökning av det transplanterade lungan 10.
Användning av denna teknik, har vi utvecklat en preklinisk obliterativ bronkiolit modell i möss. Närmare bestämt är det donatormus C57BL/10 och mottagaren är C57BL / 6. Detta antyder roll av mindre, och inte stora, histokompatibilitetsantigener i obliterativ bronkiolit patogenes 6. Vidare har vi rapporterat neutralisering IL-17 förhindrar obliterativ bronkiolit i den murina modellen. Detta lägeL representerar en ny forsknings-verktyg för undersökning av lungtransplantation och främjande av kliniska lungtransplantationer.
The authors have nothing to disclose.
Finansieringskällor: Detta arbete som stöds av National Institutes of Health bidrag HL067177 och HL096845 och P01AI084853 till DSW
Name of the equipment | Company | Catalogue number |
Zeiss Opmi 6SFC-1880 | Prescott’s Inc | PMZ014 |
Harvard Rodent Ventilator | Harvard Apparatus | 55-7058 |
20-gauge I.V. catheter | Terumo Medical Corporation | 100510D |
22-gauge I.V. catheter | Terumo Medical Corporation | 081015S |
24-gauge I.V. catheter | Terumo Medical Corporation | 100522A |
9/0 Meth Blue Virgin Silk | Ashaway Line & Twine Mfg. CO | MBVS-90 |
10-0 Alcon Surgical Suture | Alcon Laboratories, Inc | 8065-192101 |
Black Braided Silk 5-0/18inches | Henry Schein | M652630 |
Heparin Sodium 1000 units/ml | APP Pharmaceuticals | 407156 |
Betadine Solution | Purdue Product | 67618-150 |
Lactated Ringer’s injection | Hospira | NDC 0409-7953-03 |
Strain of the mice | Vendor | Age, Weight | Gender, Comments |
C57BL/10 | Harlan Sprague-Dawley | 8-12 weeks, 25-30g | Male, Donor |
C57BL/6 | Harlan Sprague-Dawley | 8-12 weeks, 25-30g | Male, Donor or recipient |
Table 2. Table of mice, specific reagents and equipment.